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白细胞介素-1β对大鼠视网膜Muller细胞磷酸化的信号转导及转录活化因子3表达的影响: 2009年; 目的观察不同浓度白细胞介素-1β（IL-1β）对大鼠视网膜Muller细胞磷酸化的信号转导及转录活化因子3（pSTAT3）表达的影响。方法将体外培养的Sprague—Dawley（SD）大鼠Muller细胞分别以0．0、0．1、1．0、5．0、10．0ng／ml浓度的IL-1β刺激24h后，免疫荧光法和蛋白质印迹（Western botting）检测细胞内pSTAT3的表达改变。SD大鼠32只，随机分为对照组、100、500、1000ng／ml组，每组均为8只大鼠。分别将磷酸缓冲液（PBS）配制的浓度分别为100、500、1000ng／ml的IL-1β注人大鼠的左眼玻璃体腔中，对照组大鼠左眼玻璃体腔注射相同容积的PBS，24h后采用同样方法检测pSTAT3在视网膜的表达情况。结果免疫荧光法和Westernbotting检测结果显示，IL-1β刺激24h后，IL-1β浓度为0．0ng／ml时，pSTAT3在细胞核内有极少量表达，当浓度达到1．0ng／ml后，pSTAT3在细胞核内的表达随浓度增加而升高，差异有统计学意义（F=46．64，43．78；P〈0．01）。对照组大鼠视网膜内无明显pSTAT3的表达，当浓度达到100．0ng／ml后，pSTAT3在视网膜内的表达随浓度增加而升高，差异有统计学意义（F=73．53，43．70；P〈0．01）；pSTAT3主要表达于内核层和神经节细胞层。双荧光标记显示，对照组大鼠视网膜内无pSTAT3表达，胶质纤维酸性蛋白（GFAP）主要表达于神经节细胞层，并向视网膜色素上皮层呈丝状放射；从100ng／ml IL-1β刺激24h后起，内核层就出现颗粒状GFAP和pSTAT3的双标染色。结论IL-1β可以上调Muller细胞pSTAT3的表达，这可能是Muller细胞发生反应性胶质活化的通路之一。; 沈玺徐格致; 关键词：MULLER细胞

高糖对培养的大鼠视网膜Muller细胞的影响被引量：3: 2008年; 目的探讨高糖对体外培养的大鼠视网膜Muller细胞的活力和谷氨酸代谢功能有否改变及其可能机制。方法将体外培养的大鼠视网膜Muller细胞随机分为正常葡萄糖组（5mmol／L）和高糖组（25mmol／L），培养24h后MTT自动比色法测定两组细胞的活力，采用间接荧光免疫组化法和Western蛋白印迹法检测两组细胞胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和磷酸化的信号转导及转录活化因子3（pSTAT3）的表达情况；采用间接荧光免疫组化法实时PCR检测两组细胞谷氨酰胺合成酶（GS）和c-Jun的蛋白和mRNA表达变化。结果MTT结果显示高糖状态下细胞活力提高，与对照组相比差异有统计学意义；与对照组相比，高糖组细胞GFAP、pSTAT3、c-Jun蛋白和mRNA的表达均升高，而GS蛋白和mRNA的表达降低。结论经高糖处理的Mailer细胞活力提高，其机制可能与GFAP和pSTAT3的表达升高有关；GS表达下降的可能机制为高糖激活了c-Jun基因。Mtiller细胞由于谷氨酸循环中的关键酶GS的表达减少而代谢谷氨酸的能力下降，这可能是糖尿病视网膜病变中导致神经节细胞死亡的机制之一。; 沈玺徐格致; 关键词：高糖视网膜MULLER细胞细胞培养谷氨酰胺合成酶

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上海市科委“登山计划”(06jc14015)

文献类型

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机构

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