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国家高技术研究发展计划(2007AA022463)
作品数:
1
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林峰
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检测人博卡病毒抗体间接酶联免疫吸附法的建立及临床应用
被引量:1
2010年
目的建立间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测人博卡病毒(HBoV)抗体,探讨其临床应用的可行性。方法以重组表达的HBoV融合蛋白VP2作为包被抗原,建立检测HBoV抗体的间接ELISA,优化该检测方法的最佳条件,观察其精密度、敏感度和特异性,并与荧光定量PCR方法对比检测40份临床样本,同时采用免疫印迹法(Westernblot)确认其符合率。结果所建立的间接ELISA最佳抗原包被浓度为2mg/L,酶标二抗工作浓度为1:5000,血清标本最佳稀释度为1:200。该方法平均批内变异系数为6.87%,平均批间变异系数为4.67%。40份临床样本间接ELISA检测结果与荧光定量PCR及免疫印迹结果一致,符合率100%。结论利用VP2融合蛋白作为抗原,建立的检测血清HBoV抗体间接ELISA方法特异性强、重复性好,可用于HBoV抗体的定量和定性检测。
林峰
滕灵方
郑敏巧
郑昌华
吴锋
黄恩佩
侯建毅
关键词:
抗体
酶联免疫吸附测定
临床实验室技术
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