国家自然科学基金(30170807)
- 作品数：9 被引量：43H指数：5
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- 长期酒精摄入对大鼠脂肪组织肿瘤坏死因子α和瘦素mRNA表达水平的影响
- 2010年
- 目的研究长期酒精摄入对大鼠脂肪组织肿瘤坏死因子α(TNF α)及瘦素(Leptin)mRNA表达水平的影响,探讨酒精导致胰岛素抵抗的机制。方法根据给予酒精的剂量0,0.8,1.6,2.4g·kg^(-1)·bw^(-1)。将Wistar大鼠40只分为对照组(Con)和低剂量酒精(LA)、中剂量酒精(MA)、高剂量酒精(HA)组,测血糖、胰岛素、血TNF-α和Leptin浓度,计算胰岛素抵抗指数,RT-PCR方法测定TNF-α,Leptin mRNA表达水平。结果与Con组相比,各剂量组血糖呈酒精剂量依赖性升高(r=0.499,P<0.01),各剂量组HOMA-IR增加且差异均具有统计学意义(P<0.05);各剂量组血清中TNF-α浓度及脂肪组织中TNF α mRNA表达水平增加,HA组差异有统计学意义(P<0.05);各剂量组血清Leptin浓度及脂肪组织Leptin mRNA表达水平均无改变。结论脂肪组织TNF-α mRNA表达水平升高可能是酒精导致胰岛素抵抗分子机制之一。
- 孙涛曲巍段东明赵立娜彭晓琳郝丽萍孙秀发
- 关键词：胰岛素抵抗肿瘤坏死因子Α瘦素
- 过量酒精摄入对大鼠细胞因子及胰岛的影响被引量：8
- 2004年
- 目的 研究长期酒精摄入对大鼠胰岛功能的影响 ,以及白细胞介素Iβ(IL - 1β)、肿瘤坏死因子α(TNF -α)、白细胞介素 6 (IL - 6 )在其中的作用。方法 清洁级Wistar大鼠 80只 (雌雄各半 )给予不同浓度的酒精溶液(10 % ,30 % ,5 0 % )灌胃。于实验第 13周末 ,断头处死大鼠 ,分离血清和胰腺分别检测血清中血糖、胰岛素、IL - 1β、TNF -α和IL - 6以及胰腺组织中IL - 1β、TNF -α和IL - 6水平。 结果 5 0 %酒精雌雄大鼠组血清胰岛素水平降低 ,空腹血糖升高 ,血清IL - 1β、TNF -α、IL - 6水平升高 ,与正常对照组相比均有显著性差异 (P <0 0 5 ) ;胰腺组织中 ,5 0 %酒精雌性大鼠组IL - 1β、TNF -α、IL - 6和雄性大鼠IL - 1β、TNF -α水平升高。雄性大鼠IL - 6在各组间无显著性差异。结论 IL - 1β、TNF -α、IL - 6可能参与了长期过量酒精摄入而引起的胰岛 β细胞功能障碍。
- 曲巍孙秀发付元华郭军旗刘烈刚郝丽萍毛丽梅杨年红
- 关键词：酒精胰岛胰岛素IL-1ΒTNF-ΑIL-6
- 一种简便分离纯化大鼠胰岛方法的探索被引量：6
- 2005年
- 目的 探索可大量获取纯化大鼠胰岛的最佳方法。方法 采用胰管内灌注生理盐溶液 KRBB, 外置胶原酶消化法及用单核细胞分离液Histopaque 1077纯化胰岛。结果 成年Wistar大鼠胰腺消化后能获得 (540±84) 胰岛/胰腺, 纯化后获得 (335±81) 胰岛/胰腺, 纯度可达90%。纯化后的胰岛培养上清液中未检测到胰淀粉酶。胰岛培养1周后, 胰岛素分泌量仍保持较旺盛状态。结论 本方法能获得大量纯度较高且活性好的胰岛, 是一种简便高效的胰岛分离方法。
- 郝丽萍胡学锋曲巍赵要武杨年红孙秀发
- 关键词：胰岛分离成年WISTAR大鼠分离纯化胰岛素分泌量胶原酶消化法
- 长期酒精摄入对大鼠胰岛的影响及与氧化应激关系的探讨被引量：9
- 2004年
- 目的 探讨了活性氧和一氧化氮 (NO)在其中的可能作用 ,以研究长期酒精摄入对胰岛影响的机制。方法 对照组灌以 6ml kgBW的蒸馏水 ,低、中、高各剂量组的无水乙醇剂量分别为 0 4 8、1 4 4及 2 4 0g kgBW ,时间为 1 3周。实验结束时检测了血糖和血胰岛素 ,用免疫组化及图象分析法分析了大鼠的胰岛结构参数 (从各组随机选 1 0只 ) ,并检测了其余大鼠血清和胰腺组织中的自由基反应水平。结果 (1 )与对照组相比 ,高剂量组雌雄大鼠的血糖升高 ,血胰岛素下降 ,胰岛素免疫反应阳性物面积与胰腺组织面积百分比(Ins+ panc)及胰岛素免疫反应阳性物面积与胰岛组织面积百分比 (Ins+ Isl)均降低 (P <0 0 5 )。 (2 )与对照组相比 ,高剂量组雌雄大鼠血清和胰腺组织中的总超氧化物歧化酶 (T SOD)降低 ,NO、活性氧及丙二醛 (MDA)含量升高 ;而低剂量组雌雄大鼠血清中的T SOD和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)升高 ,NO、活性氧及MDA含量下降 (P <0 0 5 )。结论 长期过量饮酒可通过引起胰腺氧化损伤而使胰岛功能受损 ,这可能是酒精引起患糖尿病危险性增高的原因之一。而长期适量饮酒可使抗氧化能力增强 。
- 付元华孙秀发曲巍郭军旗刘烈刚应晨江郝丽萍杨雪锋
- 关键词：酒精血糖胰岛氧化应激
- 长期酒精摄入对大鼠糖酵解途径关键酶活性的影响被引量：9
- 2004年
- 目的 研究长期酒精摄入对大鼠糖酵解途径及其关键酶活性的影响。方法 70只Wistar大鼠 (雌雄各半 )随机分为 5组 ,分别给予蒸馏水或不同浓度的酒精溶液 (10 %、30 %、5 0 % ,V V)灌胃。 9周后 ,取肝脏测定糖酵解途径关键酶 -葡萄糖激酶 (GK)、磷酸果糖激酶 (PFK)和己糖激酶 (HK)的活性。结果 (1) 30 %、5 0 %酒精组大鼠GK和PEK活性与对照组相比降低 (P <0 0 5 ) ;(2 )各组大鼠HK活性差异均没有显著性 ;(3)GK、PFK活性与酒精剂量显著相关 (r =- 0 99～ - 0 97,P <0 0 5 )。结论 长期酒精摄入可使GK和PFK)活性降低 ,从而抑制糖酵解过程。这也可能是酒精升高血糖 。
- 庞红张军毛丽梅杨年红应晨江郝丽萍孙秀发
- 关键词：酒精葡萄糖激酶己糖激酶
- 酒精对小鼠NIT-1细胞胰岛素分泌及COXⅡ基因表达的影响
- 2005年
- 目的:观察酒精对小鼠NIT-1细胞胰岛素分泌功能的影响并初步探讨其机制。方法:体外培养的小鼠NIT-1细胞,经不同浓度酒精(0、50、100、200、400mmol/L)作用6、12、24h后,用放免法测定NIT-1细胞分泌胰岛素情况,半定量RT-PCR方法检测细胞色素氧化酶Ⅱ(cytochromeoxidaseⅡ,COXⅡ)基因mRNA的表达。结果:酒精作用6h,NIT-1细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌增加;作用12h、24h,葡萄糖刺激的胰岛素分泌降低。酒精作用6h,COXⅡmRNA表达升高,12h表达开始降低,24h时高浓度组表达呈显著性降低。结论:酒精可增加或降低NIT-1细胞胰岛素分泌,与酒精作用时间、浓度有关。酒精导致COXⅡmRNA表达水平的改变很可能是酒精影响NIT-1细胞胰岛素分泌的机制之一。
- 郝丽萍庞红孙秀发应晨江杨年红毛丽梅
- 关键词：酒精NIT-1细胞胰岛素分泌
- 酒精对NIT-1细胞葡萄糖激酶基因表达的影响被引量：2
- 2005年
- 目的 观察酒精对NIT - 1细胞葡萄糖刺激后胰岛素分泌功能及葡萄糖激酶 (Glucokinase)基因表达的影响。方法 体外培养NIT - 1细胞 ,使用不同浓度的酒精 (0 ,5 0 ,1 0 0 ,2 0 0 ,4 0 0mmol/L)作用不同时间后 (6 ,1 2 ,2 4h) ,用放射免疫法测定NIT - 1细胞分泌胰岛素的量 ,用噻唑蓝 (MTT)法检测NIT - 1细胞代谢活性 ,用RT PCR方法检测葡萄糖激酶基因mRNA的表达。结果 酒精对NIT - 1细胞代谢活性的抑制与酒精剂量和作用时间有关。酒精作用 6h ,NIT - 1细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌增加 ;作用 1 2 ,2 4h ,葡萄糖刺激的胰岛素分泌降低。酒精作用 6h ,各剂量组葡萄糖激酶mRNA表达升高 ;酒精作用 1 2 ,2 4h ,各剂量组葡萄糖激酶mRNA表达均降低。结论 酒精对NIT - 1细胞葡萄糖刺激后胰岛素分泌及葡萄糖激酶mRNA表达的影响与作用时间、剂量有关。而葡萄糖激酶mR NA表达水平的改变可能是酒精影响NIT - 1细胞胰岛素分泌的重要机制之一。
- 胡学锋郝丽萍孙秀发刘烈刚应晨江章锡平杨年红毛丽梅
- 关键词：酒精葡萄糖激酶MRNA表达
- 酒精对大鼠胰岛素敏感性和骨骼肌胰岛素受体底物mRNA表达的影响被引量：15
- 2004年
- 目的 从基因表达水平探讨摄入不同剂量酒精影响胰岛素敏感性的分子机制。方法清洁级Wistar大鼠 80只 ,雌雄各半 ,随机分为对照组和低、中、高剂量组 ,摄入酒精剂量分别为每日 0、0 6、1 8和 3 0ml/kg。给予酒精 13周后 ,测定空腹血糖和血胰岛素 ,计算HOMA胰岛素抵抗指数(HOMA IR)。提取骨骼肌组织总RNA ,通过逆转录 聚合酶链反应测定胰岛素受体底物 1(IRS 1)mRNA表达水平。结果 雌性大鼠 3 0ml/kg组空腹血糖为 (8 36± 0 5 7)mmol/L ,空腹血胰岛素为(15 2 5±3 32 )mIU/L ,0 6ml/kg组HOMA IR为 1 775 3± 0 1381,IRS 1mRNA表达水平为 0 76 6 1± 0 0 76 9;0 8ml/kgHOMA IR为 2 2 0 2 2± 0 2 710 ,IRS 1mRNA表达水平为 0 5 0 18± 0 0 4 92 ;3 0ml/kg组HOMA IR(1 85 0 1± 0 16 2 8)与对照组 (1 982 6± 0 12 4 6 )相比 ,差异无统计学意义 ,IRS 1mRNA表达水平为0 4 181± 0 0 4 91。雄性大鼠 3 0ml/kg组空腹血糖为 (8 12± 0 72 )mmol/L ,空腹血胰岛素为 (18 6 5±4 2 4 )mIU/L ,仅 0 8ml/kg组HOMA I为 (1 8785± 0 2 5 0 2 ) ,IRS 1mRNA表达水平为 0 82 4 9± 0 0 6 4 7。结论 适量酒精摄入可以增强胰岛素敏感性 ,从而降低 2型糖尿病的发病危险。
- 张旭照应晨江刘烈刚章锡平孙秀发
- 关键词：MRNA表达胰岛素敏感性酒精胰岛素受体底物血胰岛素总RNA
- 酒精对小鼠NIT-1细胞氧化损伤及凋亡的影响被引量：4
- 2005年
- 目的 研究酒精能否诱导小鼠胰岛素瘤细胞(NIT -1)凋亡,初步探讨凋亡发生机制。方法 体外培养的小鼠NIT- 1细胞用不同浓度酒精处理后,采用DNA琼脂糖凝胶电泳法观察酒精对小鼠NIT- 1细胞凋亡的影响;测定细胞丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH- Px ,GPX)的活性以判断细胞氧化程度;采用比色法测定Caspase 3酶活性。结果 酒精导致NIT 1细胞琼脂糖凝胶电泳显示典型的梯状凋亡条带。与对照组比,剂量组MDA生成增多,SOD、GSH -Px活性下降,GSH含量下降。酒精作用后NIT 1细胞caspase- 3活性升高,升高程度与作用时间及剂量有关。结论 提示高浓度酒精可导致体外培养的小鼠NIT- 1胰岛β细胞氧化抗氧化失衡,氧化应激诱导细胞发生凋亡,凋亡的发生很可能与Caspase- 3激活有关。
- 郝丽萍胡学锋孙秀发应晨江刘烈刚毛丽梅
- 关键词：酒精NIT-1细胞氧化应激凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
