国家自然科学基金(30170818)
- 作品数：8 被引量：68H指数：3
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- 相关机构：复旦大学上海市农业科学院宁夏大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 霍乱毒素B亚单位与胰岛素B链融合基因的克隆及原核表达分析
- 2005年
- 构建了霍乱毒素B亚单位(cholera toxin B subunit,CTB)与胰岛素(insulin)B链的融合基因 CTB-INSB,将该融合基因克隆到大肠杆菌表达载体pET-30a(+)中,获得重组质粒pETCIB;并将该 质粒转入大肠杆菌菌株BL21(DE3)中;重组菌株经IPTG诱导后的表达产物经15％SDS-PAGE分 析表明可以表达融合蛋白,其分子量约为15.4kDa,且主要以包涵体形式存在,约占全菌蛋白的 30％。含CTB-INSB重组蛋白的包涵体经变性和复性后,可在体外自组装成五聚体结构。Western blotting分析结果显示CTB-INSB可分别被霍乱毒素的抗体和胰岛素的抗体识别,表明该蛋白具有 霍乱毒素B亚单位与胰岛素的双重抗原性。同时GM1-ELISA分析结果表明CTB-INSB在体外可 与神经节苷脂GM1(monosialoganglioside)特异结合,进一步证实了它能够形成类似CTB五聚体的 高级结构,具有生物活性。
- 陈丽欧阳凤秀钱炳俊任宏王强姜庆五王玉炯刘静波梁婉琪潘爱虎
- 关键词：霍乱毒素B亚单位融合基因B链原核IPTG特异结合
- 免疫调节疗法干预Ⅰ型糖尿病的研究进展被引量：2
- 2004年
- 任宏欧阳风秀姜庆五
- 关键词：免疫调节疗法干预IDDM胰岛素治疗患病
- 代谢综合征危险因素研究被引量：54
- 2004年
- 目的 探讨代谢综合征 (MS)的危险因素。方法 对 95名MS病例及 13 0名健康对照进行病例对照研究 ,运用单因素和多因素非条件Logistic回归分析 ,探讨影响MS发生的危险因素。 结果 进入多因素非条件Logistic回归模型的因素有年龄、糖尿病阳性家族史和饮酒 (P <0 0 5)。其中年龄OR值为 1 15,糖尿病阳性家族史OR值为2 79,饮酒OR值为 4 0 5。结论 年龄、糖尿病阳性家族史。
- 欧阳凤秀姜庆五俞顺章李锐史虹莉王振果张铁军张涛任宏张潇
- 关键词：代谢综合征LOGISTIC回归模型
- 霍乱毒素B亚单位-胰岛素原融合蛋白抗糖尿病被引量：1
- 2005年
- 目的 观察雌性非肥胖糖尿病(NOD)小鼠口服胰岛素和霍乱毒素B亚单位 胰岛素原融合蛋白(CTB proinsulin) +霍乱毒素B亚单位五聚体(CTB五聚体)对糖尿病发生的影响,为社区非肥胖性糖尿病干预提供参考依据。方法 4 0只雌性3～4周龄NOD小鼠随机分为4组:分别给予磷酸缓冲液(PBS) 5 0 0 μl,胰岛素(insulin) 1mg ,CTB - proinsulin 10 0 μg +CTG五聚体1μg ,CTB - proinsulin 30 0 μg +CTG五聚体3μg。每周灌胃2次至12周龄;从12周龄起,动态监测小鼠尿糖、血糖至2 6周龄,观察糖尿病的发生,比较不同抗原诱导免疫耐受的作用。结果 与PBS组比较,CTB proinsulin +CTG五聚体与胰岛素均能延缓、减少NOD小鼠糖尿病的发生,2 6周龄时小鼠糖尿病的累积发病率:PBS组10 0 % ,CTB proinsulin 10 0 μg +CTG五聚体1μg组、CTG proinsulin 30 0 μg +CTG五聚体3μg组和胰岛素组分别为4 0 % ,4 0 %和5 0 % (P <0 .0 10 )。各组生存时间分布有差别。结论 不同剂量组的CTB proinsulin +CTG五聚体与胰岛素能够提高NOD鼠生存率,并可达到与胰岛素相同保护作用而所需抗原剂量较小。
- 高玲张大兵任宏欧阳凤秀姜庆五
- 关键词：免疫耐受胰岛素原自身免疫性糖尿病
- 口服胰岛素对1型糖尿病小鼠预防与治疗作用被引量：3
- 2004年
- 目的 探索口服胰岛素引起的免疫耐受对 1型糖尿病的预防与治疗作用。方法 将 4周龄雌性非肥胖型糖尿病 (NOD)小鼠随机分成 4组 ,任选 3组从鼠龄 4周、8周和 12周起开始灌胃给予 1mg胰岛素 ,对照组从鼠龄 4周起灌胃给予PBS。 4组均持续灌胃到鼠龄 35周。结果 各胰岛素给药组小鼠的 1型糖尿病累计发病率均显著低于对照组 (P <0 0 1) ,生存率显著高于对照组 (P =0 0 0 9)。结论 口服胰岛素对 1型糖尿病具有预防与治疗作用。
- 任宏欧阳凤秀姜庆五
- 关键词：胰岛素口服耐受1型糖尿病
- 霍乱毒素B亚单位胰岛素混合蛋白抗糖尿病作用被引量：1
- 2006年
- 目的观察口服不同剂量霍乱毒紊B亚单位（CrB）与胰岛紊（insulin）混合蛋白疫苗的免疫耐受及预防1型糖尿病作用，为探讨社区糖尿病干预方案提供依据。方法3周龄雌性NOD小鼠60只，随机分为磷酸缓冲液（PBs）阴性对照、1mg胰岛紊阳性对照、CTB＋insulin100μg，CTB＋insulin 1mg等4组。从4周龄起，每周灌胃2次～12周龄；12周龄起，每周1次动态监测小鼠尿糖、血糖，至26周龄，观察糖尿病的发生，比较各组糖尿病发病率。结果与磷酸缓冲液（PBs）组比较，CTB＋insulin100μg。CTB＋insulin 1mg能够减少NOD小鼠糖尿病的发生，降低小鼠糖尿病的累积发病率。至鼠龄26周时，PBS组、CTB＋insulin100μg，CTB＋insulin1mg组和1mg胰岛素组的累积发病率分别为100％，60％，60％和40％，与阴性对照组比较，其他3组的累积发病率差异均有统计学意义（均P〈0．05）；2个试验组与阳性对照组的累积生存率及生存分布的差异无统计学意义。结论CTB＋insulin混合蛋白疫苗能够降低NOD小鼠糖尿病累积发病率，提高小鼠生存率；CTB＋insulin1mg组的预防作用优于100μg组。
- 高玲张大兵欧阳凤秀姜庆五
- 关键词：霍乱毒素B亚单位免疫耐受NOD小鼠
- 霍乱毒素B亚单位与胰岛素原融合基因的克隆、表达及重组蛋白特性分析被引量：2
- 2005年
- 构建了霍乱毒素B亚单位 (CholeratoxinBsubunit,CTB)与胰岛素原 (Proinsulin)的融合基因CTB -PROIN ,将该融合基因克隆到大肠杆菌表达载体pET 30a(+)中 ,获得重组质粒pETCPI,并将该质粒转入大肠杆菌菌株BL2 1(DE3)中 ;重组菌株经IPTG诱导后 ,其表达产物经过 15 %SDS PAGE分析表明该菌株可以表达融合蛋白 ,其分子量约为 2 1. 6kD ,且主要以包涵体形式存在 ,约占全菌蛋白的 2 5 %。含CTB- PROIN重组蛋白的包涵体经过变性和复性后 ,CTB- PROIN可以在体外自组装成五聚体结构。Westernblotting分析结果表明重组CTB PROIN蛋白可分别被霍乱毒素的抗体和胰岛素的抗体识别 ,说明该蛋白具有霍乱毒素和胰岛素的双重抗原性。同时在体外 ,CTB PROIN蛋白可与神经节苷脂GM1(monosialoganglioside)特异性结合 ,表明了该融合蛋白在体外具有生物活性。这些研究结果为利用原核生物表达系统研制廉价、高效的I型糖尿病口服疫苗奠定了基础。
- 陈丽欧阳凤秀钱炳俊任宏王强姜庆五王玉炯刘静波梁婉琪张大兵
- 关键词：霍乱毒素B亚单位胰岛素原
- 儿童1型糖尿病环境危险因素病例对照研究被引量：6
- 2005年
- 目的 探索 1型糖尿病的环境危险因素。方法 采用 1∶4病例对照研究的方法。选择 2 0 0 3年 5月～ 1 2月在复旦大学附属儿科医院内分泌病房住院或者门诊随访的上海地区 1型糖尿病患儿 4 0例 ,配以 1 6 0例从上海市社区人群中选取的未患 1型糖尿病、身体健康的儿童为对照。使用单因素和多因素条件Logistic回归模型进行分析。 结果 多因素条件Logistic回归分析结果显示 ,儿童时期的感染、母亲孕期的被动吸烟史和孕期感染史与 1型糖尿病的发生密切相关 (P <0 0 5 ) ,OR值分别为 9 399,2 2 36 1和 1 2 833。结论 儿童时期的感染、母亲孕期的被动吸烟史和孕期感染史是儿童 1型糖尿病的重要环境危险因素。
- 任宏欧阳凤秀罗飞宏沈水仙姜庆五
- 关键词：1型糖尿病环境危险因素病例对照研究
