国家自然科学基金(30271393)
- 作品数:8 被引量:21H指数:3
- 相关作者:卢亦成楼美清汪洋冯东福李文生更多>>
- 相关机构:第二军医大学复旦大学上海医学院上海交通大学医学院附属第三人民医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 两种不同入路切除海绵窦区肿瘤的比较
- 2004年
- 楼美清卢亦成丁学华白如林胡国汉陈志刚骆纯侯立军陈先震吴小军
- 关键词:海绵窦区肿瘤入路切除手术技术肿瘤手术
- 组织-细胞共培养诱导神经干细胞定向分化的研究被引量:8
- 2008年
- 目的探讨大鼠上丘组织-神经干细胞(NSCs)共培养对细胞分化的影响。方法采用元血清选择培养的方法获得上丘源NSCs,单细胞克隆传代培养并进行形态学观察。使用组织-细胞共培养系统将不同年龄大鼠上丘组织与NSCs共培养,观察NSCs分化过程。对分化细胞进行鉴定,并与NSCs的自然分化过程进行比较。结果从胚鼠上丘中获得的细胞呈球形悬浮生长,可形成单细胞克隆,具有多向分化能力,经免疫荧光鉴定证实为NSCs。新生大鼠上丘组织与NSCs共培养可以促进NSCs的分化,并诱导分化出Thy1.1阳性的视网膜神经节细胞,阳性细胞比率为19.97%(273/1094)。而神NSCs的自然分化或与成年大鼠上丘组织共培养后均未发现Thy1.1阳性细胞。结论从胚胎大鼠上丘可以分离培养出NSCs,与新生大鼠的上丘组织共培养可以诱导NSCs分化为视网膜神经节细胞。
- 冯东福卢亦成楼美清刘勇陈二涛汪洋
- 关键词:干细胞视网膜神经节细胞分化
- 两种不同入路手术治疗海绵窦区肿瘤被引量:1
- 2005年
- 目的探讨海绵窦区肿瘤切除的手术入路,以提高手术全切率,降低残障率。方法对14例海绵窦内肿瘤行硬膜下入路切除5例,行硬膜外入路切除9例,比较两种入路的方法及疗效。结果行硬膜下入路者中全切除2例,大部切除3例;术后出现新的神经功能障碍4例。行硬膜外入路者中全切除5例,次全切除3例,大部切除1例;术后出现新的脑神经功能障碍3例,其中1例完全恢复。结论针对不同类型的肿瘤及生长特性,选择适当的手术入路和显微神经外科技术,可有效提高全切率,降低残障率。
- 楼美清卢亦成胡国汉骆纯白如林丁学华陈菊祥陈先震吴小军
- 关键词:海绵窦肿瘤神经外科手术神经解剖学
- 不同载体及年龄对大鼠视神经组织体外培养的影响
- 2008年
- 目的探讨不同载体及年龄对大鼠视神经组织体外培养的影响。方法取出生4d和3月龄SD大鼠的视神经.分别使用鼠尾胶原玻片、多聚赖氨酸玻片和Biocoat小室进行组织培养,观察组织生长情况。培养48h后观察组织块贴壁率,培养5d时使用图像分析仪测量细胞最大迁移距离。使用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒对Biocoat小室组不同年龄大鼠视神经组织培养液LDH活性进行动态比较。HE染色形态学观察,透射电镜观察组织块超微结构变化。结果Biocoat小室组的组织贴壁率明显高于鼠尾胶原组、多聚赖氨酸组:在Biocoat小室中培养的成年和新生大鼠视神经组织的细胞最大迁移距离均明显大于鼠尾胶原组和多聚赖氨酸组:在相同培养载体上.新生大鼠细胞迁移距离均明显高于成年大鼠,差异均有统计学意义(P〈0.05)。视神经组织培养液LDH活性在接种3d后开始下降,成年大鼠LDH水平在培养9d后再次上升,而新生大鼠在培养12d时仍保持较低水平。视神经在培养早期即有细胞从组织块边缘游出,逐渐发出突起。新生大鼠较早出现细胞迁移。随着培养时间延长,组织出现结构紊乱和坏死。新生大鼠组织存活时间较成年大鼠明显延长。结论通过选择适宜的培养条件,视神经可以在体外较长时间存活。
- 冯东福卢亦成汪洋楼美清陈二涛
- 关键词:视神经
- 神经干细胞增殖能力的组织差异性研究被引量:13
- 2006年
- 目的从胚胎大鼠海马和上丘脑区中分离、培养神经干细胞,并进行体外增殖能力的比较。方法采用机械分离,无血清传代培养法从胚鼠海马和上丘脑获得神经干细胞。动态观察细胞生长情况,测定其体外生长曲线。使用免疫荧光法对两种来源的细胞克隆进行鉴定,激光共聚焦显微镜三维形态观察。使用扫描电镜观察神经干细胞克隆球的表面形态特征。将神经干细胞与Brdu共孵育,观察体外增殖情况。结果海马源胚胎神经干细胞的体外生长情况与上丘源干细胞基本相同,但前者的增殖速度相对较慢。两种来源的干细胞克隆球具有相似的超微结构。在相差显微镜和激光共聚焦显微镜下,两种来源的神经干细胞形态相似。与Brdu共孵育后,上丘源神经干细胞的阳性率高于海马源干细胞。从细胞生长曲线上可见两种来源的干细胞呈现了相同的增殖趋势,但生长曲线并不相同。从培养第8d起,上丘源胚胎神经细胞的活细胞记数就高于海马源干细胞。结论使用机械分离、无血清培养的方法可以获得胚胎海马源与上丘源神经干细胞,两者具有相似的形态结构,但上丘来源的神经干细胞增殖速度高于海马来源的神经干细胞。
- 冯东福卢亦成刘勇楼美清汪洋李文生
- 关键词:干细胞细胞培养细胞增殖
- 视神经离断对神经干细胞定向诱导分化的影响
- <正>传统观点认为,成年动物视神经损伤后再生仅见于某些低等动物。但近年来的研究发现,在成年哺乳动物视神经损伤后残存的视网膜神经节细胞(Retinal ganglion cells,RGCs)存在轴突出芽的现象。这说明成体...
- 冯东福卢亦成楼美清陈二涛汪洋李文生
- 文献传递
- 视神经离断对神经干细胞定向诱导分化的影响被引量:9
- 2007年
- 目的探讨大鼠视神经离断对神经干细胞-上丘组织共培养诱导分化的影响。方法采用机械分离,无血清选择培养的方法从孕14d的胚鼠上丘中获取神经干细胞并进行传代培养。使用免疫荧光技术对神经干细胞进行鉴定。采用显微手术的方法建立大鼠视神经离断模型,分别取正常大鼠、假手术和视神经离断大鼠的上丘组织进行体外培养。使用组织.细胞共培养系统将大鼠上丘组织与神经干细胞共培养,观察干细胞分化过程,对分化细胞进行鉴定,并与干细胞的自然分化过程进行比较。结果从胚鼠上丘中获得的细胞在无血清培养条件下聚集呈球形悬浮生长,可形成单细胞克隆,具有多向分化能力,经免疫荧光鉴定证实为神经干细胞。视神经离断大鼠的上丘组织与胚胎上丘源神经干细胞共培养可以促进神经干细胞的分化,并诱导分化出Thyl.1阳性的视网膜神经节细胞。结论从胚胎大鼠上丘可以分离培养出神经干细胞,与视神经离断大鼠的上丘组织共培养可以诱导上丘源神经干细胞分化为视网膜神经节细胞。
- 冯东福卢亦成楼美清陈二涛汪洋李文生
- 关键词:干细胞视网膜神经节细胞细胞分化视神经损伤
- 新生大鼠上丘脑组织培养研究被引量:2
- 2006年
- 目的 探讨新生大鼠上丘脑组织培养方法,并对其在培养过程中的变化进行观察。方法取出生4d的sD乳鼠上丘脑组织,分别在鼠尾胶原玻片、多聚赖氨酸玻片和Biocoat培养小室上进行组织培养,使用相差显微镜动态观察组织块生长情况。48h后观察组织块贴壁率,在培养5d时使用图像分析仪观察细胞迁移情况,测量最大迁移距离。使用乳酸脱氢酶试剂盒,测量组织培养液中乳酸脱氢酶活性的动态变化。常规HE染色形态学观察,并使用透射电镜观察组织块超微结构。结幂与传统的培养载体相比,上丘脑组织在Biocoat培养小室上进行培养可以获得较高的组织贴壁率和细胞迁移距离。上丘脑组织在接种后3~15d,其培养液中乳酸脱氢酶活性保持在较低水平。培养早期上丘脑组织块边缘出现细胞突起,胶质细胞迁移,随着培养时间延长,细胞出现凋亡,组织结构破坏。结论Biocoat培养小室是进行新生大鼠上丘脑组织培养的理想载体,接种3d后组织生长趋于旺盛,而在2周后多数组织的生长逐渐衰退。
- 冯东福卢亦成刘勇楼美清汪洋李文生
- 大鼠视网膜共培养诱导神经干细胞分化为视网膜神经节细胞被引量:1
- 2005年
- 目的:研究新生大鼠视网膜组织与胚胎上丘源神经干细胞共培养对干细胞分化的影响。方法:采用机械分离、无血清培养基选择培养的方法从孕14d的胚鼠上丘中获取神经干细胞并传代培养。使用组织细胞共培养系统将出生4d的乳鼠视网膜组织与上丘源神经干细胞共培养,观察干细胞分化过程,对分化细胞进行鉴定,并与干细胞的自然分化过程进行比较。结果:从胚鼠上丘中获得的细胞在无血清培养条件下聚集呈球形悬浮生长,可以持续传代培养,具有多向分化能力,经免疫荧光鉴定证实为神经干细胞。新生大鼠视网膜组织与胚胎上丘源神经干细胞共培养促进干细胞的分化,并诱导分化出Thy1.1阳性细胞。结论:从胚胎大鼠上丘可以分离培养神经干细胞,与新生鼠视网膜组织共培养可以诱导上丘源神经干细胞分化出视网膜神经节细胞。
- 冯东福卢亦成楼美清汪洋李文生
- 关键词:神经干细胞细胞分化视网膜神经节细胞视网膜