国家自然科学基金(30700409)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：耿建国钱云徐平叶步青林志新更多>>
- 相关机构：中国科学院上海生命科学研究院国家啮齿类实验动物种子中心上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- DNA检测技术在基因剔除小鼠保种中的初步应用被引量：3
- 2009年
- 目的针对基因剔除小鼠在饲养过程中出现母本繁殖困难，频频出现突发死亡等情况，对运用DNA检测技术进行辅助保种的可行性探讨。方法将本实验室饲养的P110（p110δPI3-Kinase）基因剔除小鼠的父本与其背景品系C57BL／6小鼠杂交，获得的杂交一代再进行自交，其后代通过DNA检测，分离出野生型（425bp）、杂合子型（425bp＋602bp）和纯合子型（602bp），将得到的纯合子小鼠雌雄交配。结果经DNA鉴定获得了正常的P110小鼠，使该品系得以维持。结论对父母本一方发生繁殖困难或死亡的基因剔除小鼠，采用杂交．自交繁殖方式，结合DNA检测技术，可重建繁育群。
- 钱云叶步青耿建国徐平
- 关键词：DNA检测
- 重组活性小鼠组织因子及其阻断性单抗的制备与应用被引量：2
- 2009年
- 组织因子是一种位于细胞膜上的糖蛋白,是外源性凝血过程的关键启动因子,近年来其在肿瘤细胞迁移等其他过程中的重要作用也已逐渐被揭示.构建了融合有His标签的小鼠组织因子胞外区段重组蛋白基因,利用昆虫杆状病毒蛋白表达系统成功表达并得到大量可溶性重组小鼠组织因子.利用血浆凝集实验和鼠尾流血时间实验对此重组小鼠组织因子进行的活性检测表明,此重组蛋白具有良好的生物活性,可以引起血浆凝血或缩短鼠尾流血时间.同时,利用此重组蛋白为抗原,制备了小鼠组织因子的小鼠源功能阻断性单克隆抗体,在血浆凝集实验中证明其对小鼠组织因子的活性有明显抑制作用.利用此阻断性单抗,成功地在小鼠深静脉血栓模型中减轻了血栓形成,证明组织因子在深静脉血栓的病程发展中起重要作用,这也是组织因子阻断性单抗在此类动物模型中的首次成功应用.通过此项工作,成功地建立了大量制备具有良好生物活性的重组小鼠组织因子蛋白的方法,并进而得到了小鼠组织因子功能阻断性单抗,为利用各种小鼠动物模型对组织因子在各项生命活动中的作用进行深入研究奠定了良好的基础.
- 裴新辉池姗王尽淘林志新张雪洪耿建国
- 关键词：昆虫杆状病毒昆虫细胞SF9
