国家自然科学基金(30971963)
- 作品数：6 被引量：12H指数：3
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- 亚洲玉米螟幼虫应对大肠杆菌注射的血淋巴免疫应激反应被引量：3
- 2011年
- 为研究大肠杆菌Escherichia coli侵染引发亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis Guenée幼虫免疫应激反应的机理,本实验测定了分别注射生理盐水以及3×103,3×104,3×105和3×106个细胞/mL大肠杆菌后亚洲玉米螟5龄幼虫血淋巴中血细胞总数(THC)、颗粒细胞和浆血细胞数量,血清中酚氧化酶(PO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的活性,通过流式细胞仪分析了血细胞活性氧自由基(ROS)水平的动态变化。结果表明:与对照组相比,注射3×105和3×106个细胞/mL大肠杆菌细胞后12h,可引起亚洲玉米螟5龄幼虫THC及浆血细胞、颗粒细胞数量明显上升(P<0.01),同时应激产生大量ROS。3×104,3×105和3×106个细胞/mL大肠杆菌3个不同浓度处理组均引起幼虫体内PO活性显著升高(P<0.01),诱导幼虫血清中GSH-px,GST及GR的活性上升(P<0.01)。这些结果表明,亚洲玉米螟幼虫受到大肠杆菌侵染后,其血淋巴细胞免疫和体液免疫能力受到显著影响,可诱导血清中GSH-px,GST和GR活性升高以清除过多的ROS,防止其毒害。
- 冯从经董秋安翟会峰陈根宝杨俊明苗俊玲
- 关键词：亚洲玉米螟大肠杆菌酚氧化酶
- 亚洲玉米螟幼虫体内抗菌肽的诱导
- 2009年
- 外源物侵染可引起亚洲玉米螟幼虫产生免疫应激反应,并诱导产生抗菌肽。为深入研究抗菌肽作用机制,作者给亚洲玉米螟5龄幼虫注射大肠杆菌,诱导其产生抗菌肽,并分析该抗菌肽的部分性质。结果表明:亚洲玉米螟幼虫注射3.0×106个/mL大肠杆菌后可诱导其体内产生一种相对分子量为12.1kD的抗菌肽,在12～36h内该抗菌肽的诱导表达量与时间成正比。此抗菌肽对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有一定的抑制作用,100℃高温处理5min后具有明显的抑菌活性,pH为8.0时抑菌活性最强,抑菌圈直径达6.9±0.3mm,且具有一定的温度稳定性和酸碱稳定性。
- 冯从经董秋安郭晓丽桑守亮陈飞
- 关键词：亚洲玉米螟抗菌肽抑菌活性稳定性
- 亚洲玉米螟幼虫体内保幼激素二醇激酶cDNA片段克隆与序列分析被引量：1
- 2011年
- 为研究亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)幼虫体内保幼激素二醇激酶(JHDK)表达调控的分子机理,根据不同昆虫保幼激素二醇激酶基因序列的保守区域,设计合成简并引物,采用RT-PCR技术从亚洲玉米螟5龄幼虫中扩增出一段cDNA片段,大小为189bp,编码63个氨基酸,预测分子量为6.78ku,理论等电点pI值为4.57。该基因序列中含有保守的GTP结合蛋白特征指纹基序∑3和∑1。BlastP分析结果表明:该片段氨基酸序列与烟草天蛾JHDK氨基酸序列的一致性最高,为69%;与家蚕和小菜蛾JHDK氨基酸序列的一致性分别为55%和52%。构建系统发育树分析了3种鳞翅目昆虫JHDK进化关系,结果显示:亚洲玉米螟cDNA片段氨基酸序列与家蚕JHDK的亲缘关系最近,与小菜蛾JHDK的亲缘关系最远。半定量PCR结果表明:JHDK基因在中肠中表达量最高,随着5龄幼虫的发育,JHDK基因在血细胞、脂肪体和体壁组织中表达量有下降趋势,但在中肠组织中表达量明显增强。
- 冯从经翟会峰
- 关键词：亚洲玉米螟基因克隆
- 斜纹夜蛾畸形蛹蛋白质的双向电泳分析
- 2013年
- 为探索斜纹夜蛾蛹畸形发育的生理机制,在室内将斜纹夜蛾幼虫饲养至蛹期,测定了斜纹夜蛾蛹的生物学参数,并采用双向电泳技术对蛹整体可溶蛋白质进行分析。结果表明:畸形蛹率达(18.8±1.2)%,其畸形蛹的发育历期明显短于正常蛹,为(9.5±0.7)d(P<0.01)。畸形蛹中雌蛹和雄蛹的体重也明显小于正常蛹(P<0.01)。在正常蛹中共检测到约147个蛋白质点,主要集中在分子量1.1×104至7.6×104、等电点3.23至9.80之间。在畸形蛹中共检测到149个蛋白质点,主要集中在分子量1.0×104至7.7×104、等电点3.61至9.61之间。在正常蛹中有45个特异表达蛋白质点,畸形蛹中有47个特异表达蛋白质点。
- 苗俊玲杨俊明张兵郭晓丽吴桃燕赵同伟冯从经
- 关键词：斜纹夜蛾双向电泳
- 亚洲玉米螟幼虫体内储存蛋白cDNA片段克隆与序列分析被引量：3
- 2010年
- 为研究亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guen e)幼虫体内储存蛋白(SP)表达调控的分子机制,根据不同昆虫储存蛋白基因序列的保守区域,设计合成简并引物,采用RT-PCR技术从亚洲玉米螟5龄幼虫中扩增出一段cDNA片段,大小为892bp,编码297个氨基酸,预测分子量为35.7kD,理论等电点pI值为8.73。该基因序列中含有保守的幼虫储存蛋白(LSP)两个特征基序YFTEDIDLNTYYYYFHVDYP和TALRDPVFC。Blast P分析结果表明:该片段推导的氨基酸序列与斜纹夜蛾Spodoptera litura适量甲硫氨酸SP-1的一致性最高,为77%;与小菜蛾Plutella xylostella富含甲硫氨酸SP-1和SP-2、印度谷螟Plodia interpunctellaSP、美国白蛾Hyphantria cuneaSP-2和粉茎螟Sesamia nonagrioides适量甲硫氨酸SP氨基酸序列的一致性分别为74%、74%、72%、71%和65%。构建系统发育树分析了9种鳞翅目昆虫储存蛋白进化关系,结果显示:亚洲玉米螟cDNA片段氨基酸序列与小菜蛾富含甲硫氨酸SP-1的亲缘关系最近,与粉茎螟适量甲硫氨酸SP亲缘关系最远。
- 冯从经桑守亮翟会峰
- 关键词：亚洲玉米螟基因克隆
- 亚洲玉米螟幼虫体内酚氧化酶原激活蛋白酶cDNA片段的克隆与序列分析被引量：5
- 2010年
- 为研究亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)幼虫体内酚氧化酶原激活蛋白酶(prophenoloxidase activating proteinase,PAP)表达调控的分子机理,本研究根据不同昆虫酚氧化酶原激活蛋白酶基因序列的保守区域,设计合成简并引物,采用RT-PCR技术从亚洲玉米螟5龄幼虫中扩增出PAP的一段cDNA片段,大小为509bp,编码169个氨基酸,预测分子量为18.7kD,理论等电点(pI值)为5.1。该基因序列中含有丝氨酸蛋白酶样结构域中保守的催化三联体,不含发夹结构域。BlastP分析结果表明:该片段的氨基酸序列与烟草天蛾Manduca sextaPAP-3和冈比亚按蚊Anopheles gambiae发夹型蛋白B1的氨基酸序列一致性最高,为47%;与烟草天蛾PAP-2、家蚕BombyxmoriPPAE、斜纹夜蛾Spodoptera lituraPPAE-3、蓖麻蚕Samia cynthia riciniPAP和黑腹果蝇Drosophila melanogaster丝氨酸蛋白酶7的氨基酸序列的一致性分别为45%,45%,44%,43%和41%。构建系统发育树,对其进化关系进行了初步分析,结果显示:亚洲玉米螟PAP与烟草天蛾PAP-3和斜纹夜蛾PPAE-3的亲缘关系较近,与黑腹果蝇丝氨酸蛋白酶7和冈比亚按蚊发夹型蛋白B1的亲缘关系较远。这些结果说明克隆得到的cDNA片段为亚洲玉米螟幼虫PAP基因靠近羧基端的部分序列。
- 冯从经郭晓丽翟会峰
- 关键词：亚洲玉米螟基因克隆亲缘关系
