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大鼠GLUT3基因启动子区荧光素酶报告基因载体的构建与鉴定被引量：1: 2012年; 目的:克隆大鼠葡萄糖转运体3(glucose transporter 3,GLUT3)基因启动子区,并构建其萤火虫荧光素酶报告基因载体。方法:在对大鼠GLUT3基因5′侧翼区进行详尽生物信息学特征分析后,设计相应引物,用PCR的方法从大鼠基因组中扩增出GLUT3基因5′侧翼区-1037～155bp段长为1 292bp的启动子区(以翻译起始点ATG为+1),再用定向克隆的方法将这一启动子区片段定向重组入专门用于启动子活性研究的萤火虫荧光素酶报告基因载体(pGL3-basic)中,构建出包含大鼠GLUT3基因启动子区的萤火虫荧光素酶报告基因载体(pGL3-GLUT3),电泳与测序鉴定,最后再将pGL 3-GLUT3与内参pRL-TK用脂质体转染的方法瞬时共转染PC12和原代培养的神经元中,通过双荧光素酶报告基因检测系统鉴定pGL 3-GLUT3的启动子活性,并用独立样本t检验方法进行统计分析。对照组共转染pGL3-basic与内参pRL-TK。结果:构建出荧光素酶报告基因载体pGL3-GLUT3。与转染空质粒pGL3-basic组相比,原代神经细胞中转染pGL3-GLUT3组荧光素酶活性升高(5.182 9±0.264 8 vs 2.893 1±0.775 4,P=0.008),在PC12细胞中转染pGL3-GLUT3组荧光素酶活性也升高(2.797 7±0.512 0 vs 1.179 8±0.312 5,P=0.010)。结论:成功克隆GLUT3基因启动子区,并构建出包含GLUT3基因启动子片段的荧光素酶报告基因载体,并且在PC12和原代培养的神经元中pGL 3-GLUT3可以表现出启动子活性。这为后续大鼠GLUT3基因转录调控研究提供研究素材。; 郑传宜杨堃李军亮白恩琪李方成; 关键词：启动子

大鼠GLUT3基因第一外显子5′侧翼区碱基序列的生物信息学分析: 2012年; 目的:对大鼠GLUT3基因第一外显子5′侧翼转录调控区的碱基序列进行生物信息学分析,为后续的GLUT3基因的转录调控研究奠定基础。方法:通过搜索网络数据库,得到GLUT3基因现有的转录本序列以及翻译起始点上游6kb的序列。运用CpG island searcher,methprimer等软件对上述序列进行分析,预测出该段序列潜在的CpG岛,运用FirstEF、NNPP等软件分析可能的启动子区域以及运用Matlspector、TFSEARCH和TFBIND等软件分析潜在的转录因子结合位点。结果:GLUT3基因的启动子可能位于翻译起始点上游-795～-226bp(以翻译起始点ATG为+1),第一外显子位于-285～+15bp,在这段序列上存在包括SP1、CREBP、P300、AML1、NF1等约110多种转录因子的潜在结合位点。结论:对大鼠GLUT3基因第一外显子5′侧翼转录调控区序列进行了初步的生物信息学分析,为后续试验提供了研究基础。; 郑传宜杨堃李军亮白恩琪李方成; 关键词：转录调控生物信息学

显微手术治疗第四脑室肿瘤的临床效果评价被引量：5: 2015年; 目的：探讨显微手术治疗第四脑室肿瘤的临床效果。方法分析2011年1月—2013年12月海南医学院附属医院收治的行显微手术的第四脑室肿瘤35例的临床资料,总结治疗经验。结果35例均行显微手术,8例采用小脑下蚓部入路,23例采用小脑延髓裂入路,4例采用联合入路；病变全切除32例,次全切除3例；术后病理检查显示髓母细胞瘤15例,室管膜瘤10例,血管母细胞瘤及星形胶质细胞瘤各3例,脉络层乳头瘤2例,胶质母细胞瘤和脑膜瘤各1例。术后头晕、步态不稳及脑积水等均有明显改善。术后6个月,卡氏功能状态标准评分60分2例,70分9例,80分17例,90分6例,100分1例。32例术后随访6~36个月,27例生活正常,5例复发（其中2例死亡）；3例失访。结论恰当选择手术入路、良好手术技巧及正确处理并发症是增强显微手术治疗第四脑室肿瘤效果的重要因素。; 唐建建张紫寅周建马春阳王子珍黄秋虎; 关键词：脑肿瘤第四脑室显微外科手术

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海南省卫生厅科研基金(2009-56)

文献类型

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