云南省应用基础研究基金(2008CC007)
- 作品数：9 被引量：18H指数：3
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- 白藜芦醇对去卵巢大鼠骨质疏松症的保护作用被引量：6
- 2012年
- 目的探讨白藜芦醇(RES)对去卵巢大鼠骨质疏松动物模型的保护作用及其分子机制。方法72只清洁级SD大鼠,按随机对照分组原则分为正常对照组、骨质疏松模型组、雌激素治疗组、RES低、中、高剂量治疗组,每组12只。除正常对照组外,双侧卵巢摘除术后1周,给予雌激素、RES治疗。12周后检测相关血清生化指标,光镜下观察骨组织形态学变化,双能X线吸收法测定其骨密度,RT-PCR检测骨组织中抗氧化酶(gpx1、trx1和γ-gt)mRNA的表达情况。结果血生化指标显示,骨质疏松模型组除血清雌激素水平明显低于其他各组外,其余指标均显著升高;骨组织形态学观察和骨密度检测提示,骨质疏松模型组骨组织呈现典型骨质疏松改变,骨组织中抗氧化酶表达降低;而雌激素治疗组和不同剂量RES治疗组血生化指标、骨组织形态学、骨密度和骨组织中抗氧化酶表达与正常对照组差异不明显。结论 RES具有类似于雌激素的维持骨形成和骨吸收平衡,拮抗骨质疏松症发生的作用,该作用与骨组织中抗氧化酶的表达量及活性相关。
- 张铁军张伟边立功刘世昌闫甲宗一桂莉陆地
- 关键词：骨质疏松去势白藜芦醇雌激素
- 枫叶黄酮抑制脂多糖诱导破骨前体细胞Raw264.7细胞激活的作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨枫叶黄酮对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导破骨前体细胞Raw264.7细胞炎性因子释放的抑制作用.方法用LPS(5 mg/mL)刺激Raw264.7细胞构建炎症模型,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测Raw264.7细胞的活力影响;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测一氧化氮(NO)和前列腺素E2,PGE2表达;运用免疫荧光染色方法检测诱导型一氧化氮合酶和环氧合酶-2,COX-2、子肿瘤坏死因子-αTNF-α和白介素-1β,IL-1β、核因子-κB,NF-κB蛋白与mRNA的表达变化.结果不同浓度的枫叶黄酮明显抑制了LPS诱导的Row246.7细胞NO、PGE2,iNOS和COX-2,TNF-α和IL-1β与NF-κB的上调,并且NO、PGE2、iNOS、COX-2和NF-κB蛋白的表达呈剂量依赖性.结论枫叶黄酮可抑制LPS诱导的破骨前体细胞Raw264.7细胞iNOS、COX-2和NF-κB/P65蛋白表达和炎性因子释放从而抑制破骨细胞的激活.
- 邹智荣宗一陆地孙俊马云兵曹西南
- 关键词：脂多糖RAW264.7细胞免疫荧光染色
- 17β-雌二醇对高同型半胱氨酸诱导人成骨肉瘤MG63细胞损伤的保护作用及机制被引量：1
- 2011年
- 目的探讨17β-雌二醇(17β-E2)对高同型半胱氨酸(HHcy)诱导人成骨肉瘤MG63细胞损伤的保护作用及其分子机制。方法体外培养的人成骨肉瘤MG63细胞经17β-E2干预后,再以不同浓度和(或)不同时间的HHcy处理后,采用2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸盐(H2DCFDA)探针检测细胞内活性氧(ROS)水平变化;通过Hoechst 33342/碘化丙啶(PI)核双染法观察计数凋亡和坏死细胞;采用免疫印迹法检测促凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达变化。结果 1.17β-E2可明显抑制HHcy诱导的MG63细胞内ROS的增加,抑制效果随剂量和时间而增强;2.17β-E2可明显下调促凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达,对抗HHcy诱导的MG63细胞的凋亡和(或)坏死。结论 17β-E2可通过抑制ROS的产生,下调凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达而增强MG63细胞抗HHcy所诱导的氧化损伤作用。
- 陈学秋戴纪男刘承杏边立功郭家智孙俊桂莉陆地
- 关键词：MG63细胞17Β-雌二醇高同型半胱氨酸活性氧簇
- 三七皂苷Rg1抑制脂多糖诱导小胶质细胞激活的机制研究被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨中药有效成分三七皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1,Rg1)对抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小胶质细胞株BV-2细胞激活的机制。方法:用LPS刺激BV-2细胞构建激活模型,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测Rg1对BV-2细胞的活力影响,蛋白质免疫印迹(Western Blot)方法检测不同浓度Rg1(10、20和40μmol/L)对磷酸化的核因子-κB抑制蛋白-α(inhibitorκB-α,IκB-α)和反应结合蛋白(cAMP-responseelement binding protein,CREB)以及促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)家族的细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)、c-Jun氨基端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和p38促分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)等细胞信号通路蛋白的表达及其变化规律。结果:不同浓度的Rg1明显抑制了LPS诱导的磷酸化IκB-α和CREB蛋白表达以及MAPKs通路(ERK1/2,JNK,p38 MAPK)磷酸化蛋白表达,并且对p38 MAPK表达的影响呈剂量依赖性。结论:Rg1可能通过抑制MAPKs的磷酸化来调控LPS诱导的小胶质细胞株BV-2细胞激活,发挥其神经抗炎的作用。
- 宗一何颖詹东张铁军宋蕊刘世昌艾青龙陆地
- 关键词：三七皂苷RG1脂多糖促分裂原活化蛋白激酶
- 活性氧在骨质疏松症发生中作用及信号通路研究进展被引量：1
- 2010年
- 随着老龄人口的增多,骨质疏松症的发病率也在逐年增加。研究表明,骨质疏松症与很多因素有关,提出了很多假说,其中氧化应激学说引起众多学者的重视,活性氧与骨质疏松症的发生有着密切联系,本文就活性氧介导的骨质疏松症的作用及信号通路机制研究结果进行探讨。
- 陈学秋孙俊陆地
- 关键词：活性氧骨质疏松症信号转导通路
- 三七皂苷Rg1抑制脂多糖诱导的小胶质细胞激活被引量：3
- 2012年
- 目的探讨三七皂苷Rg1(Rg1)对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞系BV-2细胞炎性因子释放的抑制作用。方法用LPS刺激BV-2细胞构建炎症模型,采用四甲基偶氮唑盐比色法检测Rg1对BV-2细胞活力的影响,免疫荧光染色和反转录PCR方法检测不同浓度Rg1(10、20、40μmol/L)对细胞炎性蛋白酶诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)、细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)、炎性信号分子NF-κB蛋白与mRNA的表达变化。结果不同浓度的Rg1在转录水平和翻译水平上明显抑制了LPS诱导的细胞炎性蛋白酶iNOS和COX-2、细胞炎性因子TNF-α和IL-1β与炎性信号分子NF-κB的上调,并且iNOS、COX-2和NF-κB的表达呈剂量依赖性。结论 Rg1可通过调控LPS诱导的小胶质细胞系BV-2细胞炎性因子释放从而抑制小胶质细胞激活,发挥抗神经炎症的作用。
- 宗一戴纪男孙俊杨萍张伟艾青龙陆地
- 关键词：三七皂苷RG1脂多糖反转录-聚合酶链式反应免疫荧光
- 17β-雌二醇抑制高同型半胱氨酸诱导破骨细胞Raw 264.7激活的作用研究
- 2011年
- 探讨17-β雌二醇(17β-Estradiol,17β-E2)对高同型半胱氨酸(High Homocystine,HHcy)诱导的破骨前体细胞株Raw 264.7炎性因子释放的抑制作用.用同型半胱氨酸(Homocystine,Hcy)刺激Raw264.7细胞构建炎症模型,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测17β-E2对Raw 264.7细胞的活力影响,免疫荧光双标和RT-PCR方法检测不同浓度17β-E2(1,10 nmol/L和1μmol/L)对环氧合酶-2(COX-2)和细胞炎性蛋白酶诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)、炎性信号蛋白核因子-κB(NF-κB)蛋白与mRNA的表达变化.结果发现:不同浓度的17β-E2在翻译水平和转录水平上明显抑制了Hcy诱导的细胞炎性蛋白酶COX-2和iNOS,细胞炎性因子TNF-α和IL-1β与炎性信号蛋白NF-κB的上调,并且COX-2和IL-1β蛋白和mRNA的表达呈剂量依赖性.上述结果表明17β-E2可通过调控Hcy诱导的破骨前体细胞株Raw264.7细胞炎性因子释放从而抑制破骨激活,发挥抗骨质疏松的作用.
- 何颖陈学秋宗一詹东杨萍刘世昌陆地桂莉
- 关键词：17Β-雌二醇同型半胱氨酸炎性因子RAW逆转录PCR
- 白藜芦醇抑制脂多糖诱导破骨前体细胞Raw264.7的激活被引量：1
- 2015年
- 目的探讨白藜芦醇(Res)对脂多糖(LPS)诱导的破骨前体细胞Raw 264.7细胞系释放炎性细胞因子的抑制作用。方法采用LPS刺激Raw 264.7细胞构建炎症模型,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定细胞,采用MTT检测Res对Raw 264.7细胞的毒性影响,免疫荧光双标以及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测不同浓度Res(1μmol/L和5μmol/L)对细胞炎性因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)与细胞炎性蛋白酶:诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和环氧合酶-2(COX-2)、炎性信号蛋白核因子-κB(NF-κB)蛋白与mRNA的表达变化。结果不同浓度的Res(1μmol/L和5μmol/L)在翻译水平和转录水平上明显抑制了LPS诱导的细胞炎性蛋白酶i NOS和COX-2表达,同时了抑制细胞炎性因子IL-1β与炎性信号蛋白NF-κB的上调。结论 Res可能通过NF-κB调控LPS诱导的Raw 264.7细胞炎性细胞因子的释放进而抑制破骨前体细胞的激活,进而具有抗骨质疏松的作用。
- 宗一陈瑾郭家智张秀君张铁军孙林
- 关键词：白藜芦醇脂多糖RAW反转录聚合酶链反应
- 高同型半胱氨酸诱导人成骨肉瘤MG63细胞损伤的机制
- 2011年
- 目的探讨高同型半胱氨酸(HHcy)诱导人成骨肉瘤MG63细胞损伤的分子机制。方法体外培养的人成骨肉瘤MG63细胞经不同浓度(0.001mol/L、0.003mol/L和0.005mol/L)的Hcy处理不同时间后,采用2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸盐(H2 DCFDA)探针在荧光分光光度计下检测细胞内活性氧(ROS)变化水平;通过Hoechst 33342/碘化丙啶(PI)核双染法在荧光显微镜下观察计数凋亡和坏死细胞;采用Western blotting法检测促凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达变化。结果在高浓度的Hcy刺激下,以剂量和时间依赖的方式上调MG63细胞内ROS含量(P<0.05);同时,凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达明显增加,从而诱导MG63细胞的死亡。结论高浓度Hcy可通过增加MG63细胞内ROS的含量,上调凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达,导致MG63细胞的氧化损伤。
- 刘承杏陈学秋郭家智戴纪男孙俊桂莉陆地
- 关键词：MG63细胞同型半胱氨酸免疫印迹法
