辽宁省教育厅高校重点实验室项目(2008S142) 作品数:5 被引量:14 H指数:2 相关作者: 苏荣健 李宏丹 宋慧娟 程留芳 魏嘉 更多>> 相关机构: 辽宁医学院 中国人民解放军总医院 锦州医科大学 更多>> 发文基金: 辽宁省教育厅高校重点实验室项目 辽宁省博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
葡萄糖调节蛋白78反义核酸对HEK293细胞粘附和迁移的影响 被引量:2 2009年 为了研究葡萄糖调节蛋白78(Grp78)对细胞迁移和粘附的影响,应用Grp78反义寡核苷酸(Grp78AS-ODN)处理人胚肾细胞HEK293,对细胞的迁移和粘附特性进行分析。结果发现应用Grp78反义核酸处理细胞可以抑制HEK293细胞的迁移,促进细胞与底物间的粘附。进一步研究发现,应用Grp78反义核酸处理细胞可以促进粘着斑的形成,并引起小GTPaseRhoA在细胞膜和细胞浆中的重新分布。上述结果表明,特异性下调Grp78的表达可以抑制细胞迁移,促进细胞与底物间的粘附。 苏荣健 李宏丹 宋慧娟 魏嘉关键词:葡萄糖调节蛋白78 HEK293 细胞粘附 特异性下调葡萄糖调节蛋白78对肝细胞癌粘附特性和细胞外基质降解的影响 被引量:2 2009年 我们以前的研究表明特异性下调葡萄糖调节蛋白78(Grp78)可以抑制肝细胞癌细胞系BEL7402的侵袭和转移。为了进一步研究该抑制作用的分子机制,我们应用小干扰RNA(siRNA)技术特异性下调肝细胞癌细胞系BEL7402中Grp78的表达,并对细胞的粘附、伸展和细胞外基质降解情况进行研究,结果发现特异性下调Grp78可以促进细胞与细胞外基质的粘附,抑制细胞伸展。我们的研究还显示特异性下调Grp78的表达可以抑制基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9的表达及分泌,这些说明特异性下调Grp78可以抑制细胞外基质的降解。对机制的研究发现特异性下调Grp78表达可以抑制c-jun的磷酸化。这些结果表明特异性下调Grp78可以抑制肝细胞癌细胞系BEL7402的侵袭和转移,这种抑制作用可能是通过促进细胞与细胞外基质的粘附,抑制细胞伸展和细胞外基质的降解实现的。 苏荣健 李贞 李宏丹 宋慧娟 程留芳关键词:葡萄糖调节蛋白78 肝细胞癌 细胞粘附 细胞外基质降解 Grp78表达对人肝细胞癌细胞外信号调节激酶1/2活性和表达的影响 2009年 目的通过检测葡萄糖调节蛋白78(Grp78)、细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2在肝细胞癌手术切除组织中的表达,并在SMMC-7721细胞中干预Grp78的表达,探讨Grp78对ERK1/2激酶的调控作用。方法应用免疫组织化学方法(IHC)和免疫印迹法检测47例肝细胞癌手术切除组织样本中Grp78,ERK1/2的表达和ERK1/2磷酸化水平;在高表达Grp78的肝细胞癌细胞系SMMC-7721中,通过用小RNA干扰Grp78的表达来探讨Grp78表达水平,改变对ERK1/2活性及表达的影响。结果在肝细胞癌组织样本中,Grp78的表达情况与ERK1/2和磷酸化ERK1/2的表达明显呈正相关。在SMMC-7721细胞中Grp78高表达促进ERK1/2的磷酸化,应用RNA干扰特异性下调Grp78高表达细胞中Grp78水平可以抑制ERK1/2的磷酸化。结论Grp78参与调解ERK1/2信号通路,并且在肝细胞癌临床治疗方面可能成为潜在的治疗靶点。 苏荣健 李贞 程留芳 李宏丹 魏嘉 包翠芬关键词:肝细胞癌 GRP78 细胞外信号调节激酶1/2 小RNA干扰 SMMC-7721 免疫印迹法 白头翁皂苷D联合索拉非尼对人肝癌细胞转移的影响 被引量:4 2016年 目的探讨白头翁皂苷D联合索拉非尼对人肝癌细胞株转移的影响。方法人肝癌细胞株BEL-7402细胞按干预方式不同分为白头翁皂苷D组(11.9 mg/L)、索拉非尼组(2.15μmol/L)、联合组(白头翁皂苷D 11.9 mg/L+索拉非尼2.15μmol/L)以及对照组(普通培养液)。通过MTT法、Transwell小室实验、细胞划痕实验观察白头翁皂苷D和索拉非尼单药和联合对BEL-7402细胞迁移的抑制作用,并用Western blot检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,白头翁皂苷D、索拉非尼单药和联合对BEL-7402细胞的增殖均有抑制作用,且24 h的抑制率均<15%;Transwell小室实验和细胞划痕实验结果显示,联合组的迁移抑制率高于单药组(P<0.01),联合作用为相加(0.85≤联合效应≤1.15);Western blot检测示联合组在下调MMP-2、MMP-9方面的作用强于单药组(P<0.05)。结论白头翁皂苷D和索拉非尼联合可协同抑制BEL-7402细胞转移,联合效果整体优于单药。 贺武斌 苏荣健关键词:肝肿瘤 肿瘤转移 体外研究 索拉非尼 BEL-7402 白头翁皂苷D联合索拉非尼对人肝癌细胞侵袭与转移的影响 被引量:6 2016年 目的探讨白头翁皂苷D联合索拉非尼对人肝癌细胞株侵袭和转移的影响。方法以人肝癌细胞株SM M C-7721细胞为研究对象,分为白头翁皂苷D组(浓度为11.9μg/L)、索拉非尼组(浓度为2.15μmol/L)、联合组(白头翁皂苷D 11.9μg/L+索拉非尼2.15μmol/L)以及对照组(普通培养液)。通过MTT法、Transwell小室实验观察白头翁皂苷D、索拉非尼单药和联合对SMMC-7721细胞的侵袭和转移的抑制作用,并用免疫组织化学方法检测CD44V6、血管内皮生长因子C(VEGF-C)、基质金属蛋白酶MMP-9基因蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,白头翁皂苷D、索拉非尼单药和联合对SMMC-7721细胞的增殖均有抑制作用,且24 h的抑制率都<15%;Transw ell小室实验结果显示,联合组的黏附抑制率与单药组相比,具有协同抑制作用,但未呈现时间依赖关系;联合组的侵袭抑制率和迁移抑制率均显著高于单药组(P<0.01);免疫组织化学结果表明,联合组在下调CD44V6、VEGF-C、MMP-9方面均高于单药组(P<0.05)。结论白头翁皂苷D和索拉非尼联合可协同抑制SM M C-7721细胞侵袭和转移,联合效果整体优于单药。 贺武斌 苏荣健关键词:索拉非尼 肝癌细胞