教育部科学技术研究重点项目(212073)
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 相关作者：伍义行俞晓平戴灵豪沈钰明胡华军更多>>
- 相关机构：中国计量学院中国计量大学更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 基于鸭胚原代肝细胞的抗乙肝病毒药物评价模型的建立被引量：3
- 2013年
- [目的]建立基于鸭胚原代肝细胞的抗乙肝药物筛选及评价模型。[方法]采用PCR技术鉴定鸭乙肝病毒(DHBV)感染鸭胚,分离感染鸭胚肝细胞原代培养,运用建立的荧光定量PCR技术检测鸭胚肝细胞DHBV-DNA复制水平,从而建立基于鸭胚原代肝细胞的抗乙肝药物评价模型。[结果]选择18～22日龄鸭胚建立了优化的鸭胚肝细胞原代培养方法和鸭胚肝细胞中DHBV-DNA水平的荧光定量PCR检测技术。[结论]该研究建立了基于鸭胚肝细胞的抗乙肝药物评价模型,经实践证实该模型具有特异、灵敏、重复性好和操作简便的优点,适用于抗乙肝化合物的筛选与评价。
- 贾袁媛沈钰明伍义行俞晓平
- 关键词：鸭乙肝病毒荧光定量PCR检测
- 松果菊苷对乙肝病毒复制和抗原表达的影响被引量：3
- 2015年
- 以HBV基因转染的HepG2.2.15细胞为体外模型,研究松果菊苷对乙肝病毒(HBV)复制和抗原表达的影响,采用ELISA法测定细胞上清乙肝表面抗原(HBsAg)和E抗原(HBeAg)水平;采用荧光定量PCR法检测HBV DNA水平。以HBV转基因小鼠为体内模型,研究松果菊苷对HBV复制的影响,首先采用荧光定量PCR法检测转基因小鼠肝组织HBV DNA水平,采用ELISA法检测小鼠血清HBs Ag和HBe Ag水平;同时检测血清转氨酶水平和肝组织病理变化;然后将HBV表达阳性的转基因小鼠随机分为5组:对照组、拉米夫定(50 mg·kg-1)组和松果菊苷高、中、低剂量(50,25,12.5 mg·kg-1)组。每天灌胃给药1次,连续给药30 d。第31天分离小鼠血清检测HBV DNA,HBsAg和HBeAg水平;提取肝组织DNA测定其HBV DNA水平,同时作肝组织病理检查。结果表明:松果菊苷在50,100 mg·L-1作用Hep G2.2.15细胞6 d后能显著抑制HBs Ag和HBeAg表达,其最高抑制率分别为42.68%,46.29%;同时在100 mg·L-1对HBV DNA具有抑制作用。此外,松果菊苷在50mg·kg-1剂量时能显著抑制HBV转基因小鼠HBsAg与HBeAg表达,其抑制率分别为42.82%,29.12%,同时对转基因小鼠血清HBV DNA水平有显著抑制作用。提示松果菊苷对HBV复制和抗原表达具有较强抑制作用。
- 戴灵豪沈钰明伍义行俞晓平胡华军糜怡珺陈洁晶
- 关键词：松果菊苷乙肝病毒HEPG2.2.15细胞转基因小鼠
- 血红素加氧酶-1及其产物在肝病中的作用及其机制被引量：7
- 2016年
- 血红素加氧酶(HO)是降解血红素成为一氧化碳(CO)、铁离子和胆绿素过程中的限速酶,其亚型HO-1的诱导、超表达或抑制降解可显著抑制乙肝和丙肝病毒复制,改善肝急/慢性炎症及纤维化。HO-1及其代谢产物通过抗炎、抗氧化和抗凋亡作用与细胞保护密切相关,能改善多种因素引起的肝损伤,并对缺血再灌注损伤、急/慢性免疫排斥反应及肝移植生存率均有改善作用。HO-1在肿瘤细胞中过表达,抑制HO-1表达能促进肝癌细胞凋亡、减缓肝癌生长及其血管生成,提示它可能是肝癌治疗的潜在靶点。本文分析了HO-1及其产物在病毒性肝炎、肝损伤、肝纤维化、肝移植和肝癌中的作用及其机制,旨在阐明HO-1的靶点特性。鉴于HO-1具有显著的抗病毒、抗炎和保肝作用,且抑制HO-1表达能抑制肝癌生长,故靶向HO-1可能成为临床治疗肝病及新药研发的一种新策略。
- 戴灵豪伍义行
- 关键词：血红素加氧酶-1病毒性肝炎肝损伤肝纤维化肝移植
- 苦参素对D-氨基半乳糖苷诱导的肝细胞凋亡的干预研究被引量：3
- 2013年
- [目的]研究氧化苦参碱对肝细胞凋亡的影响。[方法]采用D-氨基半乳糖苷(D-GalN)诱导人源HL-7702肝细胞发生凋亡,探索最佳的凋亡诱导参数,建立肝细胞凋亡模型,并运用建立的体外肝细胞凋亡模型,探讨氧化苦参碱的抗凋亡作用。[结果]D-GalN在60mmol/L浓度下与HL-7702肝细胞孵育8 h为最优建模条件,在此处理条件下经凝胶电泳可见细胞凋亡特征性的DNA ladder;且与对照组相比,HL-7702细胞处理后其ALT、AST、SOD、MDA、Caspases-3水平均显著升高(P<0.05)。[结论]D-GalN诱导的HL-7702肝细胞凋亡的发生机制可能与线粒体信号转导途径有关,而氧化苦参碱对D-GalN引起的肝细胞凋亡具有较强的干预作用,其抗凋亡机制可能与抑制Caspases-3、CytC、TNFα和TGF-β1等凋亡因子和诱导抗凋亡因子HO-1表达有关。
- 张虹莉胡少青伍义行俞晓平
- 关键词：氧化苦参碱抗凋亡作用
