重庆市教委科研基金(KJ090317)
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 相关作者：杨娥张恒术邹崎葩凌镜刘朝东更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 5-氮杂-2-脱氧胞苷对人瘢痕疙瘩成纤维细胞的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷对人瘢痕疙瘩成纤维细胞生长的抑制作用及对人瘢痕疙瘩成纤维细胞相关因子的影响。方法:收集人瘢痕疙瘩以及周围正常皮肤标本原代培养成纤维细胞,分为瘢痕疙瘩成纤维细胞5-氮杂-2-脱氧胞苷药物干预组、瘢痕疙瘩成纤维细胞对照组、正常皮肤成纤维细胞5-氮杂-2-脱氧胞苷药物干预组及正常皮肤成纤维细胞对照组4组,用RT-PCR检测各组转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)mRNA、Smad7mRNA的表达,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测各组细胞的周期及凋亡。结果:人瘢痕疙瘩成纤维细胞较正常皮肤成纤维细胞TGF-β1mRNA表达增高(P=0.001),Smad7mRNA表达降低(P=0.001),细胞周期停滞于G0/G1期(P=0.035)及细胞凋亡(P=0.006)比例降低;5-氮杂-2-脱氧胞苷干预人瘢痕疙瘩成纤维细胞后,TGF-β1mRNA表达降低(P=0.003),Smad7mRNA回升(P=0.000),FCM显示瘢痕疙瘩成纤维细胞停滞于G0/G1期比例增加(P=0.000)并且细胞凋亡率增加(P=0.047),而正常皮肤成纤维细胞组无明显变化(P均>0.05)。结论:甲基化酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷可影响瘢痕疙瘩形成相关因子的表达并且可抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖及促进其凋亡,而对正常皮肤的成纤维细胞无明显影响。瘢痕疙瘩的发病可能与相关基因甲基化有关,5-氮杂-2-脱氧胞苷可能成为瘢痕疙瘩治疗的新选择。
- 杨娥张恒术
- 关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞5-氮杂-2-脱氧胞苷转化生长因子-Β1SMAD7
- 地西他滨抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的实验研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨地西他滨对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及TGF-β/Smad信号通路相关蛋白表达的影响。方法 CCK8法检测不同浓度地西他滨对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响。Western blotting检测药物作用前后瘢痕疙瘩成纤维细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、Smad4、Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)和Ⅲ型胶原α1链(COL3A1)的表达;采用免疫共沉淀法及Smad4 siRNA转染研究p-Smad2/3-Smad4共聚体在瘢痕疙瘩形成中的作用,Real-time PCR检测下游转录因子的表达情况。结果 CCK8法检测结果显示:干预后48 h,随着地西他滨浓度的升高,成纤维细胞生长抑制率总体呈上升趋势,实验选择半数抑制浓度4.38μmol/L作为地西他滨对耳垂瘢痕疙瘩成纤维细胞的干预浓度。药物干预后,瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β1、p-Smad2/3、COL1A1和COL3A1表达及p-Smad2/3-Smad4共聚体形成显著减少。Smad4被沉默后,瘢痕疙瘩成纤维细胞COL1A1表达减少,转录因子c-jun、runx2、irf-7 mRNA的表达下调。结论地西他滨抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,使胶原蛋白合成受限,其机制可能与抑制Smad2/3的磷酸化及p-Smad2/3-Smad4蛋白复合体的形成有关。
- 邹崎葩凌镜刘朝东
- 关键词：地西他滨瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-Β/SMAD信号通路
- 甲基化酶抑制剂5氮杂-2-脱氧胞苷对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β／smad信号通路的影响被引量：9
- 2013年
- 目的探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β／smad信号通路的影响。方法收集瘢痕疙瘩及正常皮肤组织各15例，免疫组化检测磷酸化smad2（P-smad2）和磷酸化smad3（p-smad3）在瘢痕疙瘩和正常皮肤中的阳性表达率；将瘢痕疙瘩分为实验组和对照组，实验组以5，氮杂-2-脱氧胞苷（5×10^-5mmol／L）干预，对照组用等量的DMEM培养液，采用组织块法培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞，流式细胞仪分析5-氮杂-2-脱氧胞苷（5×10^-5mol／L）对瘢痕疙瘩成纤维细胞周期及凋亡的影响；Westernblot检测各组p-smad2、p-smad3、TGF-β1和smad7的表达变化；细胞免疫荧光染色法观察各组瘢痕疙瘩成纤维细胞内p-smad2和p-smad3蛋白的影响。结果瘢痕疙瘩组织中p-smad2和p-smad3阳性表达率明显高于正常皮肤组织中p-smad2和P-smad3阳性表达。流式细胞仪显示5-氮杂-2-脱氧胞苷干预瘢痕疙瘩成纤维细胞后，细胞停滞于G0／G1期比例增加并且细胞凋亡率增加，瘢痕疙瘩成纤维细胞中p-smad2和p-smad3蛋白的表达减少，同时，TGF—β1蛋白表达减少，smad7蛋白表达回升。此外，5-氮杂-2-脱氧胞苷抑制smad2和smad3磷酸化及核转移。结论甲基化酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷可抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖及促进其凋亡，其作用机制可能与抑制TGF-β／srnad信号通路有关。
- 邹崎葩杨娥张恒术
- 关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞5-氮杂-2-脱氧胞苷TGF-ΒSMAD通路
