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国家高技术研究发展计划(2006AA224A7)
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鼠疫耶尔森菌carf1基因的克隆表达及其产物免疫学评价
2010年
目的表达具有免疫学活性重组F1抗原(rF1),并以其构建检测鼠疫抗体胶体金试纸条。方法将去掉信号肽编码序列的caf1基因片段与载体质粒pET32a(+)通过BamHl和NotⅠ双酶切位点进行连接,将重组质粒[caf1-pET32a(+)]转化入BL21(DE3)中进行诱导表达,表达产物经亲和层析纯化,以纯化rF1及天然F1抗原制备双检测鼠疫抗体胶体金标试纸条,并对浙江省528份人血清标本进行检测。结果含caf1-pET32a(+)的BL21(DE3),经诱导产生相对分子质量(Mτ)约为35.5×10^3的rF1融合蛋白;rF1融合蛋白检测鼠疫抗体的敏感性等同甚至超越天然F1抗原;在528份人血清标本的检测中,rF1与天然F1的符合率为97.9%(κ=0.466),有较好一致性。结论制备的rF1,具有良好免疫学活性,该rF1可替代天然F1抗原,用于鼠疫免疫学检测。
王鹏
石国祥
王海滨
俞东征
张建中
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鼠疫耶尔森菌
克隆表达
免疫学活性
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