山东省自然科学基金(ZR2010HM054)
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 相关作者：肖文林庄翠竹许尧祥王双义张岱尊更多>>
- 相关机构：青岛大学潍坊市寒亭区人民医院青岛大学医学院附属医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金青岛市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同浓度氟化物对氟牙症釉质的影响被引量：7
- 2015年
- 目的:探讨不同浓度氟化物对氟牙症釉质硬度值及表面微观结构的影响。方法:收集临床拔除的中度氟斑恒牙56个,将每个牙冠部平均切割为3等份(n=56),分别列入A、B、C组。A组样本置于蒸馏水中,B组置于60 mg/L氟化钠液中,C组置于120 mg/L氟化钠液中。3组浸泡液均每天更换1次,并于37℃恒温箱放置10 d。用显微硬度计分别测定浸泡前后釉质表面硬度值,扫描电镜观察釉质表面微观及形态变化。结果:3组浸泡前釉质显微硬度均无显著差异(P>0.05);浸泡后,釉质显微硬度B组>A组>C组(P<0.05)。浸泡后釉质显微硬度与浸泡前相比:A组无明显变化(P>0.05),B组明显提高(P<0.05),C组明显降低(P<0.05)。除B组外,A、C组釉质表面未见反应物沉积。结论:高浓度氟化物可使氟斑牙硬度值降低,无釉质再矿化作用,氟牙症患者更适合用含有低浓度氟化物的牙膏。
- 于永娜张岱尊肖文林康鹏
- 关键词：氟斑牙牙釉质氟化物
- 血小板衍生生长因子受体α基因在C57BL/6J小鼠胚胎腭突融合过程中表达变化的研究被引量：1
- 2015年
- 目的观察小鼠胚胎腭突融合过程中血小板衍生生长因子受体α基因(platelet derived growth factor receptor alpha,PDGFR-α)的表达特点。方法 C57BL/6J近交系受孕小鼠分别于妊娠13.5 d(Gestation Day,GD13.5)、GD14.5、GD15.0、及GD15.5时断颈处死。取小鼠胚头及腭突,免疫组织化学检测不同胚胎发育时期的腭突组织中PDGFR-α蛋白的表达定位;Western blot法检测PDGFR-α蛋白的表达变化。结果免疫组化检测结果显示PDGFR-α在小鼠腭突中特异性表达:在GD13.5时主要表达在腭突上皮,而在GD14.5、GD15.0、GD15.5时在间充质和上皮都有表达,且在GD14.5时PDGFR-α的表达水平达到高峰。Western blot检测PDGFR-α在腭突不同发育时期的蛋白表达变化和免疫组化检测结果趋势一致。在GD14.5时,PDGFR-α的表达水平达到高峰,和GD13.5、GD15.0及GD15.5蛋白表达水平相比差异有统计学意义。结论研究证实PDGFR-α在小鼠胚胎腭突发育过程中存在时空表达变化的特征。PDGFR-α可能与胚胎腭突的发生有关。
- 仵素珍康鹏肖文林王双义许尧祥
- 关键词：C57BL/6J小鼠胚胎腭突
- 小干扰RNA抑制胚胎腭突间充质细胞7-脱氢胆固醇还原酶基因的表达被引量：2
- 2012年
- 目的观察小鼠胚胎腭突间充质（EPM）细胞中7-脱氢胆固醇还原酶基因（Dhcr7）的表达，筛选出针对EPM细胞Dhcr7的最有效小干扰RNA（siRNA）序列。观察RNA干扰（RNAi）沉默Dhcr7的表达后，对EPM细胞增殖的影响。方法化学合成3条针对Dhcr7mRNA的siRNA，阳性脂质体介导转染EPM细胞。荧光显微镜观察转染效率，Westernblot法检测Dhcr7蛋白表达变化，噻唑蓝（MTT）检测沉默后增殖率的变化。结果siRNA转染效率为72．6％。3条siRNA对EPM细胞Dhcr7基因表达都有抑制作用，siRNA-3抑制作用最明显，达60．2％，与阴性对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。Dhcr7沉默后EPM细胞增殖抑制率为56．4％，与阴性对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论筛选出针对EPM细胞Dhcr7最有效的siRNA序列。siRNA可抑制EPM细胞Dhcr7基因表达，Dhcr7表达降低可抑制EPM细胞增殖。
- 庄翠竹马秀兴肖文林张春阳王双义
- 关键词：RNA干扰
- 7-脱氢胆固醇还原酶基因沉默对体外培养小鼠腭突融合的影响
- 2015年
- 目的通过RNA干扰抑制7-脱氢胆固醇还原酶(Dhcr7)基因在培养腭突中的表达,研究Dhcr7基因对腭突融合的影响。方法根据C57BL/6J小鼠Dhcr7基因特异性的siRNA序列构建pAdTrack-CMV-siDhcr7,阳性克隆的pAdTrack-CMV-siDhcr7质粒进行体外重组,筛选出抗卡那霉素的重组腺病毒p Ad Easy-1-siDhcr7质粒,酶切后制备腺病毒载体DNA转染胚胎腭突。取妊娠13.5 d的小鼠胚胎腭突共30对随机分为3组,每组10对。正常对照组、空白腺病毒对照组和实验组均用不含胆固醇培养基培养腭突,其中空白腺病毒对照组加入空白腺病毒,实验组加入Dhcr7siRNA腺病毒。培养48 h后固定腭突并提取Dhcr7 mRNA和蛋白,采用扫描电子显微镜(SEM)观察腭突融合情况,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分析Dhcr7 mRNA和蛋白的含量。结果 SEM检测显示,正常对照组和空白腺病毒对照组在培养48 h时两侧腭突融合,形成连续的上腭;而实验组几乎没有生长,两侧腭突之间有很宽的裂隙。RT-PCR和Western blot检测显示,实验组Dhcr7 mRNA和蛋白表达与正常对照组和空白腺病毒对照组相比均明显减少,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Dhcr7基因在腭突中的表达下调后,腭突融合失败,说明Dhcr7基因在腭突正常发育融合中起一定的作用。
- 肖文林庄翠竹时艳许尧祥薛令法
- 关键词：小鼠腭突器官培养基因沉默
- 7-脱氢胆固醇还原酶在腭突发育中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的:观察7-脱氢胆固醇还原酶(Dhcr7)基因在小鼠胚胎腭突发育中表达量的变化。方法:在体视显微镜下取E13.5、E14.5和E15.5的小鼠胚胎的腭突,免疫组织化学(IHC)观察Dhcr7蛋白在腭突中的表达定位,逆转录式聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测Dhcr7 mRNA的表达变化,Western blot法检测蛋白的表达变化。结果:Dhcr7主要表达在胚胎腭突间充质细胞(EPM);E13.5、E14.5和E15.5 mRNA相对表达量(Dhcr7/β-actin)分别是0.692±0.084、0.595±0.051和0.369±0.061;E13.5与E14.5比较,P>0.05;E13.5、E14.5分别与E15.5比较,P<0.01;蛋白相对表达量(Dhcr7/GAPDH)分别是0.857±0.008、0.840±0.005和0.300±0.007,E13.5与E14.5相比,P>0.05;E15.5分别与E13.5和E14.5相比P<0.01。结论:Dhcr7在腭突发育中的关键阶段有表达,并且表达量与其生长发育有密切关系。
- 庄翠竹肖文林孙桂兰许尧祥岳金薛令法王双义
- 关键词：腭突小鼠胚胎
- 7-脱氢胆固醇还原酶基因沉默对体外培养腭突音猬基因-骨形成蛋白2信号通路的影响
- 2014年
- 目的 研究沉默7-脱氢胆固醇还原酶（7-dehydrocholesterol reductase,Dhcr-7）表达对体外培养腭突器官中音猬基因（sonic hedgehog,Shh）-骨形成蛋白2（bone morphogenetic protein 2,BMP-2）信号通路的影响,探讨Dhcr-7参与腭突发育的信号通路.方法 取60只孕期（gestation day,GD） 13.5d小鼠胚胎根据简单随机抽样法平均分为3组：空白对照组（A组）：不含胆固醇培养基培养腭突;Dhcr-7基因沉默组（B组）：不含胆固醇培养基培养腭突＋Dhcr-7-siRNA腺病毒;添加胆固醇组（C组）;每组各20只.培养48 h后,A、B组更换不含胆固醇培养基,C组更换含有600 mg/L胆固醇培养基.继续培养72 h后,分别将腭突固定,组织染色和扫描电镜观察其形态变化;分别提取腭突RNA和蛋白质,应用反转录-聚合酶链反应（reverse transcriotion-polymerase chain reaction,RT-PCR）和蛋白质印迹法检测Dhcr-7、Shh和BMP-2表达量的变化.结果 组织染色和扫描电镜显示A组及C组腭突能完全融合,B组腭突未融合.Shh和BMP-2在B组的mRNA和蛋白质的表达量随Dhcr-7表达量降低而降低.B组mRNA和蛋白质的表达量Shh为0.063±0.018和0.092±0.065;BMP-2为0.054±0.018和0.049±0.021;A组mRNA和蛋白质的表达量Shh为0.667±0.093和0.639±0.078;BMP-2为0.591±0.043和0.569±0.081.A、B两组Shh和BMP-2的mRNA和蛋白质的表达量差异分别具有统计学意义（P＜0.05）;C组Dhcr-7的mRNA表达量（0.074±0.034）和蛋白质表达量（0.075±0.028）基本无变化,与B组（Dhcr-7的mRNA表达量为0.083±0.045;蛋白质表达量为0.067±0.065）相比,差异无统计学意义（P＞0.05）;RNA和蛋白质的表达量Shh（0.649±0.085和0.608±0.092）和BMP-2（0.578±0.062和0.548±0.065）均明显升高,与B组相比差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 Dhcr-7可影响Shh和BMP-2的表达,Dhcr-7通过Shh-BMP-2信号通路调控腭突发育.
- 张岱尊许尧祥肖文林庄翠竹
- 关键词：腭裂基因沉默
- C57BL/6J小鼠胚胎腭突体外培养模型的建立被引量：4
- 2013年
- 目的:建立近交系C57BL/6J小鼠胚胎腭突体外培养模型,为研究胚胎腭突发育提供条件。方法:无菌条件下,在体视显微镜下取怀孕13.5 d(GD13.5)的胚胎腭突,进行培养。分别于培养6、24、48 h后取出固定,行组织切片苏木精-伊红(HE)染色和扫描电镜(SEM)观察,每个时间点分别12对。结果:细胞核染色显示,6 h时,两侧腭突未融合;24 h时,两侧腭突开始融合,但是中间仍有部分腭中嵴上皮(MEE)细胞残留;48 h时,两侧腭突完全融合,中间的MEE完全消失。扫描电镜显示,6 h时,两侧腭突之间有一定裂隙;24 h时,两侧腭突已接触但能观察到腭中缝(MES);48 h时,两侧腭突已完全融合,MES消失。结论:本方法为研究腭裂发病机制提供了一个良好的体外模型。
- 张岱尊庄翠竹肖文林许尧祥王双义
- 关键词：C57BL扫描电镜
