山东省自然科学基金(ZR2010HM029)
- 作品数：7 被引量：24H指数：3
- 相关作者：张颜波牛敬忠邵国杨明峰吴月鹏更多>>
- 相关机构：泰山医学院附属医院包头医学院首都医科大学宣武医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
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- 低氧预适应对小鼠急性脑梗死缺血半暗带神经元凋亡的影响及机制研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨低氧预适应对小鼠急性脑梗死缺血半暗带神经元凋亡的影响,并对相关凋亡机制进行研究。方法将Blb/c近交系小鼠按照随机数字表法分为(1)正常对照组(N),无任何处理;(2)假手术组(C),仅行冷光源照射,不注射玫瑰红;(3)急性脑梗死组(CI),光化学法诱导小鼠脑皮质梗死模型;(4)低氧预适应+急性脑梗死组(HP+CI),低氧预适应后复制光化学法诱导小鼠脑皮质梗死模型。应用免疫荧光、激光共聚焦等技术检测模型制作成功后24h脑内缺血半暗带区细胞凋亡、Bcl-2、Bax和Caspase-3表达变化。结果 N组、C组小鼠大脑皮质偶见TUNEL阳性细胞,CI组和HP+CI组阳性细胞数明显增多,其中HP+CI组较CI组减少,差异有统计学意义(P<0.01)。CI组和HP+CI组的Bcl-2表达均分别非常显著地高于N组、C组,HP+CI组又显著地高于CI组。CI组和HP+CI组Bax的表达均分别非常显著地高于N组、C组,HP+CI组却非常显著地低于CI组。CI组和HP+CI组Caspase-3的表达均分别非常显著地高于N组、C组,但HP+CI组却非常显著地低于CI组。结论低氧预适应通过Bcl-2的高表达、Bax低表达和Caspase-3的低表达,抵御急性脑梗死缺血半暗带神经元凋亡,参与脑梗死保护机制。
- 赵丽红林立文张颜波
- 关键词：急性脑梗死低氧预适应凋亡BAXCASPASE-3
- 小鼠Reelin基因启动子克隆鉴定及生物信息学分析
- 2012年
- 目的克隆小鼠Reelin基因启动子区并分析其潜在DNA甲基化位点和转录因子结合位点。方法根据NCBI上小鼠Reelin 5'非翻译区序列设计引物,利用高保真PCR方法克隆昆明小鼠Reelin启动子区序列,并进行TA克隆,测序鉴定。利用亚硫酸氢钠处理基因组DNA,通过PCR技术和测序技术对Reelin启动子-636 bp至-135bp序列甲基化情况分析。应用Methyl Primer Express software V1.0和TFSEARCH软件分析该区域甲基化位点和转录因子结合位点。结果成功克隆了小鼠Reelin基因启动子区0至-450片段。甲基化测序分析小鼠Reelin启动子区-636 bp至-135 bp序列没有CpG二核苷酸被甲基化。小鼠Reelin翻译起始点0至-450片段利用CpG岛序列分析软件分析显示,该区域C+G含量高达78.71%,CpG含量为14.44%。该区域有120多个潜在转录因子结合位点。结论在小鼠Reelin基因启动子区0～-450发现有一个CpG岛和多个转录因子结合位点,该区域可能在小鼠Reelin基因表达调控起重要作用。
- 张建军姜树原张颜波吴松泉牛敬忠邵国
- 关键词：REELIN启动子生物信息学DNA甲基化
- 低氧预适应对缺血再灌注脑损伤小鼠学习记忆的影响及机制研究被引量：4
- 2016年
- 目的初步探讨低氧预适应对缺血再灌注脑损伤小鼠学习记忆的影响及H丁能保护机制。方法将健康成年昆明小鼠采用随机数字表法分为正常对照组（N组）、低氧预适应组（HPC组）、假手术组（C组）、缺血再灌注组（0组）和低氧适应±缺血再灌注组（HPC±O组），HPC±O组于缺血再灌注前24h给予低氧预处理。采用Morris水迷宫检测各组小鼠的平均逃避潜伏期及平台象限的游泳时间，免疫荧光检测小鼠脑组织海马CA1区神经细胞凋亡情况。结果HPC±0组平均逃避潜伏期第2天、第3天、第4天[分别为（39．92±4．52）s、（30．98±2．44）s及（19．69±4．27）s]均明显低于0组[分别为（54．35±3．66）s、（46．31±4．81）S及（36．81-±3．86）S]，而平台象限游泳时间百分比[（36．44±5．33）％]均明显高于0组[（24．50±2．59）％，P〈0．05]。HPC±O组凋亡神经细胞荧光懂度为（1．17±0．14），而0组为（1．35±0．14）（P〈0．05）。结论低氧预适应可能通过增加缺血性再灌注脑损伤小鼠海马CA1区神经细胞对缺氧的耐受性，减少神经细胞凋亡的发生。
- 黄媛媛张颜波李美艺杨明峰赵同牛敬忠
- 关键词：低氧预适应缺血再灌注脑损伤学习记忆细胞凋亡
- 低氧预适应对小鼠急性脑梗死缺血半暗带血管新生的影响被引量：9
- 2012年
- 目的探讨低氧预适应对小鼠急性脑梗死缺血半暗带血管新生的影响。方法将Blb/c近交系小鼠按照随机数字表法分为:正常对照组(N),无任何处理;假手术组(C),仅行冷光源照射,不注射玫瑰红;急性脑梗死组(CI),光化学法诱导小鼠脑皮质梗死模型;低氧预适应+急性脑梗死组(HP+CI),低氧预适应后复制光化学法诱导小鼠脑皮质梗死模型。应用免疫荧光、激光共聚焦等技术检测模型制作成功后24h和72h脑内缺血半暗带区VEGF、CD31荧光强度变化。结果 N、C组VEGF、CD31脑内皮质极少量表达;CI和HP+CI组小鼠24h VEGF主要表达于脑内缺血半暗带区神经元,72h则主要在缺血半暗带区血管内皮细胞表达;24h、72h CD31均在缺血半暗带区血管内皮细胞表达。CI和HP+CI组缺血半暗带区VEGF、CD31表达明显高于N组、C组(P<0.01);HP+CI组在24h、72h时缺血半暗带区VEGF、CD31表达显著高于CI组(P<0.01)。经Pearson相关分析,VEGF与CD31表达成正相关。结论低氧预适应通过增加急性脑梗死缺血半暗带区VEGF和CD31的表达,促进血管新生,起到对急性脑梗死缺血性损伤的保护作用。
- 李思颉张颜波邵国杨明峰牛敬忠吕国蔚吉训明
- 关键词：低氧预适应急性脑梗死缺血半暗带VEGFCD31
- 小鼠PP1基因启动子克隆鉴定及潜在甲基化位点分析
- 2012年
- 目的 PP1分子是一种与学习记忆相关的分子,目前对其表达调控尚未有系统的研究。为了研究小鼠PP1基因启动子区甲基化潜在的位点和转录因子结合位点而克隆小鼠PP1启动子区。方法本实验利用NCBI上小鼠PP15'非翻译区序列设计引物,使用高保真Taq酶,利用PCR方法扩增昆明小鼠PP1启动子0至-320序列,并进行TA克隆,测序鉴定。利用亚硫酸氢钠处理基因组DNA,通过PCR技术和测序技术对PP1启动子0至-320序列甲基化情况分析。然后再应用Methyl Primer Express software V1.0和TFSEARCH软件分析该区域甲基化位点和转录因子结合位点。利用CpG岛序列分析软件分析。结果成功克隆得到PP1基因启动区0到-320 bp片段。甲基化测序分析该片段只有一个CpG位点被甲基化。软件分析表明小鼠PP1翻译起始点到-320 bp区域C+G含量高达70.25%,CpG含量为11.75%,含有70个潜在的转录因子结合位点。结论在小鼠PP1基因启动子区0～-320发现有一个CpG岛和多个转录因子结合位点,该区域可能在小鼠PP1基因表达调控起重要作用。
- 张姝张颜波吴松泉牛敬忠邵国
- 关键词：DNA甲基化
- 人参皂苷Rg2对脑缺血再灌注大鼠神经保护作用的研究被引量：8
- 2014年
- 目的研究人参皂苷Rg2对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用线栓法制成大鼠大脑中动脉栓塞再灌注模型,术后连续腹腔注射5 d给予不同剂量的人参皂苷Rg2,采用Longa 5级评分标准对脑缺血再灌注大鼠进行神经功能评定,采用TTC染色测定梗死面积,酶组织化学染色显示乙酰胆碱酯酶神经元,比色法测定乙酰胆碱酯酶活性。结果神经功能评分显示人参皂苷Rg2低、中、高剂量组与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。TTC染色结果显示人参皂苷Rg2低、中、高剂量能显著减少梗死面积,与模型组相比,差别有显著性(P<0.01)。Ach E组织化学染色可见人参皂苷Rg2高、中剂量组大鼠基底前脑Ach E阳性神经元数目与模型组比较差别有显著性(P<0.01),人参皂苷Rg2各组和尼莫地平组Ach E活性明显高于模型组,差别有统计学意义(P<0.01)。结论人参皂苷Rg2可通过减少缺血再灌注大鼠神经功能评分,减少脑梗死面积,提高胆碱能神经活性,对脑缺血再灌注损伤具有防护作用。
- 陈美华吴月鹏张颜波金毅
- 关键词：人参皂苷RG2脑缺血再灌注乙酰胆碱酯酶
- 白花丹参预处理对大鼠局灶性脑缺血Bcl-2和Bax的影响被引量：2
- 2013年
- 目的初步探讨白花丹参根水提物作为药理性预处理物的可行性及其神经保护作用机制。方法将健康成年Wistar大鼠随机分为白花丹参高、中、低浓度组和空白对照组、假手术组,分别经白花丹参高、中、低浓度水提物和蒸馏水连续灌胃7d,制备大脑中动脉闭塞模型后24h,采用免疫荧光显微镜检测大鼠脑组织标本凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2的表达。结果神经功能评分显示空白对照组评分高于各浓度给药组,低、中、高浓度组与空白对照组比较有统计学意义(P<0.05)。各浓度组间差异无统计学意义(P>0.05)。Bcl-2蛋白阳性染色免疫荧光检测显示:假手术组荧光强度极低,空白对照组较假手术组表达明显增多,有统计学意义(P<0.01);空白对照组荧光强度较低,白花丹参各浓度组与空白对照组相比,荧光强度增高,有统计学意义(P<0.05)。随白花丹参浓度增高,荧光强度逐渐增高,各浓度组间有统计学意义(P<0.05)。Bax蛋白阳性染色免疫荧光检测显示:假手术组荧光强度极低,空白对照组较假手术组表达明显增多,有统计学意义(P<0.01);空白对照组荧光强度强,与空白对照组比较白花丹参各浓度组荧光强度降低,有统计学意义(P<0.05);白花丹参各浓度组随浓度增高,荧光强度逐渐降低,各浓度组间有统计学意义(P<0.05)。结论不同浓度白花丹参水提物预处理均可以明显减少凋亡细胞数,对局灶性脑缺血神经细胞具有保护作用。作用机制可能与增加Bcl-2表达,降低Bax表达有关。
- 吴月鹏张颜波朱良珍李美艺左欢牛敬忠
- 关键词：白花丹参BCL-2BAX
