国家自然科学基金(30772731)
- 作品数：10 被引量：59H指数：4
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- 青蒿素与过氧化物酶作用的荧光研究
- 2009年
- 目的:研究青蒿素与过氧化物酶间的作用关系,建立青蒿素荧光检测方法。方法:以吡罗红B为指示剂,用荧光降低法研究青蒿素与辣根过氧化物酶的相互作用。结果:青蒿素与辣根过氧化物酶之间的催化反应米氏常数Km为2.72×10-5mol/L,最大反应速度vmax为1.74×10-4mol/(L·s),催化常数Kcat为24.27s-1。反应作用位点分别是青蒿素内过氧基团与酶中心离子Fe。该反应可用于对黄花蒿药材中青蒿素含量的测定,测定工作曲线为c=0.1684?F-0.8143(cartemisinin单位为1.0×10-7mol/L),相关系数r=0.9965,3σ检出限为3.58×10-8mol/L。结论:青蒿素与辣根过氧化物酶之间的作用具有酶与底物反应的特征,该特征反应可用于对黄花蒿药材中青蒿素含量的测定。
- 张犇邹婷谢洪平王剑文
- 关键词：青蒿素过氧化物酶荧光猝灭
- 内生青霉菌纤维素酶辅助提取槐米总黄酮被引量：4
- 2009年
- 研究内生青霉菌(Penicilliumsp.B-4)胞外纤维素酶在槐米总黄酮提取中的辅助应用。内生青霉菌在起始pH4.5的综合马铃薯培养基中,150 r/min,40℃下摇瓶,培养7 d,具有较高的纤维素酶比活力(3.57 U/mL)。槐米干粉投入青霉菌发酵液中进行酶解处理,比较酶料比、酶解温度、酶解时间和酶解液pH对槐米总黄酮提取率的影响,发现槐米干粉以酶料比40∶1(mL/g)加入粗酶液中,在pH4.5、温度40℃下酶解处理1 h后,黄酮提取率可达12.2%,比常规提取率增加了38.7%。内生菌纤维素酶辅助提取法为槐米黄酮提取的可行新方法。
- 许云峰周建芹陈晶磊王剑文
- 关键词：纤维素酶内生青霉菌总黄酮
- 中国弯颈霉提取物抗氧化和抗肿瘤体外活性研究被引量：8
- 2009年
- 中国弯颈霉(Tolypocladium sinense)分离自冬虫夏草,其生长最适温度25～28℃,最适pH6～7。在液体培养基(葡萄糖4%、蛋白胨0.5%、酵母膏1%、KH2PO40.1%、MgSO40.05%)中,经过28℃下摇床(150r/min)培养4～10d后,菌丝体生物量达8.49～9.73g/L。其菌丝体石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇和蒸馏水提取率分别为3.51%、1.62%、4.84%、23.33%,菌丝体多糖提取率为5.31%。各提取物对DPPH自由基均具有清除作用,2mg/ml多糖具有较强的清除作用,清除率为49.13%;菌丝体多糖(0.08mg/ml)能显著地清除羟自由基,清除率为82.5%。MTT法检测发现乙酸乙酯提取物具有较强的抑制白血病细胞增殖作用;作用于K562和SHI-1细胞2d后,乙酸乙酯提取物IC50分别为26.55、17.75μg/ml;该提取物对正常细胞(人PBMC和小鼠骨髓细胞)的抑制作用较弱;AO/EB双染和TUNEL法检测提示菌丝体的乙酸乙酯提取物可以诱导K562细胞凋亡。上述实验结果表明,中国弯颈霉具有抗氧化和抗肿瘤方面的应用开发前景。
- 高立文张臻周建芹王剑文
- 关键词：抗氧化细胞毒性
- 黄花蒿发根的液体培养及青蒿素合成的动态特征研究被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨黄花蒿发根生长及青蒿素生物合成的动态特征,建立高效、稳定的黄花蒿发根液体培养体系。方法:测定不同培养基以及MS培养基中不同营养元素对黄花蒿发根生物量和青蒿素含量的影响。结果:筛选出优化的黄花蒿发根液体培养基,获得拟合的黄花蒿发根生长和青蒿素合成的Logistic方程。结论:在优化的MS培养基中黄花蒿发根生长迅速且能稳定合成青蒿素,为工业化大规模生产青蒿素提供了可能。
- 邹婷张犇陈韶华陈晶磊王剑文
- 关键词：黄花蒿青蒿素发根培养培养基成分
- 琥珀酰壳聚糖的制备及其与HL-60细胞亲和性的研究被引量：2
- 2009年
- 以粘均相对分子质量700000和17500的高脱乙酰度壳聚糖为原料,通过吡啶催化制备N-琥珀酰壳聚糖(N-SUCC-CTS),通过甲磺酸保护氨基制备O-琥珀酰壳聚糖(O-SUCC-CTS)。应用异硫氰酸荧光素黄(FITC)对合成的2种琥珀酰壳聚糖进行标记,荧光标记率分别为0.97%(O-SUCC-CTS1.75)、0.66%(N-SUCC-CTS1.75)和0.34%(N-SUCC-CTS70)。用流式细胞仪测定琥珀酰壳聚糖与人白血病HL-60细胞的结合能力,亲和性能力顺序为O-SUCC-CTS>N-SUCC-CTS>N-SUCC-CTS。O-SUCC-CTS是一种很有潜力的抗肿瘤靶向载体。
- 欧阳海燕高立文王剑文孙晓飞
- 关键词：壳聚糖琥珀酸酐FITCHL-60细胞细胞亲和性
- 青蒿素检测方法的研究近况被引量：8
- 2008年
- 目的:分析近年来抗疟药物——青蒿素测定方法的研究进展。方法:根据国内外文献资料进行归纳、分析,加以综述。结果:根据青蒿素的理化性质,青蒿素的测定方法已由定性的光谱测定,发展到精确定量的色谱方法。灵敏的电化学和酶联免疫方法也得到发展。结论:准确定量测定青蒿素含量,对于青蒿素生产和药理研究具有重要的意义。
- 张犇邹婷王剑文
- 关键词：黄花蒿青蒿素
- 青蒿素生物合成的研究进展被引量：2
- 2009年
- 青蒿素是上世纪70年代初中国科学家从药用植物黄花蒿(Artemisia annua L.)中分离得到的、含有过氧基团的新型倍半萜内酯抗疟药物。笔者综述了近年来青蒿素生物合成机理的研究进展,从青蒿素的前体如青蒿乙素和青蒿酸到青蒿素的合成,讨论了青蒿素生物合成的基本途径;从参与青蒿素合成的关键酶组成和功能,探讨了合成路线的主要构成,并介绍了青蒿素合成代谢调控的基因工程手段,为青蒿素的生物技术开发提供参考。
- 王剑文邹婷张犇许云峰
- 关键词：青蒿素生物合成途径基因工程
- 黄花蒿发根的生长及部分代谢成分的特征研究被引量：1
- 2011年
- 目的:研究黄花蒿发根的生长形态和部分次生代谢物特征。方法:比较发根和未转化根的形态差异,测定生长调节剂如萘乙酸(NAA)和赤霉素(GA3)对根生长的影响,分析了发根和未转化根的部分次生代谢物的含量特征。结果:低浓度NAA(0.01～0.05 mg.L-1)能明显促进发根侧根和次侧根的形成,对未转化根则无显著作用,高浓度NAA(0.1 mg.L-1)抑制发根的生长,而对未转化根的生长起促进作用。未转化根中不含有青蒿素,而在发根中检测到较高含量的青蒿素(0.64 mg.g-1),未转化根中青蒿乙素含量较高(1.24 mg.g-1)。在未转化根和发根中,青蒿黄酮chrysoplenetin含量相当,而发根中另一种黄酮化合物artemitin含量(0.76 mg.g-1)是未转化根的3.5倍。结论:黄花蒿发根具有较独特的生长和次生代谢特征。
- 邹婷张犇陈晶磊陈韶华王剑文
- 关键词：黄花蒿发根次生代谢物
- 酶法辅助强化中药提取过程研究进展被引量：20
- 2008年
- 利用酶法强化中药提取已成为中药开发的重要手段,酶法提取因其反应特异性强、高效、条件温和、易于控制等优点而具有广阔的应用前景。介绍了应用于中药材提取过程中的酶法辅助技术,归纳了酶法在中药材重要活性成分提取、中药提取液的澄清纯化中的应用,分析了酶法辅助提取对中药活性组成的影响,提出了酶法与超声技术的结合应用方法。
- 王剑文许云峰周建芹陈晶磊
- 关键词：中药材酶法
- 内生镰刀菌漆酶辅助提取槐米中总黄酮的研究被引量：14
- 2008年
- 目的研究内生真菌胞外漆酶在槐米总黄酮提取中的应用。方法内生镰刀菌在起始pH7.0的综合马铃薯培养基中,20℃下摇瓶培养6d,具有较高的漆酶活力(36.1U/mL)。槐米干粉投入真菌发酵液中进行酶解处理,比较酶料比、酶解温度、酶解时间和酶解液pH值对槐米总黄酮提取率的影响。结果槐米干粉以酶料比40∶1加入粗酶液中,在pH7.0、20℃下酶解处理1h后,总黄酮提取率可达11.4%,比常规提取法提高了28.7%。结论内生菌漆酶辅助提取法为槐米总黄酮提取的可行新方法。
- 许云峰张臻周建芹陈晶磊王剑文
- 关键词：槐米漆酶总黄酮
