国家自然科学基金(30300183)
- 作品数：15 被引量：54H指数：5
- 相关作者：孙亮先郭冬生张巧利黄周英陈朝阳更多>>
- 相关机构：泉州师范学院宜春学院江西农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省博士后创新项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 蜂王浆介导外源基因转移的初步研究被引量：2
- 2008年
- 采用DNA延滞实验研究蜂王浆与DNA的结合能力,然后通过蜂群哺育和人工培育两种方式,对1日龄工蜂幼虫进行短期饲喂,初步研究蜂王浆介导绿色荧光蛋白基因的方法和转移情况。结果表明:在蜂群环境下,蜂王浆中的外源DNA短期内不会完全被分解;但用蜂王浆作媒介并未实现蜜蜂基因转染,蜜蜂能否通过蜂王浆介导实现基因转移,还需进一步探讨。
- 郭冬生孙亮先张巧利
- 关键词：蜂王浆基因转移中华蜜蜂
- 西方蜜蜂表皮蛋白基因apd-like转录起始位点的定位及cDNA序列的分析被引量：5
- 2011年
- Apidermin蛋白家族是根据蜜蜂表皮蛋白apidermin1-3(APD1-3)而命名的一个新型的昆虫结构性表皮蛋白家族。为了鉴定西方蜜蜂Apis mellifera基因组序列上毗邻基因簇apd1-3的一个预测基因座LOC727145是否为一个新的apd基因,本研究在用5′LongSAGE标签定位该基因的转录起始位点(TSS)的基础上,利用其中的3条5′LongSAGE标签序列作为上游引物,通过RT-PCR方法克隆了该基因的cDNA序列(GenBank登录号:GU358197,GU358199,GU358198)。生物信息学分析发现,基因座LOC727145含有2个外显子和1个"GT-AG"型内含子,其cDNA序列富含GC(70%),可编码一条长152aa残基的高度疏水性多肽。此多肽序列的氨基酸组成与蜜蜂APD1-3表皮蛋白类似,富含Ala,Gly,Pro,Leu和Val5种氨基酸(占77%),其中Ala残基含量最高(29%)。该多肽序列与蜜蜂APD-1表皮蛋白序列的相似性为50%,且其N末端的预测信号肽序列与APD蛋白的信号肽序列类似。5′LongSAGE标签的基因组定位结果显示,基因座LOC727145在雄蜂头部中表达丰度很高,RNA PolⅡ可从6个不同的TSS上以不同效率起始转录,其中由一个优势TSS上起始了90%的转录。本研究为apidermin表皮蛋白家族增添了一个新成员,命名为apidermin-like(apd-like)。
- 孙亮先黄周英郑华军游燕琳
- 关键词：西方蜜蜂表皮蛋白
- 四个意大利蜜蜂品系苹果酸脱氢酶Ⅱ基因的遗传差异分析被引量：4
- 2004年
- 研究了意大利蜜蜂(A.m.ligustica)4个王浆、蜂蜜生产性能不同品系—美意(Em)、澳意(Eo)、苏意(Es)和平湖浆蜂(Ep)的MDHⅡ同工酶基因型频率、基因频率及杂合纯合度.试验发现,MDHⅡ的a、b、c三个等位基因在4个品系中出现的频率不同.c在Em、Eo、Es和Ep中的基因频率分别为0.507、0.483、0.680和0.820,为优势等位基因.该结果表明在产浆性能高的品系中c基因频率较高,意味着可将c基因频率作为意蜂王浆产量性能的一个遗传标记.等位基因a在Em、Eo、Es和Ep中频率分别为0.323、0.263、0.193和0.087;在Em中出现的频率最高.而等位基因b在Eo中频率(0.253)高于其他3个品系(Em,0.170; Es,0.127;Ep,0.093).Ep的纯合度最高,达0.753,高于Em(0.533)、Eo(0.633)和Es(0.540).经独立性检验,4个意蜂品系MDHⅡ同工酶的基因型频率、基因频率、纯合度均达到极显著差异水平.
- 孙亮先陈朝阳袁建军谢进金
- 关键词：基因频率
- 一种高质量蜜蜂核酸的快速提取方法被引量：10
- 2005年
- 基因组DNA的提取是蜜蜂分子生物学研究的一项基本而重要的技术.但由于蜜蜂样品具有脂肪、蛋白、几丁质含量很高的特点,所以用常规方法无法获得较高质量的DNA.文章研究对蜜蜂基因组DNA的提取方法作了重要改进,可以从不同发育时期的蜜蜂中快速、大量提取高质量的蜜蜂基因组DNA.此外,对蜜蜂总RNA的提取方法也进行了探索.
- 郭冬生孙亮先张巧利曾志将
- 关键词：蜜蜂总RNA基因组DNA
- 利用5'LongSAGE标签分析蜜蜂肌球蛋白调节性轻链基因MLC-2选择性转录起始位点
- 2010年
- 使用西方蜜蜂雄蜂头部5’LongSAGE文库中的肌球蛋白调节性轻链基因MLC-2的标签序列,在蜜蜂全基因组序列上定位了该基因的转录起始位点(TSS),并进而预测了其启动子的结构。结果显示:蜜蜂MLC-2基因存在17个TSS,其中16个定位于MLC-2基因开放阅读框上游100bp的范围内。MLC-2基因的各TSS的使用效率不同,其中有3个优势TSS,由之起始的转录本分别占该基因总转录本数量的9.76%、54.47%和11.38%。从碱基组成来看,蜜蜂MLC-2基因TSS的第1个碱基为A、G、T、C的概率分别为58.8%、29.4%、0和11.8%。MLC-2基因的启动子结构预测结果表明,在TSS上游的300bp区域内有3个核心启动子元件。研究结果对研究蜜蜂MLC-2基因的表达调控与确定其全长cDNA序列具有重要意义。
- 周沫玲孙亮先陈培山谢宪兵黄周英倪辉
- 关键词：标签西方蜜蜂转录起始位点启动子
- 蜜蜂转基因技术被引量：5
- 2005年
- 简述了建立蜜蜂转基因技术体系的方法和筛选标记.以显微注射法将改造过的pig-gyBac、mariner等转座子转基因载体导入受精卵是蜜蜂转基因工作的最佳候选方案,精子介导法和病毒载体法也值得尝试.增强型荧光蛋白(EGFP)基因是转基因蜜蜂的最佳筛选标记.并对蜜蜂转基因技术体系在基因功能研究和生物反应器的开发等方面的应用前景进行了探讨.
- 张巧利孙亮先郭冬生胥保华
- 关键词：蜜蜂转基因显微注射转座子精子
- 蜜蜂活体电穿孔法导入DNA的新技术被引量：1
- 2008年
- 蜜蜂是一种重要的经济昆虫。同时，蜜蜂也是研究真社会昆虫个体特征分化最典型的模式体系，蜜蜂已成为系统论、行为生态学、神经学和老年化研究的模型。蜜蜂具有世代周期短、繁殖率高、后代个体数多、能大量饲养、易获得大量性状一致、发育同步的群体等优点，是理想的实验动物研究模型。
- 郭冬生黄志祥
- 关键词：蜜蜂电穿孔法DNA活体经济昆虫行为生态学
- 蜜蜂精子介导GFP基因转移研究被引量：4
- 2007年
- 将pGFP-2质粒线性化，利用精子介导，通过人工授精技术导入意大利蜜蜂处女王，然后将授精王介绍到无王群繁殖后代。结果：试验群产生了一群绿色荧光阳性蜜蜂；对阳性蜂群后代分析发现，1-2日龄幼虫能检测到荧光，提取蜜蜂DNA进行PCR扩增得到预想的片断，通过RT-PC分析，从转录水平上证实转导的外源基因获得表达。结论：以绿色荧光蛋白（GFP）基因为报告基因，通过精子介导法能够生产克隆转基因蜜蜂。
- 郭冬生张巧利孙亮先
- 关键词：意大利蜜蜂精子基因转移GFP
- 室内人工培育中华蜜蜂幼虫技术研究被引量：21
- 2009年
- 以中华蜜蜂(Apis cerana cerana,简称中蜂)幼虫为试验材料,研究了不同饲粮配方、饲养模式和培养板对中蜂幼虫发育的影响。得出以下结果:幼虫饲粮LD1和LD3对幼虫的饲喂效果显著优于LD2;比较不同移虫模式下幼虫发育成功率:日转移法为61.1%,不转移法为70.8%;其中,在不转移饲喂模式下,使用新培养板培养的发育成功率(69.8%)显著高于重复利用的培养板培养的发育成功率(39.6%)(P<0.01)。表明室内以LD1或LD3饲喂,采用"不转移法"模式,并使用新培养板,更利于中蜂幼虫的发育。
- 王倩孙亮先肖培新刘锋康明江胥保华
- 关键词：中华蜜蜂幼虫
- 西文蜜蜂LOC724521基因座的cDNA序列克隆及TSS的分析
- 2010年
- 5’LongSAGE标签得自于全长mRNA分子的5’末端的前19 nt.该研究利用定位在西方蜜蜂基因组中的一个预测基因座LOC724521的2条5’LongSAGE标签序列作为5’引物,通过RT-PCR克隆了该预测基因座的2条长335 bp和337 bp的cDNA序列(GenBank登录号:GU358205,GU358204).此cDNA编码一条长88个氨基酸残基的多肽.用所克隆的cDNA序列对基因座LOC724521进行功能注释发现,该基因含有3个外显子和2个"GT-AG"型内含子.5’LongSAGE标签序列的基因组定位结果显示:基因座LOC724521在雄蜂的头部中表达丰度很高,RNA PolⅡ可从5个转录起始位点(TSS)上以不同效率起始转录,该基因的59%和31%的转录是从2个优势TSS上起始.有趣的是,有一条5’LongSAGE标签序列被定位在内含子区,暗示该基因存在外显子的可变性选择现象.该研究结果不仅在转录水平上证实了软件预测的基因座LOC724521确实存在,同时揭示了该基因存在可变性转录起始位点和可变性外显子选择等转录调控机制.
- 孙亮先黄周英郑华军
- 关键词：西方蜜蜂CDNA
