国家自然科学基金(30600433)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
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- 硫色曲霉β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的组成型分泌表达被引量：4
- 2009年
- 目的:构建硫色曲霉β-甘露聚糖酶的毕赤酵母组成型分泌表达菌株,研究重组菌株的产酶水平。方法:EcoRⅠ/XbaⅠ双酶切质粒pPIC-mann-opt,琼脂糖凝胶电泳、回收目的基因片段后,与组成型毕赤酵母表达载体pGAPzαA连接,转化大肠杆菌,经筛选获得含有pGAP-mann-opt的重组克隆;提取pGAP-mann-opt,用限制性内切酶BspHⅠ线性化后,转化毕赤酵母X-33感受态细胞,进行Zeocin抗性筛选和PCR鉴定。结果:获得了重组菌株,重组菌株在YPD培养基中摇瓶发酵24h,上清液酶活达到343U/mL,产酶蛋白约为1.0mg/mL。结论:构建的硫色曲霉β-甘露聚糖酶组成型表达菌株具有较好的应用前景。
- 李松瑜陈小玲王军军曹云鹤董冰
- 关键词：Β-甘露聚糖酶毕赤酵母组成型表达
