食品科学与技术国家重点实验室自由探索课题(201113)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：段学辉张倩段超沈江涛郑希帆更多>>
- 相关机构：南昌大学更多>>
- 发文基金：食品科学与技术国家重点实验室自由探索课题更多>>
- 相关领域：理学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 重组酿酒酵母合成谷胱甘肽的研究被引量：2
- 2013年
- 利用PCR方法以酿酒酵母Saccharomyces cerevisiaeS288c基因组DNA为模板,PCR扩增γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSH1)及谷胱甘肽合成酶(GSH2)基因,以乙醇脱氢酶(ADH1)启动子进行表达,并以Kanr基因和Hygr基因作为筛选标记,构建了两个重组表达质粒YEplace181AK-GSH1和YEplace181AH-GSH2。采用电击法将这两个质粒分别和同时转入工业酿酒酵母菌株Saccharomyces cerevisiaeTS013,在含有G418或(和)Hygromycin的平板上筛选阳性克隆S.TS013/GSH1、S.TS013/GSH2和S.TS013/GSH1+GSH2。重组菌进行摇瓶发酵,采用四氧嘧啶法测定培养细胞合成谷胱甘肽含量。结果显示,不同转化子重组菌的胞内谷胱甘肽产量比宿主菌分别提高了44.11%、29.79%和56.47%。
- 陈加利吴量王娟段学辉
- 关键词：Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶谷胱甘肽合成酶谷胱甘肽酿酒酵母
- 透性化处理对酵母细胞谷胱甘肽分泌能力的影响被引量：2
- 2016年
- 酵母细胞一般具有谷胱甘肽(GSH)的合成能力和储存稳定性。为了考察和促进酵母细胞的GSH分泌能力,实验研究了低p H胁迫、冻融、细胞干燥、渗透压冲击和有机溶剂等透性化处理对酵母细胞膜通透性的影响。结果显示:冻融法对酵母GSH的胞外分泌作用效果不明显;低p H胁迫、细胞干燥、渗透压冲击和有机溶剂处理都能一定程度地改变酵母细胞膜通透性,促使GSH分泌到细胞外,其中低p H胁迫和渗透压效果不稳定,有机溶剂处理效果最好。在细胞酶催化前体氨基酸合成GSH的反应液中加入8%(v/v)的丙酮,酶催化合成48 h,GSH总产量达到551 mg/L,比对照组提高了51%,表明合适的透性化处理能够促进酵母细胞内GSH的胞外分泌和积累。
- 牛书操段超张倩段学辉
- 关键词：酵母细胞膜通透性谷胱甘肽分泌酶催化
- 分光光度法结合抗干扰补偿检测谷胱甘肽被引量：6
- 2015年
- 分光光度法应用于酶法合成谷胱甘肽（GSH）的跟踪检测时,前体半胱氨酸（Cys）中的巯基对GSH的分析结果会产生显著干扰。该文通过多组干扰实验,统计建立了干扰模型和补偿算法,实现了不分离干扰物质即可定量检测GSH。通过干扰分析,引入干扰系数和补偿系数,利用干扰系数、干扰倍数、补偿系数之间的关系建立抗干扰机制。检测样品320 nm处的吸光度和导数,代入标准流程,即可判断干扰倍数和补偿系数,从而计算GSH及Cys含量。结果显示：四氧嘧啶补偿法的GSH浓度-吸光度标准方程为y=3.062 9x＋0.000 1,r2=0.999 9。当Cys浓度为GSH浓度的4倍以下时,GSH的回收率为95%～100%,Cys的回收率为78%～120%。相比四氧嘧啶法,四氧嘧啶补偿法显著增强了分析检测的抗干扰特性,达到快速跟踪检测GSH含量并依据干扰倍数半定量检测Cys的目的。
- 郑希帆沈江涛段超牛书操张倩段学辉
- 关键词：分光光度法
