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国家教育部博士点基金(20050610056)

作品数：11 被引量：19H指数：3
相关作者：李为民蒲丹陈文彬唐凤鸣韩娟更多>>
相关机构：四川大学华西医院四川大学宜宾市第一人民医院更多>>
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文献类型

  • 11篇中文期刊文章

领域

  • 11篇医药卫生

主题

  • 6篇HNRNP
  • 5篇肺癌
  • 4篇细胞
  • 3篇蛋白
  • 3篇小干扰RNA
  • 3篇肺癌组织
  • 3篇癌细胞
  • 3篇癌组织
  • 3篇RNA干扰
  • 3篇SIRNA
  • 3篇小干扰
  • 2篇短发夹环RN...
  • 2篇短发夹状RN...
  • 2篇肿瘤
  • 2篇腺癌
  • 2篇基因
  • 2篇核蛋白
  • 2篇核糖
  • 2篇核糖核蛋白
  • 2篇发夹

机构

  • 11篇四川大学华西...
  • 1篇四川大学
  • 1篇宜宾市第一人...

作者

  • 11篇李为民
  • 7篇蒲丹
  • 6篇陈文彬
  • 4篇韩娟
  • 4篇唐凤鸣
  • 2篇王冬梅
  • 2篇陈敏
  • 1篇刘丹
  • 1篇刘伦旭
  • 1篇陶然
  • 1篇陈勃江
  • 1篇蒲蓉
  • 1篇徐炼
  • 1篇陈燕
  • 1篇闻春生
  • 1篇莫显明
  • 1篇邓太兵

传媒

  • 5篇四川大学学报...
  • 2篇中国呼吸与危...
  • 1篇中国肿瘤临床
  • 1篇四川医学
  • 1篇国际呼吸杂志
  • 1篇国际肿瘤学杂...

年份

  • 7篇2008
  • 4篇2006
共 11 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
RNA干扰与肿瘤基因治疗
2006年
RNA干扰(RNAi)是指双链RNA在细胞内特异性诱导同源互补的mRNA降解,从而阻断相应基因表达的现象。随着研究不断取得进展,RNAi作为新型肿瘤基因治疗方法显示着巨大的潜力．
蒲丹李为民
关键词：RNA干扰肿瘤基因疗法
HnPNPB1基因短发夹环RNA载体的构建与鉴定被引量：2
2006年
目的利用RNA干扰(RNA interfering,RNAi)技术,构建HnRNPB1表达载体,并进行鉴定。方法采用H1启动子,分别把被7bP序列间隔的21bp长短的HnRNPB1靶序列的反向重复序列,置于PsiRNA-hH1neoG2质粒中,分别构建HnRNPB1短发夹环RNA(ShRNA),产生重组质粒PSiRNA-hH1neoG2 HnRNPB1。结果将合成的DNA序列退火后克隆到载体上,并作测序分析,经测序鉴定确定为所需序列。结论针对HnRNPB1基因的特异性ShRNA真核表达载体PSiR-NA-hH1neoG2 HnRNPB1的成功构建,为进一步研究其基因功能打下基础。
蒲丹李为民陈敏陈文彬
关键词：RNA干扰短发夹状RNA
hnRNP B1 siRNA对肺癌组织hnRNP B1表达干扰效果的体内研究被引量：2
2008年
目的在体内实验中观察所构建的核内不均一核糖核蛋白B1(hnRNP B1)特异性的siRNA真核细胞表达载体对肺癌组织hnRNP B1表达的干扰作用。方法选取转染本课题组已构建并经体外实验证实有较好干扰效果的两对hnRNP B1特异性的siRNA真核细胞表达载体(重组质粒A和B)的人肺腺癌细胞株A549,将其接种于BALB/Cnu/nu裸鼠右前腋下,构建肺癌动物模型。分别应用RT-PCR和免疫组织化学的方法检测接种40、60d时肿瘤组织中的hnRNP B1 mRNA和蛋白质表达水平。结果hnRNP B1特异性的siRNA真核细胞表达载体在体内表达40d时均能较稳定而明显地抑制肿瘤组织中hnRNP B1 mRNA的表达,免疫组织化学从蛋白表达方面也予以证实,而且重组质粒A和B两组间的表达的差异无统计学意义。但是随着时间的延长(接种60d时),siRNA的干扰效果会逐渐减弱,与未转染A549细胞比较无明显差异。结论hnRNP B1特异性的siRNA在体内可以稳定的表达,并且能特异、高效地抑制肺腺癌细胞A549 hnRNP B1基因的表达,有望成为肺癌基因治疗的合理策略之一。
闻春生李为民蒲丹陈文彬
关键词：肺癌
hnRNP B1 siRNA对肺腺癌细胞A549 p53表达的影响被引量：6
2008年
目的探讨核内不均一核糖核蛋白(hnRNP)B1调节肺腺癌细胞A549抑癌基因p53表达的作用。方法采用前期研究已构建并通过体外实验证实具有较好干扰效果的两对hnRNP B1特异性的小干扰RNA(siRNA)真核细胞表达载体(重组质粒A和D)转染的人肺腺癌细胞株A549作为实验组,对照组为转染空质粒的A549细胞和未转染任何质粒的A549细胞。各组细胞均用10μmol/L顺铂作用24h收集细胞。实时荧光定量RT-PCR检测p53 mRNA的表达,Western blot检测P53及磷酸化P53蛋白表达的变化。结果各组细胞p53 mRNA和蛋白表达量无明显差异,说明hnRNP B1特异性siRNA对A549细胞p53基因mRNA和蛋白表达无影响。转染hnRNP B1 siRNA细胞磷酸化P53蛋白表达率分别为0.87±0.06、0.75±0.06,与空质粒转染组(0.30±0.08)和未转染组(0.21±0.04)相比明显增高(P<0.01)。结论hnRNP B1 siRNA可上调肺腺癌细胞A549 P53活性,参与肺癌的发生发展。
韩娟李为民唐凤鸣蒲丹陈文彬
关键词：肺腺癌小干扰RNA
hnRNP B_1对人肺癌A549细胞DNA-PK活性及细胞周期、凋亡的影响被引量：8
2008年
目的探讨核内不均一核糖核蛋白B1(heterogeneous nuclear ribonucleprotein B1,hnRNP B1)对肺癌细胞抑癌基因DNA依赖蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)的活性、细胞周期和凋亡的影响。方法根据干扰hnRNP B1基因序列的两段不同靶序列构建2个hnRNP B1的siRNA抑制表达质粒A、D,转染人肺癌A549细胞。实验分组为重组质粒A、D转染的A549细胞、空质粒转染的A549细胞、未转染的A549细胞、预先用DNA-PK抑制剂NU7026(10μmol/L)作用1h的重组质粒A、D转染的A549细胞。Western blot检测各组细胞hnRNP B1表达。采用DNA-PK检测试剂盒检测DNA-PKcs激酶活性。以流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果hnRNP B1 siRNA抑制肺癌细胞hnRNP B1表达;转染hnRNP B1 siRNA细胞的DNA-PK活性、凋亡率较未转染组明显增高(P均<0.05);G1期细胞明显增多(P<0.05),S期细胞减少(P<0.05)。预先用NU7026处理的转染hnRNP B1 siRNA细胞组与未处理的转染组比较,其G1期细胞明显降低(P<0.05),S期细胞明显增多(P<0.05),凋亡率明显降低(P<0.05);DNA-PK酶活性和细胞凋亡率成明显的正相关(相关系数r=0.817,P<0.01)。结论hnRNP B1可以使DNA-PK酶活性降低,从而影响细胞基因组的稳定及参与调控肺癌细胞周期与凋亡。
韩娟李为民唐凤鸣蒲丹陈文彬
关键词：DNA依赖蛋白激酶肺癌细胞A549
非小细胞肺癌组织中hnRNP B_1和CD44的联合表达及其与预后的关系被引量：3
2008年
目的研究核内不均一核糖核蛋白B1(hnRNP B1)和CD44在非小细胞肺癌组织中的联合表达及其与预后的关系。方法应用免疫组织化学的方法检测88例非小细胞肺癌组织中hnRNP B1和CD44表达,分析hnRNP B1和CD44的联合表达与肺癌预后的关系。结果非小细胞肺癌组织中hnRNP B1和CD44的高表达率分别为68.18%和52.27%。hnRNP B1高表达且CD44低表达组,平均生存时间最高(59.607±4.092)月;hnRNP B1低表达且CD44高表达组,平均生存时间最低(21.357±3.545)月,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论hnRNP B1与CD44联合检测对判断非小细胞肺癌的预后有一定临床意义。
邓太兵李为民莫显明刘伦旭刘丹蒲蓉陈勃江徐炼
关键词：CD44非小细胞肺癌
hnRNP K在肺腺癌中表达及其作用的研究被引量：4
2008年
目的研究核内不均一核糖核蛋白K（hnRNP K）在肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌细胞生长及凋亡的影响。方法采用SP免疫组织化学方法对经手术切除病理确诊为肺腺癌的70例肺癌组织标本进行hnRNP K蛋白表达的检测,根据不同肿瘤的直径,计算阳性表达率;构建hnRNP K siRNA表达载体,采用Lipofectamine 2000瞬时转染A549细胞24h后,RT-PCR、Western blot检测A549细胞hnRNP K mRNA及其蛋白表达量;以流式细胞仪检测重组质粒hnRNP K siRNA及siRNAn转染A549细胞后细胞周期及凋亡的变化。结果肺腺癌组织中肿瘤直径≤3cm、3～5cm、≥5cm的hnRNP K的阳性表达率分别为38.5%、95.2%、91.7%;hnRNP K siRNA转染24h后的A549细胞hnRNPK mRNA及蛋白表达明显被抑制（P〈0.01）;hnRNP K siRNA能显著抑制A549的生长及细胞周期的分布,G0/G1的细胞数从37.21%增加到85.60%,S和G2/M的细胞数分别从47.71%、13.00%减少到13.50%和0.32%,差异均有统计学意义（P〈0.01）。hnRNP K siRNA能促进A549的凋亡,其凋亡率达到4.79%（P〈0.01）。结论hnRNP K能促进肺腺癌细胞的生长;hnRNP K siRNA可抑制肺腺癌细胞的生长,促进其凋亡。
唐凤鸣李为民陈燕王冬梅韩娟
关键词：肺腺癌SIRNA
HnRNP A2/B1短发夹环RNA重组体的构建与序列分析被引量：1
2006年
目的:利用RNA干扰(RNAinterfering,RNAi)技术构建HnRNPA2/B1重组质粒,并行序列分析。方法:分别将21bP长短的HnRNPA2/B1靶序列,中间为7bP序列间隔的反向重复序列,置入PsiRNA-hH1neoG2质粒中,产生重组质粒PSiRNA-hH1neoG2HnRNPA2/B1。结果:将重组质粒作测序分析,经测序鉴定确定为所需序列。结论:特异性短发夹环RNA(ShRNA)真核表达载体PSiRNA-hH1neoG2HnRNPA2/B1的成功构建,为进一步研究其基因功能奠定基础。
蒲丹李为民陈敏陈文彬董恒磊（校对）
关键词：HNRNPA2/B1短发夹状RNA
hnRNP K siRNA真核表达载体的构建及其在A549肺癌细胞中沉默效应的研究
2008年
目的构建hnRNP K特异性siRNA真核表达载体,体外观察对hnRNP K基因的沉默作用。方法采用基因克隆技术,将合成的特异性hnRNP K RNA干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体pSUPER,构建hnRNP K siRNA真核表达载体。采用Lipofect AMINE2000将pSUPER空载体和3个重组质粒(pSUPER/hnRNP K siRNAa,pSUPER/hnRNP K siRNAc和pSUPER/siRNAn)分别导入A549肺癌细胞(a、c、n分别代表hnRNP K编码序列中的A链和C链,以及无意义的对照序列Non链)。24 h后用RT-PCR和Western blot技术检测各实验组肺癌细胞内hnRNP K mRNA及蛋白水平的表达情况。结果成功构建了hnRNP K siRNA真核表达载体。转染hnRNP K siRNAa、hnRNP K siRNAc的肺癌细胞24 h后hnRNP K mRNA相对表达量分别为0.24±0.53和0.28±0.57,较对照组显著降低(P均<0.01);hnRNP K蛋白灰度值分别为0.23±0.11和0.28±0.09,较对照组显著降低(P均<0.05)。结论构建的RNA干扰真核表达载体能明显干扰A549细胞hnRNP K mRNA及蛋白的表达,为进一步研究hnRNP K基因的功能并应用于肺癌的治疗研究奠定了基础。
唐凤鸣李为民王冬梅韩娟
关键词：小干扰RNA真核表达载体
山葵对肺癌组织hnRNP A_2/B_1表达的影响
2008年
目的通过建立大鼠肺癌模型,研究山葵提取液对肺癌早期分子标志物hnRNP A2/B1的调节作用,进一步阐明山葵抗肺癌作用的分子机制。方法将36只Wistar大鼠随机分为肺癌模型组(对照组)和山葵治疗组(实验组)。按1mL碘油内含3-甲基胆蒽(MCA)50mg配制致癌质碘油。每只大鼠均用MCA碘油溶液0.1mL在左肺叶支气管内灌注诱癌。实验组于诱癌前1周开始胃饲山葵提取液至动物被处死,对照组于同一时间胃饲等量生理盐水。造模后第30、60及90d分批处死大鼠,每次6只。免疫组织化学法和RT-PCR法检测肺癌组织hnRNP A2/B1的蛋白和基因表达。结果山葵提取液能降低肺癌组织hnRNP A2/B1的蛋白表达,在第30、60及90d的抑制率分别为51.0%、51.0%和45.1%。山葵提取液同时降低了hnRNP A2/B1 mRNA的表达,在第60和90d的抑制率分别为79.5%和58.0%。结论山葵提取液能降低肺癌早期分子标志物hnRNP A2/B1的表达,可能是其抗肺癌的分子机制之一。
陶然李为民陈文彬
关键词：山葵肺癌HNRNPA2/B1
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