山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2007BSB14087)
- 作品数：8 被引量：27H指数：4
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- 一种半夏胰蛋白酶抑制剂抗肿瘤活性研究
- 目的:检测一种纯化的半夏胰蛋白酶抑制剂(Rhizoma pinelliae trypsin inhibitor, RPTI)的抗肿瘤活性。方法:应用以胰蛋白酶为配体的亲和层析法。从半夏蛋白粗提液的 40%(NH)SO(M...
- 王厚伟田景振
- 关键词：半夏胰蛋白酶抑制剂
- 文献传递
- 一种具有胰蛋白酶抑制活性的半夏蛋白的纯化与N端氨基酸序列分析被引量：1
- 2008年
- 目的分离纯化具有胰蛋白酶抑制活性的半夏蛋白,分析其对胰蛋白酶的抑制活性、抑制机制与N端氨基酸序列。方法采用以胰蛋白酶为配体的亲和色谱和Sephadex G-50凝胶过滤法,从半夏蛋白粗提液的40%(NH_4)_2SO_4沉淀中分离纯化活性半夏蛋白;采用12%SDS-PAGE鉴定其纯度,并估算其相对分子质量;采用Ed-man降解法分析其N-端氨基酸序列。结果纯化的活性半夏蛋白经SDS-PAGE检测呈现单一条带,相对分子质量为1.4×10～4;比活力为1059.012U/mg,活力回收率为24.40%;对胰蛋白酶的质量抑制比为1:4.72,抑制常数(Ki)为7.17×10～(-6)mol/L;其N端前6个氨基酸残基顺序为DPVVDG。结论该活性半夏蛋白是一种丝氨酸蛋白酶抑制刺,为胰蛋白酶的竞争性抑制剂。
- 王厚伟
- 关键词：胰蛋白酶抑制剂分离纯化
- —种基于寒性对照抗原的中药药性物质基础研究的新方法
- 目的:从免疫原性上探讨中药药性的物质基础。方法:以黄连、大黄与知母3 味典型寒性中药水提物的混合品作为寒性对照抗原,免疫家兔后,制备相应多克隆抗体, 应用该寒性对照抗原抗体与9味中药水提物作斑点免疫印迹,杂交信号应用 Q...
- 王厚伟田景振
- 关键词：中药寒性多克隆抗体
- 文献传递
- 低温炮制工艺对紫河车水溶性蛋白组成及其纤溶活性的影响
- 目的:研究低温炮制工艺对紫河车水溶性蛋白组成及其纤溶活性的影响;方法: 紫河车的低温炮制采用液氮快速冷冻和冷冻干燥技术:传统炮制参照2005药典;不同炮制工艺紫河车水溶性蛋白组成的差异检测采用 SDS-PAGE,定量分析...
- 王厚伟
- 关键词：紫河车SDS-PAGE纤溶活性
- 文献传递
- 斑点免疫印迹法快速测定地龙炮制品中蚓激酶及其水解产物被引量：5
- 2008年
- 目的测定参环毛蚓、秉氏环毛蚓、日本杜拉蚓和天锡杜拉蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物,建立斑点免疫印迹法评价相应生药材药效成分明确的中药炮制品质量新方法。方法以兔抗蚓激酶单抗为一抗,应用斑点免疫印迹法对地龙炮制品中蚓激酶及其水解产物作定性检测,杂交信号应用Quantity One软件作定量分析。结果现行中药材参环毛蚓与山东产地方品种:秉氏环毛蚓、日本杜拉蚓、天锡杜拉蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物的质量分数分别为125.23、118.34、81.05、72.13μg/g。结论秉氏环毛蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物与现行地龙炮制品参环毛蚓无显著差异,理论上可作为广地龙的替代品。斑点免疫印迹法简便快捷,结果准确,无需大型设备,可用于地龙与类似中药材炮制品的品质评价。
- 王厚伟
- 关键词：地龙斑点印迹蚓激酶
- 基于寒/热性对照抗原的斑点免疫印迹法中药药性研究被引量：5
- 2009年
- 目的:从免疫原性上探讨中药药性的物质基础。方法:以高良姜、肉桂与仙茅3味典型热性中药水提物的混合品作为热性对照抗原,以黄连、大黄与知母3味典型寒性中药水提物的混合品作为寒性对照抗原,免疫家兔后,制备相应多克隆抗体,分别应用寒、热性对照抗原抗体与9味中药水提物作斑点免疫印迹,杂交信号应用QuantityOne定量扫描分析。结果:9味中药与热性对照抗原多克隆抗体的印迹信号大小顺序为:干姜、附子、杜仲、秦皮、金银花、知母、黄连、大黄、黄柏;与热性对照抗原多克隆抗体的印迹信号相似度分别为:57.33%,43.56%,34.16%,30.2%,28.81%,26.53%,21.68%,17.62%,14.85%;9味中药与寒性对照抗原多克隆抗体的印迹信号大小顺序为:大黄、知母、黄连、黄柏、干姜、金银花、秦皮、杜仲、附子;与寒性对照抗原多克隆抗体的印迹信号相似度分别为:55.22%,54.23%,46.72%,34.08%,30.3%,24.48%,24.33%,20.35%,15.17%。以印迹信号相似度为聚类变量,经Wistar’sMethod聚类分析,9味中药被聚为2大类,一大类为:黄柏、知母、黄连、大黄,该大类与寒性对照抗原距离小,与寒性对照抗原的距离依次增大;另一大类为:干姜、附子、杜仲、秦皮、金银花,该大类与热性对照抗原距离小,与热性对照抗原的距离依次增大。结论:总体上,测试中药与对照抗原抗体的印迹信号相似度越小,其药性与对照抗原的距离越大;斑点免疫印迹法是中药药性物质基础研究的一种实用、有效的新方法。
- 王厚伟窦彦玲田景振李峰王世军王振国
- 关键词：多克隆抗体
- 一种半夏胰蛋白酶抑制剂对大鼠胃功能的影响
- 目的:研究纯化的半夏胰蛋白酶抑制剂(Rhizoma pinelliae trypsin inhibitor, RPTI)对大鼠胃溃疡与胃液分泌量的影响。方法:应用以胰蛋白酶为配体的亲和层析法, 从半夏蛋白粗提液的40%的...
- 王厚伟
- 关键词：半夏胰蛋白酶抑制剂胃溃疡胃液分泌
- 文献传递
- 基于全电性离子色谱的6味中药药性的蛋白质分子标记研究被引量：14
- 2008年
- 目的:提出分子标记法检测中药药性物质基础研究的新思路,探讨全电性离子色谱技术用于筛选中药药性蛋白质分子标记的可行性。方法:联合应用阴、阳离子交换色谱技术,将特定pH条件下中药的全部水溶性蛋白的色谱峰呈现出来,形成全电性离子色谱图,平行比较不同药性中药的全电性离子色谱图,筛选出相同药性中药间共有的药性标识峰,对药性标识峰组分作SDS-PAGE,比较分析药性相关的共有蛋白条带,作为中药药性的蛋白质分子标记。结果:干姜、肉桂、仙茅3味热性中药在阴离子交换色谱的收集部分编号为30附近,存在多个共有特征峰;黄连、知母、金银花3味寒性中药在阴离子交换色谱的收集编号为35附近会存在多个共有特征峰;3味热性中药的共有特征峰组分在分子质量为50ku(1u=1.66054×10-27)附近存在一条共有条带,在分子质量约为31ku处,存在2条共有条带;3味寒性中药共有特征峰组分在分子质量为31ku附近,存在2条共有条带。结论:收集编号为35和30附近的共有色谱峰在3次重复中稳定呈现,可以作为6味测试中药的寒、热药性标识峰。标识峰的共有条带分别是3味寒性中药与3味热性中药所特有的,在3次重复中稳定呈现,可以作为6味测试中药药性的蛋白质分子标记。全电性离子色谱法是一种可行的中药药性分子标记研究的新方法。
- 王厚伟窦彦玲田景振李峰王振国
- 关键词：中药药性分子标记
- —种基于热性对照抗原的中药药性物质基础研究的新方法
- 目的:从免疫原性上探讨中药药性的物质基础。方法:以高良姜、肉桂与仙茅 3味典型热性中药水提物的混合品作为热性对照抗原,免疫家兔后,制备相应多克隆抗体, 应用该热性对照抗原的多克隆抗体与9味中药水提物作斑点免疫印迹,杂交信...
- 王厚伟王振国
- 关键词：多克隆抗体
- 文献传递
- 一种快速测定家蚕蛾溶茧酶及其水解产物的含量的新方法
- 目的:测定4品种家蚕蛾下颚溶茧酶及其水解产物含量,建立斑点免疫印迹法测定中药材药效成分含量的新方法。方法:以兔抗溶茧酶多抗为一抗。应用斑点免疫印迹法对4品种家蚕蛾下颚溶茧酶含量作定性检测,杂交信号应用 Quantity ...
- 王厚伟马承严
- 关键词：家蚕蛾斑点印迹
- 文献传递
