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浙江省自然科学基金(Y206897)
作品数:
1
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相关作者:
刘东海
饶泽昌
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唐洪林
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相关机构:
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作者
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石小玉
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李克强
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饶泽昌
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刘东海
传媒
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肿瘤学杂志
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2009
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ePNP自杀基因载体的构建及其表达
2009年
[目的]构建稳定表达ePNP(E.coliPNP)的细胞模型,为肿瘤的基因治疗提供实验基础。[方法]提取大肠杆菌E.coliK12总DNA,PCR方法克隆大肠杆菌ePNP基因,构建逆转录病毒载体质粒pMSCV-ANGPTL4,鉴定测序。脂质体法将三种逆转录病毒载体pMSCV-ANGPTL4、pVSV、pGAG-POL共转染293-EBNA包装细胞,获得高滴度病毒并感染MDA-MB435细胞。荧光显微镜与RT-PCR检测MDA-MB435细胞ePNP基因的表达。[结果]所克隆的ePNP基因与文献报道一致;成功构建了pMSCV/ePNP重组逆转录病毒载体;ePNP基因在MDA-MB435细胞中获得稳定表达。[结论]pMSCV/ePNP自杀基因载体的成功构建及其表达为ePNP应用于肿瘤基因治疗奠定了基础。
李克强
李文林
饶泽昌
赵林
刘东海
唐洪林
石小玉
关键词:
嘌呤核苷磷酸化酶
自杀基因
重组逆转录病毒载体
大肠杆菌
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