广东省科技计划工业攻关项目(2009198)
- 作品数：12 被引量：79H指数：7
- 相关作者：周清温金莲刁俊明陈桂珠唐睿更多>>
- 相关机构：中山大学广东药学院嘉应学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金全球环境基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学农业科学更多>>
- miR-148a克隆及逆转录病毒载体构建被引量：2
- 2010年
- 目的克隆微小RNA hsa-miR-148a并构建逆转录病毒表达载体。方法将PCR扩增得到的miR-148a前体序列和pMSCV载体经双酶切连接产生pMSCV-miR-148a逆转录病毒表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆。用pMSCV-miR-148a和PIK packaging质粒以磷酸钙共沉淀法转染包装细胞293FT,包装产生逆转录病毒。将病毒感染NIH3T3细胞进行滴度测定。结果经双酶切鉴定和测序证实,成功构建了miR-148a的逆转录病毒表达载体pMSCV-miR-148a。并测得病毒滴度为5×108CFU/ml。结论以miR-148a前体序列构建的逆转录病毒表达载体pMSCV-miR-148a能够产生高滴度的逆转录病毒,为深入研究miR-148a的生物学功能奠定了基础。
- 徐学虎全天一曾伟霞陈欣洁李伟明
- 关键词：DNA甲基转移酶肿瘤甲基化逆转录病毒
- 对乙酰氨基酚在分子印迹膜修饰玻碳电极上的电化学行为及测定被引量：9
- 2012年
- 以对乙酰氨基酚(PCT)为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,采用光引发原位聚合法在玻碳电极(GCE)表面聚合成膜,以甲醇-甲酸将模板分子洗脱,制得对乙酰氨基酚分子印迹膜修饰电极(MIP-GCE),建立了该电极直接测定PCT的分析方法。结果表明,该传感器具有较高的选择性和灵敏度,PCT浓度在5.0×10-5～1.0×10-3mol.L-1范围内与其峰电流呈良好的线性关系,检出限为1.4×10-6mol.L-1。应用该法测定药物中PCT的含量,在干扰物质共存情况下的回收率为96%～105%。
- 周清刘岚翟海云朱明芳张珍英
- 关键词：对乙酰氨基酚分子印迹膜玻碳电极电化学光引发
- 碳糊电极阳极吸附伏安法测定中成药及保健品中的槲皮素
- 2012年
- 目的:建立碳糊电极(CPE)阳极吸附伏安法测定中成药及保健品中槲皮素的方法。方法:用石墨粉-液体石蜡(4:1)制备CPE,在HAc-NaAc(pH 3.6)缓冲液中,槲皮素在0.401 V(vs.Ag-AgCl)产生一灵敏的吸附氧化峰。结果:槲皮素浓度在3.13×10-7～1.0×10-5mol.L-1与峰电流呈良好的线性关系(r=0.996 0),检出限为2.1×10-8mol.L-1,应用该法测定中成药及保健品中的槲皮素取得了较好的结果。结论:该法准确可靠、经济实用,可用于槲皮素的测定。
- 周清温金莲朱明芳龙宁翟海云
- 关键词：槲皮素阳极吸附伏安法碳糊电极银杏叶片
- 转IL-1Ra和TGF-β1基因治疗兔骨性关节炎的体外实验研究被引量：10
- 2011年
- 目的探讨重组人IL-1Ra和TGF-β1双基因在体外对兔骨性关节炎软骨退变的治疗效果。方法取新西兰大白兔关节软骨,经消化分离,软骨细胞以1.5×105/ml浓度培养于6孔培养板。软骨细胞分为5组,转染IL-1Ra组、转染TGF-β1组、转染IL-1Ra+TGF-β1双基因组、未转染组、空白组。上述转染组均以Lipofectamine TM 2000 Reagent脂质体为转染媒介。各组加入软骨块,除空白组外,其余各组均加入20ngIL-1β。于第6天后每组各取4孔1.5ml培养基,ELISA法检测TGF-β1和IL-1Ra的含量,RIA法检测IL-1β和TNF-α的含量。收集软骨块做HE染色、阿尔新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化检测等组织学观察。结果转染组IL-1Ra或TGF-β1有较高的表达水平;转染组IL-1β和TNF-α的表达水平降低,在双基因组降低最明显,与单基因组之间有显著性差异(P<0.05)。转基因组基质染色均比未转染组着色较深。在双基因组软骨细胞排列尚整齐,细胞数量多,基质深染。结论联合基因治疗效果优于单基因,为体外骨性关节炎的基因治疗提供实验基础。
- 张平蔡道章刘斌钟志宏潘永谦张振山
- 关键词：白细胞介素1转化生长因子基因转移技术软骨细胞
- 三聚氰胺分子印迹固相萃取小柱的研制及其应用被引量：2
- 2011年
- 用本体聚合法制备三聚氰胺分子印迹聚合物,通过静态平衡吸附实验及固相萃取实验表征其固相萃取性能,结合HPLC法对实际奶粉样品中的三聚氰胺进行测定。三聚氰胺模板聚合物的吸附能力强于空白聚合物;固相萃取柱对三聚氰胺标准溶液(0.3 mmol/L)一次性萃取率达97.01%,奶粉样品中三聚氰胺测定的平均回收率为101.2%。印迹聚合物对三聚氰胺具有特异性识别性能,固相萃取小柱萃取选择性好、柱容量较高,可应用于药品、食品检测等相关领域。
- 周清唐睿翟海云温金莲
- 关键词：三聚氰胺固相萃取分子印迹
- 盆栽桐花树对不同遮光度的生理生态响应被引量：22
- 2011年
- 盆栽红树植物桐花树(Aegiceras corniculatum)1年生幼苗,研究了在浇灌淡水和人工海水2种情况下不同遮光度(透光率25%、45%和100%)处理对盆栽桐花树生理生态的影响。结果表明,处理360d后,在相同盐度处理下植株的茎高年增量随光照强度减弱而增大,3种光照强度处理之间差异极显著,而茎径年增量则与茎高年增量相反。平均每株分枝数、叶片数、叶面积和叶片厚度存在显著差异。在相同盐度处理下,光照强度25%和45%处理的植株叶片叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量无显著差异,但均显著高于100%光照强度,而6种处理植株叶片叶绿素a/b比值没有显著差异。在相同盐度处理下,随着光照强度的降低,净光合速率、可溶性糖含量、硝酸还原酶(NR)活性和根系活力均呈下降趋势,且不同光照强度处理间存在极显著差异。在同一光照强度下,淡水组的可溶性糖含量、NR活性和根系活力均比人工海水组低。试验表明,遮光对盆栽桐花树的生理生态有显著影响。
- 刁俊明陈桂珠
- 关键词：桐花树淡水光照强度生理响应
- 肠炎清合剂的质量控制方法研究被引量：3
- 2011年
- 目的:建立肠炎清合剂中君药黄连的鉴别及盐酸小檗碱、盐酸巴马汀含量测定方法。方法:采用薄层色谱法对合剂中黄连进行定性鉴别;采用HPLC进行含量测定。结果:薄层色谱均能明显的检出黄连的特征有效成分盐酸小檗碱和盐酸巴马汀;HPLC法中,盐酸小檗碱在1.34～42.8μg.mL-1内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率99.3%,RSD=0.92%(n=9);盐酸巴马汀在1.24～39.8μg.mL-1内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率98.6%,RSD=0.82%(n=9)。结论:本法简便、快速、灵敏、准确,重现性好,可以作为该合剂的质量控制方法。
- 温金莲唐睿周清甘伟发黄晓文董宇静梁基智
- 关键词：盐酸小檗碱盐酸巴马汀薄层色谱法高效液相色谱法
- 淡水培养对桐花树幼苗根生长的影响被引量：7
- 2010年
- 在全光照条件下用恒定淹水位淡水培养红树植物桐花树(Aegiceras corniculatum)幼苗1年,以人工海水(8g.Kg-1)培养为对照,研究了淡水驯化对桐花树幼苗根的生长指标和根系活力的影响。结果表明:桐花树幼苗根的生物量呈持续增长的趋势,后180d的增长量显著大于前180d,淡水组与人工海水组并未表现出显著差异;两组幼苗的根数、根长和根粗在同一时期没有明显差异,而在不同时期有显著差异;两种处理幼苗的根系活力均出现两个高峰值,分别在6月和9月份,幼苗的根系活力在5～7月份表现为人工海水组大于淡水组,而8～12月份则淡水组高于人工海水组;两种处理的冠根比在同一时期无显著差异。以上结果表明:淡水培养对桐花树幼苗根的生长没有显著不利的影响,表明桐花树对淡水环境具有较强的适应性。
- 刁俊明陈桂珠
- 关键词：桐花树根生长根系活力
- 尼泊金乙酯分子印迹固相萃取小柱的研制及应用被引量：2
- 2011年
- 研制了一种对尼泊金乙酯具有特异性识别性能的分子印迹固相萃取小柱。用本体聚合法制备尼泊金乙酯分子印迹聚合物,通过静态平衡吸附实验及固相萃取实验表征其固相萃取性能,并结合UV法对滴眼液中的尼泊金乙酯进行测定。结果显示,尼泊金乙酯模板聚合物的吸附能力强于空白聚合物;印迹固相萃取柱对尼泊金乙酯标准溶液(0.04 mmol/L)一次性萃取率达95.1%。印迹聚合物对尼泊金乙酯具有特异性识别性能,固相萃取小柱选择性好,可应用于药品、食品、化妆品检测等相关领域。
- 周清刘岚张珍英温金莲
- 关键词：固相萃取分子印迹
- 淡水培养对桐花树幼苗生长发育的影响被引量：19
- 2010年
- 在广东梅州实验地全光照条件下用恒定淹水位淡水培养处理红树植物桐花树幼苗1年,以人工海水(盐度8 g.kg-1)为对照,研究了淡水培养对桐花树幼苗生长发育的影响。结果表明:淡水组幼苗的茎高、基径、胚轴直径等指标显著低于人工海水组,而叶片数则极显著低于人工海水组,在胚轴高、分枝数、叶长、叶宽、叶长/叶宽、根长、根径、根数等指标上差异不显著;淡水组的叶面积比人工海水组大18.11%,差异显著。180天时,淡水组植株的根、茎、叶的生物量及总生物量与人工海水组的相比没有显著差异,但分别比人工海水组低12.50%、18.40%、16.48%、16.32%,两组植株的根、茎、叶生物量的大小均为:茎>叶>根;360天时,2组植株的根、茎、叶的生物量及总生物量间差异不显著,但淡水组比人工海水组分别低33.88%、17.48%、28.30%、26.51%,两组植株的根、茎、叶生物量的大小均为:叶>茎>根。种植1年后,两组桐花树幼苗的存活率都达90%以上,部分植株有花蕾出现且开花,其中,人工海水组植株先出现花蕾,而淡水组植株相对迟25天出现花蕾,但淡水组出现花蕾的株数比人工海水组多33.82%。由此可见,淡水对桐花树幼苗大部分形态指标均有显著影响,但桐花树幼苗可以正常生长,且能够开花,表明桐花树对淡水环境具有较强的适应性。
- 刁俊明邹嫣娉陈桂珠
- 关键词：红树植物桐花树生长发育
