浙江省自然科学基金(Y206856)
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 相关作者：王晓稼邵喜英陈占红冯建国苏丹更多>>
- 相关机构：浙江省肿瘤医院浙江大学医学院附属第二医院浙江省肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金浙江省医药卫生优秀青年科技人才专项科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人CYP19基因启动子荧光素酶报告基因载体的构建被引量：1
- 2010年
- [目的]克隆人CYP19基因启动子PⅠ.3(-345～-234bp)、PⅡ(-517～-278bp)和PⅠ.7(-299～+81bp)片段,构建启动子荧光素酶报告基因载体。[方法]采用生物合成PⅠ.3(-345～-234bp)、PⅡ(-517～-278bp)和PⅠ.7(-299～+81bp)区域基因片段,通过HindⅢ和KpnⅠ酶切连接到pGL3-Basic载体上。[结果]测序验证pGL3-Basic-PⅠ.3,pGL3-Basic-PⅡ和pGL3-Basic-PⅠ.7构建成功。[结论]pGL3-Basic-PⅠ.3,pGL3-Basic-PⅡ和pGL3-Basic-PⅠ.7荧光素酶报告基因载体的成功构建,为进一步研究CYP19基因组织特异性表达奠定基础。
- 邵喜英陈占红黄健雷蕾冯建国苏丹王晓稼
- 关键词：CYP19基因启动子荧光素酶
- 乳腺癌易感性与CYP19基因rs4646、rs1008805多态性的相关性被引量：3
- 2009年
- 目的探讨乳腺癌易感性与CYP19基因rs4646（C／A）、rs1008805（A／G）多态性的相关性。方法采用病例对照研究，应用TaqMan法检测233例浙江地区乳腺癌患者及180例正常人CYP19基因rs4646、rs1008805多态性，基因型分布和乳腺癌发病风险、患者年龄、月经状态及肿瘤临床病理特征的关系采用行×列表，检验；危险度比值比（OR）及95％可信区间（CI）运用非条件Logistic回归分析计算。结果（1）病例组中，CYP19基因rs4646（C／A）位点CC、AC、AA基因型的频率分别为47．6％、41.6％、10．7％，而对照组中则分别为52．8％、38．3％、8．9％；病例组中，C、A等位基因的频率分别为68．5％、31．5％，而对照组中则分别为71．9％、28．1％。以CC型为对照，AC、AA型没有增加乳腺癌的发生风险（P〉0．05），经年龄分层，亦未发现其与乳腺癌易感性相关。（2）病例组中，CYP19基因rs1008805（A／G）位点AA、AG、GG基因型的频率分别为44．6％、43．3％、12．0％，而对照组中则分别为51．4％、40．2％、8．4％；病例组中，A、G等位基因的频率分别为66．3％、33．7％，而对照组中则分别为71．5％、28．5％。以AA型为对照，AG、GG型没有增加乳腺癌的发生风险（P〉0．05），经年龄分层，亦未发现其与乳腺癌易感性相关。（3）CYP19基因rs4646（C／A）和rs1008805（A／G）多态性与乳腺癌患者年龄、月经状况及病理特征均无明显相关。结论CYP19基因rs4646、rs1008805多态性与乳腺癌易感性无明显相关，尚不推荐单独作为未来乳腺癌基因筛查的候选指标。
- 邵喜英许涌苏丹许凯声冯建国牟翰舟徐笑红陈占红王晓稼
- 关键词：乳腺癌基因多态性等位基因
- pcDNA3.1(+)-CYP19-GFP真核表达质粒构建被引量：5
- 2011年
- 目的:构建pcDNA3.1(+)-CYP19-GFP、pcDNA3.1(+)-CYP19W39R-GFP、pcDNA3.1(+)-CYP19R264C-GFP与pcDNA3.1(+)-CYP19W39R-R264C-GFP真核表达质粒,并观察pcDNA3.1(+)-CYP19-GFP质粒在MCF-7和Bcap-37细胞中的表达。方法:①采用RT-PCR技术扩增CYP19 cDNA,插入pcDNA3.1(+)载体中,构建pcDNA3.1(+)-CYP19表达质粒;酶切pcDNA3.1(+)-CYP19(304bp BamHⅠ)-GFP和pcDNA3.1(+)-CYP19质粒,构建pcDNA3.1(+)-CYP19-GFP表达质粒;②以pcDNA3.1(+)-CYP19-GFP质粒为模板,采用定点突变技术,构建pcDNA3.1(+)-CYP19W39R-GFP和pcDNA3.1(+)-CYP19R264C-GFP及pcDNA3.1(+)-CYP19W39R-R264C-GFP表达质粒;③pcDNA3.1(+)-CYP19-GFP质粒通过脂质体介导转染MCF-7和Bcap-37细胞,荧光显微镜观察其在细胞中的表达。结果:①酶切鉴定及测序验证pcDNA3.1(+)-CYP19-GFP构建成功;②测序验证pcDNA3.1(+)-CYP19W39R-GFP和pcDNA3.1(+)-CYP19R264C-GFP及pcDNA3.1(+)-CYP19W39R-R264C-GFP构建成功;③在经转染的MCF-7和Bcap-37细胞中观察到较强的绿色荧光。结论:pcDNA3.1(+)-CYP19-GFP、pcDNA3.1(+)-CYP19W39R-GFP和pcDNA3.1(+)-CYP19R264C-GFP及pcDNA3.1(+)-CYP19W39R-R264C-GFP真核表达质粒已成功构建,并证实pcDNA3.1(+)-CYP19-GFP质粒能在MCF-7和Bcap-37细胞中表达,为进一步研究CYP19基因单核苷酸多态性的确切功能奠定基础。
- 邵喜英陈占红曹江方永明王晓稼
- 关键词：质粒CYP19基因真核表达质粒GFP
- 乳腺癌病因学研究进展被引量：8
- 2008年
- 乳腺癌的发病原因复杂，至今尚不能用已知的单因素或多因素模型来完全解释其发生机制与发展过程。流行病学研究提示，生活环境的恶化、生活方式与膳食结构的改变等仍是主要原因，了解乳腺癌已知的病因或高危因素，有利于乳腺癌的预防和早期诊断，针对高危人群的筛查和干预性治疗已经使乳腺癌的发病率与死亡率降低。
- 王晓稼Kevin R.Fox(综述)
- 关键词：乳腺肿瘤病因
- CYP19基因组织特异性表达调控研究进展被引量：1
- 2007年
- 芳香化酶是雄激素转化为雌激素的限速酶,其编码基因为CYP19基因,其表达具有组织特异性。在多种调控因素作用下,CYP19基因选择性地利用不同的启动子介导其在不同组织中的表达。在正常乳腺脂肪组织中,其表达由PI.4介导,而在乳腺癌中的表达主要通过PII,PI.3和PI.7启动;在造骨组织中,主要由PI.4,PI.3和PI.6介导。研究CYP19基因的组织特异性表达并利用基因治疗和/或药物干预等手段,能选择性地降低乳腺癌组织中的雌激素水平,减少其在骨质丢失和骨折等方面的不良作用。
- 邵喜英王晓稼
- 关键词：乳腺癌CYP19基因治疗
