国家自然科学基金(30571554)
- 作品数：13 被引量：38H指数：4
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- 乐果亚慢性染毒对大鼠自发活动的影响
- 2008年
- 目的探讨有机磷农药乐果90d染毒对大鼠自发活动的影响。方法48只健康雄性SD大鼠随机分成4组,分别使用生理盐水(对照),5mg/kg(低剂量)、10mg/kg(中剂量)和20mg/kg(高剂量)的乐果灌胃给药,每周染毒5d,每天1次,实验周期90d。定期尾静脉采血,测定全血AChE活性,实验结束时随机取半数动物,用DigBehv-LR型自发活动视频分析系统测定其自发活动;其余动物均断头处死,测定脑AChE活性。结果实验期间,各乐果染毒组动物全血AChE活性明显抑制,实验后期有所恢复。实验结束时,低、中、高剂量组脑组织AChE活性分别为对照组的78%、63%和42%,存在剂量-效应关系。大鼠自发活动测试结果显示,随染毒剂量的增加,低、中、高剂量大鼠的总路程、活动时间、平均速度有下降趋势,而休息时间有升高趋势。其中高剂量组的变化最为明显,总路程、活动时间、平均速度同对照组相比分别下降了54.6%、55.3%、54.7%,而休息时间增加了41.3%,同对照组相比都有显著性差异(P<0.05)。对大鼠自发活动指标和全血及脑AChE活性的相关性进行分析,发现染毒大鼠的总路程、活动时间、平均速度和休息时间和脑AchE活性呈显著相关(P<0.05),而与全血AchE活性在统计学上无相关性(P>0.05)。结论乐果亚慢性染毒会使大鼠自发活动降低,这可能同脑组织AChE活性受到长期抑制有关。
- 姚新民吴强恩常秀丽姜楠班婷婷邵春风周志俊
- 关键词：乐果乙酰胆碱酯酶
- 兴奋性氨基酸递质系统在乐果诱导星形胶质细胞活化中的作用
- 2011年
- 目的 探讨兴奋性氨基酸递质系统在乐果染毒后皮层星形胶质细胞活化中的作用.方法 新生大鼠皮层神经细胞传代3次后获得纯化的星形胶质细胞,分别加入终浓度为10-6、10-5、10-4mol/[的乐果,并用50和100 μmol/LN-甲基-N-天门冬氨酸（NMDA）受体非竞争性拮抗剂MK801对10-4mol/L乐果染毒组进行干预.染毒后48 h收获细胞,高效液相色谱-荧光检测系统（HPLC-FLD）方法测定细胞内兴奋性氨基酸递质含量,反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测NMDA受体NR2B亚基、谷氨酸（Glu）、谷氨酸转运体（GLT-1）、天冬氨酸（Asp）、谷氨酸/天冬氨酸转运体（GLAST）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）及S100β mRNA表达的变化,免疫荧光染色半定量检测GFAP以及S100β的蛋白表达.结果 各剂量染毒组GLASTmRNA表达下降为对照组的67.8%、68.6%和76.2%,差异有统计学意义（P＜0.05）;10-4 mol/L染毒组Glu、Asp含量与对照组相比明显下降,差异有统计学意义（P＜0.01）;与对照组比较,10-4mol/L染毒组GFAP和10-5mol/L染毒组S100βmRNA表达,10-5、10-4mol/L染毒组GFAP蛋白表达,10-4mol/L染毒组S100β蛋白表达明显上升,差异有统计学意义（P＜0.01）,有剂量依赖趋势.对10-4mol/L染毒组给予50和100 μmol/L MK801干预后,GLT-1、GLAST mRNA表达水平较10-4 mol/L染毒组明显上升,差异有统计学意义（P＜0.01）,NR2B mRNA表达进一步升高,与未干预前相比,差异无统计学意义（P＞0.05）,但均明显高于对照组水平,差异有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）;100 μmol/L MK801干预后,Glu的含量升高为10-4mol/L染毒组的1.81倍,差异有统计学意义（P＜0.01）;50和100μmol/LMK801干预后,GFAP转录及蛋白水平较未干预前明显下降,差异有统计学意义（P＜0.01）,50 μmol/L干预组S100β蛋白表达水平仍然高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 乐果对兴奋性氨基酸递质系统的影响参与了星形胶质细胞的�
- 崔红梅常秀丽徐甫吴庆周志俊
- 关键词：乐果星形细胞兴奋性氨基酸类
- 乐果对大鼠血清单胺类递质的影响被引量：4
- 2006年
- 目的观察乐果染毒对大鼠血清单胺类递质去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)及其代谢物3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)浓度变化的影响,探讨乐果中毒的非胆碱能机制。方法雄性SD大鼠104只随机分为对照组(生理盐水)、乐果低(38．9mg/kg)、中(83．7mg/kg)、高(180．0 mg／kg)3个剂量组,一次性腹腔注射染毒,给药后0．5、2、8、24 h断头处死并分离血清,用高效液相色谱电化学检测法检测血清中NE、E、5-HT、DA及其代谢物DOPAC的浓度。结果不同时程的染毒组(低、中、高剂量组)血清中DA及其代谢物DOPAC和5-HT的浓度比对照组分别增加8．42％-248．42%、17．22％-68．21％。不同时程的染毒组血清NE和E的浓度比对照组分别减少9．65％-38．26％和11．00％-32．62％。5-HT浓度开始随染毒剂量增加而减少,但随染毒时程的增加,则随染毒剂量增加而增加。DA、DOPAC、NE、E和5-HT的浓度在不同时程的低、中、高剂量组间差异均有统计学意义(P<0．05)。结论DA、DOPAC和5-HT浓度有随染毒剂量和时程的增加而增加的趋势,NE和E浓度有随染毒剂量和时程的增加而减少的趋势,存在剂量时程效应关系。
- 阮国洪吴强恩顾平郑力行顾锡安周志俊
- 关键词：乐果多巴胺肾上腺素血清
- 有机磷农药对星形胶质细胞的影响被引量：1
- 2008年
- 有机磷农药是我国生产和使用最多的农药,对神经的损伤是有机磷农药中毒患者致死的主要原因。研究表明星形胶质细胞可能是有机磷农药除乙酰胆碱酯酶之外的作用靶点。有机磷农药能够激活星形胶质细胞,反应性胶质化在有机磷农药的神经毒性中具有两面性,研究者们更倾向于认为它对有机磷农药神经毒性的保护作用。
- 崔红梅周志俊
- 关键词：星形胶质细胞有机磷农药神经毒性
- 尿中毒死蜱及其代谢物的分析被引量：6
- 2007年
- 目的建立尿样中毒死蜱及其代谢物3,5,6-三氯-2-吡啶醇(TCPyr)的高效液相色谱分析方法。方法采用乙酸乙酯-正己烷混合溶剂提取,Inertsil ODS-3反相分离柱,以乙腈-甲醇-水-0．05％三氟乙酸为流动相梯度洗脱,毒死蜱和TCPyr的紫外检测波长分别为290 nm与298 nm,并利用二极管阵列检测器对毒死蜱和TCPyr的紫外图谱进行鉴定。结果毒死蜱和TCPyr的线性范围分别为0．2616-13．08μg／mL和0．137 4-6．870μg／mL,相关系数良好;最低检测限分别为105．0ng／mL和62．5 ng/mL;日内及日间精密度RSD均小于10．0％,平均加标回收率分别为67．0％和85．0％。结论此方法灵敏准确,简便实用,可用于尿样中毒死蜱与TCPyr的含量分析。
- 邬春华郑力行何永华周志俊
- 关键词：毒死蜱高效液相色谱尿样
- 乐果亚慢性染毒对大鼠谷氨酸递质系统和学习记忆的影响被引量：4
- 2007年
- 目的探讨有机磷农药乐果亚慢性染毒对大鼠学习记忆功能的影响及对中枢兴奋性氨基酸神经递质系统的可能作用。方法48只成年雄性SD大鼠随机分成4组,每组12只。对3个实验组以乐果经口灌胃(5、10和20 mg/kg),每周5 d,每天1次,共13周;对照组给予等体积的生理盐水。染毒结束,每组随机取6只大鼠在Morris水迷宫中检测动物学习记忆功能的改变情况;其余大鼠断头处死进行生化测定。使用硫代乙酰胆碱-二硫代双硝基甲酸(Asch-DTNB)法测定海马中乙酰胆碱酯酶(AChE)活力;用反相高效液相色谱荧光法测定海马中谷氨酸含量;用配体受体结合实验测定N-甲基- D-天门冬氨酸(NMDA)受体的Bmax和Kd值。结果大鼠定位航行实验中,随着训练期的增加,各组动物逃避潜伏期明显缩短;中、高剂量乐果染毒组的潜伏期比对照组长,差异有统计学意义(P<0.05)。空间探索实验中,高剂量组与对照组相比,穿越平台位置的次数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。动物染毒后,低、中、高染毒组大鼠海马AChE活力分别为对照组的77.9%、62.8%和42.1%,差异有统计学意义,存在剂量一效应关系(P<0.01)。中、高剂量组大鼠海马分区谷氨酸含量与对照组相比增加134.5%、132.9%,差异有统计学意义(P<0.05);中、高剂量组NMDA受体Bmax值与对照组相比降低21.2%、23.2%,差异有统计学意义(P<0.05);各剂量组受体Kd值增加22.2%～33.1%,且高剂量组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。大鼠的空间记忆能力下降与海马中NMDA受体的亲和力下降在统计学上有相关关系(P<0.05)。结论乐果亚慢性染毒可引起大鼠中枢兴奋性氨基酸神经递质含量及NMDA受体密度和亲和力的改变,并在降低大鼠的学习记忆功能中可能发挥一定的作用。
- 吴强恩姚新民班婷婷姜楠邵春风常秀丽周志俊
- 关键词：乐果神经行为学表现谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸
- 尿中有机磷农药代谢产物的测定被引量：14
- 2006年
- 目的改进样品预处理方法并建立了采用毛细管气相色谱法，测定尿样中二烷基磷酸酯类有机磷农药代谢物的含量。方法优化改进预处理方法，以乙腈为提取剂，多步提取、净化、富集并辅以无水硫酸钠干燥脱水，提取物再与五氟溴苄苯（PFBBr）衍生化；毛细管气相色谱法-火焰测光度检测器测定了尿样中二烷基磷酸酯类有机磷农药代谢物的含量，气相色谱-质谱-化学电离源对衍生化产物进行了质谱鉴定。结果5种代谢物在12min内得到良好分离，样品的加标回收率为70．2％～93．2％，相对标准偏差小于10．0％。结论该方法稳定，灵敏度高、重现性好。方法适用于普通人群和职业暴露人群有机磷农药接触水平的检测。
- 邬春华郑力行周志俊
- 关键词：毛细管气相色谱法尿样
- 乐果急性染毒对大鼠海马抑制性氨基酸神经递质的影响被引量：2
- 2007年
- 目的研究乐果急性染毒对大鼠海马抑制性氨基酸γ-氨基丁酸(GABA)和甘氨酸(Gly)含量的影响以及它们的剂量-时程-效应关系。方法大鼠38.9、83.7、180mg/kg乐果腹腔注射后于0.5、2、8、24h断头取海马,对照组注射生理盐水。Asch-DTNB法测定全血及海马中乙酰胆碱酯酶活性,高效液相色谱荧光法测定海马匀浆液中GABA、Gly的含量。结果全血及海马中胆碱酯酶活性显著下降,同对照相比,各剂量组各时间段全血AChE活性均低于50%,海马低于75%,存在剂量依赖性并在24h后活性有所恢复。海马GABA及Gly含量都有不同程度增加,其中海马低剂量组各时间段,中剂量组0.5、2、8h,高剂量组0.5、24h GABA含量与对照组相比都有统计学差异。Gly低剂量组在染毒8h,中剂量组0.5h,高剂量组0.5、24h的含量可见有统计学差异的升高。结论乐果急性染毒后,大鼠海马抑制性氨基酸GABA及Gly有代偿性升高,GABA存在剂量-时程-效应关系,Gly存在时程-效应关系,同传统的有机磷胆碱能中毒机制一起,发挥乐果的毒作用。
- 班婷婷吴强恩姜楠吴同俊邵春风阮国洪常秀丽周志俊
- 关键词：乐果抑制性氨基酸Γ-氨基丁酸甘氨酸
- 新生鼠星形胶质细胞分离培养方法被引量：6
- 2009年
- 俞爱青崔红梅周志俊
- 关键词：星形胶质细胞细胞培养纯化
- 乐果对大鼠皮层神经元氧化损伤及兴奋性氨基酸递质含量的影响被引量：2
- 2009年
- 目的观察乐果染毒对原代培养的大鼠皮层神经元的的毒性作用及损伤机制。方法体外原代培养SD大鼠皮层神经元6d后，加入终浓度为1、5、10、50、100μmol／L的乐果，于染毒后48h收获细胞，取匀浆上清液用于氧化损伤及细胞内兴奋性氦基酸递质的测定，流式细胞术检测细胞凋亡。结果染毒48h后。乐果浓度在5、10、50、100μmol／L时，超氧化物歧化酶（SOD）活力[（1．04±0．02）、（0．99±0．02）、（0．96±0．02）、（0．91±0．02）U／rag prol即明显降低，谷胱甘肽（GSH）含量[（219．35±6．79）、（205．6±6．29）、（194．06±2．63）、（93．68±7．56）mg／g pro]明显降低，丙二醛（MDA）含量[（21．22±0．29）、（24．01±0．34）、（27．15±1．02）、（32．91±1．39）nmol／mg pro]明显升高，与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；10、50、100μmol／1．剂量组大冬氨酸含镀明显升高，1、5、10、50、100μmol／L剂量组谷氨酸含量明显升高，与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；1、10、100μmol／L染毒组乐果对神经元细胞凋亡影响明显。乐果染毒后，神经元内MDA含量与兴奋性氨基酸（天冬氨酸、谷氨酸）含量呈正相关，相关系数分别为0．937和0．759；而与GSH含量呈负相关，相关系数分别为-0．868和-0．801，有统计学意义（P〈0．01）。结论乐果可引起神经元氧化损伤及兴奋性氨基酸递质含量变化，共同参与神经元的凋亡过程。
- 崔红梅俞爱青张平吴强恩徐甫常秀丽周志俊
- 关键词：乐果神经元氨基酸类超氧化物歧化酶丙二醛
