山西高校科技研究开发项目(20041238)
- 作品数：17 被引量：71H指数：6
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- 致敏IEL过继转移诱导抗弓形虫感染的机制被引量：1
- 2006年
- 目的分离供体鼠感染弓形虫后不同时间点的小肠上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocyte,IEL)并过继转移,研究其诱导受体鼠抗弓形虫感染作用及其机制。方法BALB/c小鼠经口感染弓形虫速殖子5×104个/只,对照组未感染,作为供体提供IEL。同品系小鼠36只为受体鼠,分为6组,每组6只,经尾静脉分别接受分离自供体鼠感染弓形虫后第7(IEL7组)、9(IEL9组)、11(IEL11组)、13(IEL13组)、15d(IEL15组)的致敏IEL或未致敏(IEL0组,即对照组)的IEL3×105/0.2ml·只。各组小鼠过继转移后第4d,用弓形虫速殖子灌胃攻击,攻击后第13d分离纯化脑、肺、脾组织内速殖子并计数,测定小肠Peyer′s Patch(PP)CD4+、CD8+T细胞亚群水平。结果致敏IEL过继免疫可使受体鼠脑、肺、脾组织内速殖子数显著减少,接受致敏后第13d IEL的小鼠组织内速殖子数减少最为显著(Ρ<0.01),与IEL0组相比,脑、肺和脾组织内速殖子数分别减少81.13%、58.43%和70.97%;同时,小肠PP结CD4+T细胞增多,CD4+/CD8+比值增高(Ρ<0.01)。结论过继转移致敏IEL能显著提高受体鼠的抗弓形虫感染能力,且保护作用同致敏时间关系密切,以感染后13d分离的致敏IEL保护性最强。
- 杨亚波沈嬿琼殷国荣刘红丽
- 关键词：弓形虫粘膜免疫过继转移
- 弓形虫STAg联合IFN-γ佐剂滴鼻免疫小鼠诱导不同黏膜部位抗体水平动态观察
- 目的观察弓形虫可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)和IFN-γ佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠后不同黏膜部位抗体水平及其持续时间,为黏膜疫苗研制提供实验依据。方法 BALB/c小...
- 刘红丽孟晓丽弓鸿飞殷国荣
- 关键词：弓形虫STAG滴鼻免疫黏膜抗体
- 文献传递
- 可溶性弓形虫速殖子抗原联合蜂胶和IFN-γ鼻内免疫小鼠诱导的细胞免疫应答被引量：17
- 2006年
- 目的 比较蜂胶、IFN-γ佐剂以及两种佐剂混合鼻内免疫辅助STAg增强机体细胞免疫应答的水平，探讨两种佐剂联合应用的免疫效果。方法 将5～6周龄雌性BALB／c小鼠60只随机分为4组：20μg STAg组，20μg STAg＋40μg蜂胶组，20μgSTAg＋1000U IFN-γ组和20μg STAg＋40μg蜂胶＋1000U IFN-γ组。将抗原和佐剂溶于20μl PBS中，双侧鼻孔（10μl／鼻孔）滴鼻免疫。免疫2次，间隔14d，末次免疫后第10d用RH株弓形虫速殖子4×10^4个／只灌胃攻击。逐日观察小鼠存活情况。攻击后第43d处死全部存活小鼠，免疫细胞化学（ICC）法检测小鼠PP结、IEL和脾T淋巴细胞亚群水平。结果 与STAg组相比，各佐剂组小鼠T淋巴细胞亚群比例有升高的趋势，其中IFN-γ、蜂胶＋IFN-γ佐剂组小鼠PP结CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞，IEL、脾CD8^＋T淋巴细胞数显著高于STAg组，CD4^＋／CD8^＋T淋巴细胞比值倒置。结论 在抗弓形虫感染中，IFN-γ的佐剂作用优于蜂胶，有效激发机体细胞免疫应答，可用作鼻内免疫抗弓形虫感染的粘膜佐剂。IFN-γ＋蜂胶佐剂鼻内免疫效果优于单独蜂胶、IFN-γ佐剂，应用联合佐剂是抗弓形虫感染免疫的一个新思路。
- 殷国荣刘成芳刘娟娟管志玉石蓉张宇斌银晶晶
- 关键词：可溶性速殖子抗原IFN-Γ蜂胶鼻内免疫细胞免疫粘膜免疫
- TSo联合IFN-γ鼻内免疫小鼠的抗弓形虫感染保护作用被引量：3
- 2005年
- 目的研究速殖子超声裂解物(TSo)联合IFN-γ鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染的保护作用. 方法将6～7周龄BALB/c小鼠100只随机分为4组,每组25只.分别用PBS 10 μl、20 μg TSo、500 U IFN-γ和20 μg TSo+500 U IFN-γ鼻内免疫小鼠2次,间隔2周.末次免疫后第10 d,用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击.分别于攻击后第7、10、13、16、19 d处死小鼠,计数脑、肺、肝组织内弓形虫速殖子,观察其动态变化. 结果 TSo+IFN-γ鼻内免疫组可使受攻击小鼠脑、肺、肝组织内弓形虫速殖子数减少,攻击后第13和19 d TSo+IFN-γ组小鼠脑内速殖子数比PBS组分别减少63.92%和58.39%(P均<0.05). 结论 TSo+IFN-γ鼻内免疫小鼠可产生有效的保护性免疫,可减少脑、肺、肝组织内弓形虫速殖子数.组织内速殖子计数可以作为抗弓形虫感染保护力的重要评价指标.
- 元海军殷国荣陈洁孟晓丽白丽萍
- 关键词：弓形虫IFN-Γ鼻内免疫粘膜疫苗
- 弓形虫可溶性速殖子抗原和霍乱毒素滴鼻免疫小鼠诱导的鼻通道细胞免疫应答被引量：3
- 2006年
- 目的研究弓形虫可溶性速殖子抗原(solubletachyzoiteantigen,STAg)和霍乱毒素(choleratoxin,CT)佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠后鼻通道(nasalcavity,NC)的免疫效应及持续时间。方法BALB/c小鼠96只随机分为实验组和对照组,实验组以STAg(20!g/只)为抗原,CT(1!g/只)为佐剂滴鼻免疫,对照组以PBS滴鼻。滴鼻2次(间隔2周)后分别于第1、2、3、4、6、8、10、12周处死6只小鼠。分离NC的淋巴细胞,计数并涂片,用免疫细胞化学法检测其CD4+T、CD8+T细胞亚群水平。结果小鼠免疫后,NC淋巴细胞第1周至第10周持续显著增生(P<0.05);NC中CD4+T细胞水平第1周至第8周持续显著增高(P<0.05),CD8+T细胞在第1、2、3周(P<0.05)显著增高,持续至免疫后第3周,CD4+/CD8+比值无明显变化。结论STAg和CT佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导NC的免疫应答,并可持续较长时间。
- 刘晋平殷国荣孟晓丽杨亚波刘红丽
- 关键词：弓形虫可溶性速殖子抗原霍乱毒素鼻内免疫T细胞亚群
- 弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的脾淋巴细胞持续性免疫应答被引量：5
- 2006年
- 目的观察弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的脾淋巴细胞的免疫应答及持续时间。方法96只BALB/c小鼠随机分为免疫组和对照组,免疫组以弓形虫复合黏膜疫苗20μl/只(20μg可溶性速殖子抗原+1μg霍乱毒素)滴鼻免疫2次(间隔2周),对照组以PBS滴鼻。分别于末次滴鼻后第1,2,3,4,6,8,10,12周处死小鼠,脾淋巴细胞计数,免疫细胞化学法检测CD4+、CD8+T细胞亚群水平。结果免疫组小鼠于第1,2周脾淋巴细胞明显高于对照组(P<0.01),其中以CD4+T细胞增生为主,第1,2,3,4,6周增生显著(P<0.01),CD8+T细胞水平在第2,3周也有增生(P<0.05),CD4+/CD8+比值第6周高于对照组(P<0.01)。结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导脾淋巴细胞增殖性免疫应答,且可持续较长时间。
- 孟晓丽殷国荣吴静唐旭马广源张杰
- 关键词：弓形虫属黏膜疫苗滴鼻免疫霍乱毒素
- ESA与STAg联合滴鼻免疫小鼠诱导的特异性免疫应答被引量：3
- 2007年
- 目的观察弓形虫排泄分泌抗原(ESA)与可溶性速殖子抗原(STAg)联合或单独滴鼻免疫小鼠的免疫应答效果,筛选弓形虫黏膜疫苗候选抗原。方法将40只BALB/c小鼠随机分为4组,每组10只。实验组分别用20μgSTAg、30μgESA及二抗原联合(15μgESA与10μgSTAg)滴鼻免疫2次,间隔14d,对照组用PBS以20μl/只滴鼻。于末次免疫后第14天,取血清,收集小肠冲洗液,检测特异性抗体,分离肠上皮内淋巴细胞(iIEL)和脾淋巴细胞并计数。结果整个实验期间,各组小鼠健康状况良好,体重逐渐增加。STAg组、ESA组及联合抗原组小鼠黏膜、血清中特异性抗体水平依次升高,脾淋巴细胞和iIEL增殖反应逐渐增强。联合抗原组和ESA组血清IgG抗体和小肠冲洗液sIgA升高尤为显著。同时,联合抗原组、ESA组脾淋巴细胞和iIEL增生显著高于对照组。结论ESA单独或联合STAg滴鼻免疫小鼠均能激发弓形虫特异性黏膜及系统免疫应答。两种抗原联合免疫的研究,将有助于制定更加完善的弓形虫疫苗研究策略。
- 刘红丽管志玉殷国荣马晓明韩惠瑛
- 关键词：排泄分泌抗原可溶性速殖子抗原鼻内免疫
- 弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的肠IEL持续性免疫应答被引量：11
- 2006年
- 目的采用可溶性速殖子抗原(solubletachyzoiteantigen,STAg)和霍乱毒素(choleratoxin,CT)佐剂制备弓形虫复合黏膜疫苗,观察经滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的肠上皮内淋巴细胞(intraepitheliallymphocytes,IEL)免疫应答及持续时间,探讨其抗弓形虫感染的作用机制。方法BALB/c小鼠96只随机分为实验组和对照组,实验组以免疫原性好的STAg(20μg/只)为抗原和CT(1μg/只)为佐剂滴鼻免疫,对照组以PBS滴鼻。滴鼻2次(间隔2周)后分别于第1、2、3、4、6、8、10、12周处死小鼠。制备肠IEL细胞悬液,计数并涂片;免疫细胞化学法(immunocytochemistry,ICC)检测CD4+T、CD8+T细胞亚群水平。结果免疫后肠IEL显著增生,第2周达高峰,第1周至第4周(P<0.01)高于对照组。其中以CD8+T细胞增生为主,CD8+T细胞水平第2周达高峰,第1周至第6周增高显著(P<0.01),CD4+T细胞也略有增生,第2、3周(P<0.05)有显著性,CD4+/CD8+比值倒置,第1、2周明显低于对照组(P<0.05)。结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导肠IEL免疫应答,且可持续较长时间,在预防弓形虫感染中起重要作用。
- 殷国荣孟晓丽王海龙石蓉刘娟娟管志玉
- 关键词：弓形虫黏膜疫苗滴鼻免疫STAG
- 弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导NALT和GALT黏膜部位的免疫应答被引量：4
- 2007年
- 目的观察弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的鼻相关淋巴组织(NALT)和肠相关淋巴组织(GALT)黏膜部位的免疫应答,探讨弓形虫黏膜疫苗能否在感染起始阶段有效诱导免疫应答。方法将BALB/c小鼠随机分为免疫和对照组,免疫组小鼠以弓形虫复合黏膜疫苗20μl/只(20μgSTAg+1μgCT)滴鼻免疫2次(间隔2周),对照组PBS滴鼻。于末次滴鼻后14d颈椎脱臼处死小鼠,ELISA测定粪便和鼻咽冲洗液IgA抗体水平;计数NALT、NC及PP、IEL淋巴细胞数,免疫细胞化学法检测CD4+、CD8+T细胞亚群水平。结果免疫组小鼠粪便IgA和鼻咽冲洗液IgA抗体显著高于对照组(P<0.05)。NALT内淋巴细胞明显增生(P<0.05),其中CD4+、CD8+T细胞均有增生(P<0.01),CD4+/CD8+比值降低(P<0.05)。NC中淋巴细胞数明显升高(P<0.01),以CD4+T细胞水平为主(P<0.01)。GALT部位PP淋巴细胞增生显著(P<0.01),主要以CD4+T细胞为主;而IEL以CD8+T细胞增生为主(P<0.01),CD4+/CD8+比值降低(P<0.05)。结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导NALT和GALT黏膜部位免疫应答。
- 李珀孟晓丽殷国荣张杰
- 关键词：弓形虫黏膜疫苗滴鼻免疫肠相关淋巴组织
- 弓形虫ESA鼻内免疫小鼠诱导的黏膜及系统免疫应答
- 2007年
- 目的观察弓形虫排泄-分泌抗原(excreted-secreted antigen,ESA)鼻内免疫小鼠诱导黏膜和系统免疫应答的效果。方法将64只BALB/c小鼠随机分为8个组,每组8只。实验组小鼠分别用腹腔感染弓形虫小鼠第0,6,12,24,36,48和60小时无菌收集的腹腔液中获取的ESA 20μg/只滴鼻免疫小鼠2次,间隔14 d,以PBS 20μl/只滴鼻为对照。逐日观察小鼠状况,于末次免疫后第14天颈椎脱位处死小鼠,检测血清特异性IgG、小肠冲洗液sIgA水平,分离肠上皮内淋巴细胞(intesti-nal intraepithelial lymphocytes,iIEL)及肠系膜淋巴结淋巴细胞(mesenteric lymph node lymphocytes,MLNL)并计数。结果60 h组小鼠初次免疫后第8-11天,有倦怠、饮水及采食量减少等表现,体重增长较其他组缓慢(P<0.05),其他组小鼠健康状况良好。不同时相ESA鼻内免疫小鼠后特异性抗体水平升高,MLNLi、IEL发生增殖性应答。48 h组和60 h组各项指标均明显高于0 h组(P<0.01)及PBS组(P<0.05)。结论48 h和60 h弓形虫ESA均能诱导黏膜及系统免疫应答,但60h ESA可能对机体有毒副作用,不适宜直接滴鼻免疫,48 h ESA可作为弓形虫黏膜疫苗的候选抗原。
- 管志玉孟晓丽殷国荣刘红丽王海龙
- 关键词：弓形虫排泄-分泌抗原鼻内免疫
