国家高技术研究发展计划(2007AA022455)
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 相关作者:谭文杰殷霄邓瑶卢莎沈晓玲更多>>
- 相关机构:中国疾病预防控制中心内蒙古医科大学温州医学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 基于丙型肝炎病毒结构基因的DNA疫苗初免重组腺病毒疫苗加强免疫小鼠后可诱导交叉保护被引量:1
- 2016年
- 目的 探索基于HCV多个靶抗原的新型T细胞疫苗研发策略.方法 用表达HCV河北株(1b亚型)结构蛋白(Core,E1,E2)的DNA疫苗与重组腺病毒载体疫苗联合免疫小鼠,并采用ELISPOT与胞内细胞因子染色分析(ICS)方法分析了特异性T细胞免疫应答特点与交叉保护效果.结果 DNA疫苗与重组腺病毒疫苗联合免疫小鼠后,针对Core、E1、E2都可产生较强细胞免疫应答;ELISPOT结果表明:联合免疫针对E1的反应最强,明显高于DNA疫苗同源免疫;ICS结果显示:针对E1抗原特异的CD4+T细胞分泌的TNF-α水平与CD8+T细胞分泌的IFN-γ水平以及E2抗原特异的CD4+T细胞与CD8+T细胞分泌的IFN-γ水平均高于三针DNA疫苗免疫组.在表达2a亚型HCV(JFH1)全长ORF的重组痘苗病毒替代攻击小鼠模型中,复制型DNA疫苗与重组腺病毒联合免疫可表现出交叉保护效应.结论 本研究为HCV新型疫苗研制及免疫保护机制研究提供了一定参考.
- 邓瑶管洁殷霄蓝佳明陈红王文谭文杰
- 关键词:T细胞应答联合免疫
- 丙型肝炎病毒细胞培养系统的研究进展被引量:2
- 2009年
- 丙型肝炎病毒HCV是非甲非乙型肝炎的主要病因,为单股正链RNA病毒,属黄病毒家族。全世界约有1.7亿人感染HCV,中国有大约4000万的HCV携带者^[1]。据预测,未来几十年中HCV感染人群还将继续增长。世界范围的高感染率,治疗手段和疫苗的缺乏使HCV成为研究的热点。一直以来,由于缺乏有效的HCV体外细胞培养体系,严重影响了HCV复制机制及新HCV防控策略的研究。2005年JFH1培养体系的建立突破了HCV不能体外培养的技术难题^[2]。在此基础上,HCV细胞培养技术取得突飞猛进的发展并广泛的应用于HCV相关研究中。
- 卢莎沈晓玲谭文杰
- 关键词:丙型肝炎病毒单股正链RNA病毒非甲非乙型肝炎细胞培养技术HCV
- HCVE2-gAD融合DNA疫苗的构建及其细胞免疫效果评价
- 2010年
- 目的 将丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)包膜糖蛋白E_2与脂联素球部结构域(gAD)进行基因融合后构建DNA疫苗,并通过免疫小鼠评价其所诱发的HCV E_2特异性细胞免疫应答.方法 根据E_2与gAD的基因序列设计引物,分别扩增出不含跨膜区的E_2基因和添加连接肽的gAD基因,再利用重叠PCR将二者融合,以pVRC为载体构建DNA疫苗质粒,经体外转染293T细胞并用Western Blot证实其表达后,采用皮内注射加卡钳电极电转的方式于0、3、6周免疫BALB/c小鼠,取脾细胞进行ELISPOT检测分析其所诱发的E_2特异性T细胞免疫应答水平.结果 成功构建了能有效表达E_2-gAD融合蛋白的新型DNA疫苗,经皮内电转方式免疫小鼠后可获得比单独E_2疫苗更强的HCV特异性T细胞免疫应答.结论 gAD基因的融入可在一定程度上增强疫苗的免疫原性,为新型HCV DNA疫苗的进一步发展和优化莫定基础.
- 文波邓瑶谭文杰殷霄高基民阮力
- 关键词:肝炎病毒脂联素病毒包膜蛋白质类