国家自然科学基金(30571617)
- 作品数：11 被引量：20H指数：3
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- 低碘膳食对大鼠脑组织同源盒基因nkx2．1表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究低碘膳食对大鼠脑组织同源盒基因nkx2．1表达的影响。方法雌性Wistar大鼠40只，按体质量随机分为低碘组和对照组，均饲以含碘量为13．66ug／kg的低碘饲料，分别饮用去离子水和200ug／L碘酸钾溶液，3个月后用化学发光免疫分析方法测定大鼠血清甲状腺激素（TT3、TT4、FT3、FT4），再将两组大鼠与健康雄鼠进行交配，在孕16d、新生及20日龄时，取胎鼠或仔鼠脑组织，用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）法检测脑组织nkx2．1 mRNA表达。结果大鼠血清TT3、TT4、FT3、FT4水平，低碘组[（0．89±0．20）、（0．32±0．16）nmol／L、（3．33±0．61）、（3．28±0．80）pmol／L]明显低于对照组[（1．04±0．06）、（39．42±14．68）nmol／L、（4．83±0.33）、（26．99±4．48）pmol／L；t值分别为2．71、6．52、5．70、12．89，P〈0．05或〈0．01]。对照组孕16d、新生及20日龄大鼠脑组织nkx2．1 mRNA表达分别为（5．60±0．30）×10^-3、（1．20±0．29）×10^-3、（0．18±0．06）×10^-3，低碘组同日龄大鼠nkx2．1 mRNA表达分别为（3．00±0．55）×10^-3、（1．90±0．21）×10^-3、（0．69±0．15）×10^-3。对照组、低碘组各日龄胎、仔鼠之间nkx2．1 mRNA表达水平比较，差异有统计学意义（F值分别为2102．07、162．40，P均〈0．01），对照组、低碘组新生仔鼠nkx2．1 mRNA的表达比孕16d胎鼠低（P均〈0．01），20日龄仔鼠nkx2．1 mRNA表达比孕16d和新生降低（P均〈0．01）；低碘组与同日龄对照组比较，对照组孕16d胎鼠nkx2．1 mRNA表达明显高于低碘组胎鼠（t=16．073，P〈0．01），而新生及20日低碘组明显高于对照组（t值分别为7．537、12．227．P均〈0．01）。结论低碘导致的脑发育迟滞与nkx2．1在脑组织中的差异表达密切相关。
- 赵秀娟张瑞戈海泽舒剑波郭刚
- 关键词：碘缺乏症基因同源盒基因表达
- 双启动子shRNA表达载体对hTERT和bcl-2基因表达的抑制作用被引量：1
- 2012年
- 目的:研究双启动子shRNA表达载体对人端粒酶蛋白催化亚单位(hTERT)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)基因表达的抑制作用。方法:分别从构建好的大肠杆菌DH5α菌体中提取含有双启动子shRNA的表达载体pdPRO-TB、单启动子对照pdPRO-T、pdPRO-B和阴性对照质粒pdPRO,通过脂质体介导瞬时转染Hela细胞,倒置显微镜下观察细胞形态。实时荧光定量RCR检测hTERT和bcl-2基因的表达水平。结果:4种菌体中均提取出5 000 bp左右的质粒,分别转染Hela细胞48 h后,可见转染pdPRO的Hela细胞形态无明显变化,转染pdPRO-T和pdPRO-B的Hela细胞有部分悬浮,转染pdPRO-TB的Hela细胞有大量悬浮。各载体质粒构建均成功,各目的基因相对管家基因的含量:T(hTERT)=39.8%,B(hTERT)=107.9%,TB(hTERT)=32.1%;T(bcl-2)=91.4%,B(bcl-2)=35.4%,TB(bcl-2)=31.4%。结论:双启动子shRNA表达载体构建成功,可同时抑制hTERT和bcl-2基因的表达。
- 张金晓张瑞汪蓓蕾郭刚
- 甲状腺素对甲状腺功能减低大鼠子代脑组织中同源盒基因Nkx6．1 mRNA表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的通过对妊娠期甲状腺功能减低（简称甲低）大鼠补充甲状腺素，探讨妊娠不同时间补充不同剂量甲状腺素对子代大鼠脑组织中同源盒基因Nkx6．1 mRNA表达的影响。方法1月龄Wistar大鼠240只，雌雄各半，体质量100—120g。按体质量将雌性大鼠随机分为8组：对照组，甲低组，甲低孕鼠妊娠早期（1～17d）补充甲状腺素（妊早甲低）高、中、低剂量组，甲低孕鼠妊娠晚期（18～20d）补充甲状腺素（妊晚甲低）高、中、低剂量组，每组15只。高、中、低剂量组每天补充的甲状腺素分别为3．5、2．0、0．5μg／100g体质量。8组大鼠均饲以重度缺碘地区粮食配制的饲料，对照组饮用含碘200μg／L的碘酸钾溶液，7个甲低组饮用去离子水。雄性大鼠用正常食料饲养，3个月后按1：1交配。8组大鼠分别取孕17d、新生、生后20d子代大鼠脑组织，采用实时荧光定量PCR法检测脑组织中Nkx6．1 mRNA表达。结果①成功建立了甲低动物模型，8组大鼠血清TT3、TT4、FT3、FT4组间比较差异有统计学意义（F值分别为4．08、31．99、5．79、26．34，P均〈0．01）。②在孕17d、新生、生后20d，Nkx6．1 mRNA表达组间比较差异有统计学意义（F值分别为758．720、1121．589、144．716，P均〈0．01）；组内不同时间比较差异有统计学意义（F值分别为2898．863、325．605、716．285、56．329、236．727、196．678、7115．752、9152．306，P均〈0．01）。③时间因素和剂量因素对Nkx6．1 mRNA表达有影响（F值分别为1176．655、246．530，P均〈0．01）；时间与剂量因素间存在交互作用（F=1249．934，P〈0．01）。④在孕17d、新生、生后20d，甲低组Nkx6．1 mRNA表达与对照组比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）。⑤在新生、生后20d，6个甲低补充甲状腺素组Nkx6．1 mRNA表达与甲低组比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）。⑥在孕17d、
- 娜仁张瑞汪蓓蕾李敬华李媛梁东春郭刚
- 关键词：甲状腺功能减退症同源盒基因甲状腺素
- 甲状腺素对甲状腺功能减低大鼠子代脑组织中同源盒基因Nkx2．2表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的：探讨妊娠不同时期补充不同剂量甲状腺素对甲状腺功能减低子代大鼠脑组织中同源盒基因Nkx2.2表达的影响。方法：选取1月龄Wistar大鼠240只,雌雄各半。将雌性大鼠随机分为对照组,甲状腺功能减低（甲低）组,甲低孕鼠妊娠117d（妊早期甲低）补充甲状腺素高、中、低剂量组,甲低孕鼠妊娠1820d（妊晚期甲低）补充甲状腺素高、中、低剂量组共8组。各组均饲以低碘饲料,高、中、低剂量组每100g体质量每天分别补充甲状腺素3.5、2.0、0.5μg。对照组饮用碘酸钾溶液,总碘摄入量相当于大鼠生理碘需要量,其余7组饮用去离子水。3个月后与正常雄性大鼠交配。分别于孕17d、新生当天及生后20d,取8组子代大鼠的间脑组织,采用实时荧光定量PCR法检测脑组织中Nkx2.2mRNA的表达量。结果：在孕17d,甲低组的Nkx2.2mRNA表达水平低于对照组,其他6组均高于对照组;在新生当天和生后20d,除孕晚期甲低补充甲状腺素中剂量组外,其他各组的Nkx2.2mRNA表达水平均低于对照组;在生后20d孕早期甲低补充甲状腺素低、中、高剂量组的Nkx2.2mRNA表达水平与甲低组比较差别无统计学意义（P〉0.05）。结论：甲低孕鼠子代大鼠脑组织同源盒基因Nkx2.2的表达受补充甲状腺素剂量及孕期的影响。
- 赵金超张瑞汪蓓蕾郭刚
- 关键词：甲状腺素WISTAR
- 甲状腺素对甲状腺功能减低大鼠子代海马突触素表达的影响
- 2012年
- 目的：探讨不同剂量甲状腺素对甲状腺功能减低孕鼠子代海马突触素表达的影响。方法：选取断乳1个月的Wistar大鼠160只，雌雄各半。将雌性大鼠随机分为正常组，甲低对照组，甲低孕鼠妊娠1-17d（妊早期甲低）补充甲状腺素高、中、低剂量组，甲低孕鼠妊娠18-20d（妊晚期甲低）补充甲状腺素高、中、低剂量组共8组，每组10只。各组均饲以低碘饲料，对照组饮用碘酸钾溶液，总碘摄入量相当于大鼠生理碘需要量，其余7组饮用去离子水。3个月后与正常雄性大鼠交配。高、中、低剂量组每100g体质量每天分别补充甲状腺素3．5、2．0、0．5μg。分别于新生当天、生后7、14、21及28d，取8组子代大鼠的右侧大脑半球，应用免疫组织化学SABC法及图像分析技术检测海马突触素的表达。结果：正常组的突触素表达水平均高于同时期甲低对照组（P〈0．01）。在新生当天，妊晚期甲低中剂量组与甲低对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05），妊早、晚期甲低低剂量组突触素表达水平均低于甲低对照组（P〈0．01）；妊早期甲低中、高剂量组，妊晚期甲低高剂量组突触素表达水平均高于甲低对照组（P〈0．01）。生后7、14、21及28d，妊早、晚期甲低低剂量组与甲低对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05），其他各组的突触素表达水平均高于甲低对照组（P〈0．01）。结论：孕鼠甲低导致子代大鼠海马突触素表达下降，甲低孕鼠子代大鼠海马突触素的表达受补充甲状腺素剂量及孕期的影响。
- 孙亚婷汪蓓蕾杨丽娜张瑞郭刚
- 关键词：甲状腺素海马突触蛋白类
- 化学药物诱导的大鼠急性肾损伤模型中肾损伤分子-1表达的研究被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨由顺铂、庆大霉素、环孢素诱导的急性肾损伤(AKI)对大鼠肾组织内肾损伤分子-1(Kim-l)表达水平的影响。方法:将36只SD雄性大鼠随机分6组,并建立庆大霉素、顺铂、环孢素诱导大鼠AKI模型组及各对照组,每组6只。运用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测肾Kim-1基因表达水平,Westernblot法检测肾脏Kim-1蛋白表达水平,分析肾Kim-1表达水平与AKI的相关性。结果:病理学检查发现顺铂、庆大霉素和环孢素对大鼠肾脏造成不同程度的肾小管损伤,所建AKI模型成功。各模型组与其对照组比较,肾Kim-lmRNA水平均升高(P<0.05或P<0.01);肾Kim-l蛋白在各阴性对照组内呈阴性结果,而在顺铂、庆大和环孢素AKI模型组内均呈阳性表达。结论:化学药物诱导AKI发生时,肾Kim-1基因转录和蛋白表达水平与肾损伤直接相关,为以尿Kim-1作为预测早期肾损伤的生物标志物提供可靠依据。
- 汪蓓蕾张瑞刘妍张金晓郭刚
- 关键词：膜糖蛋白类肾疾病庆大霉素类疾病模型聚合酶链反应
- 低碘膳食对大鼠脑组织同源盒基因Nkx-6．1和Nkx-6．2 mRNA表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的研究低碘膳食对大鼠脑组织同源盒基因Nkx-6．1、Nkx-6．2 mRNA表达的影响，探讨低碘导致脑发育迟滞的可能分子作用机制。方法20只雌性Wistar大鼠按体质量随机分为2组：低碘组和对照组，均饲以低碘饲料（含碘量为13．66μg／kg），分别饮用去离子水和含碘200μg／L的碘酸钾溶液，3个月时采用化学发光免疫分析法检测大鼠血清甲状腺激素水平，然后将雌鼠与正常饲养的Wistar雄鼠进行交配，分别取孕16d、新生期及生后20日龄仔鼠脑组织，采用实时荧光定量PCR检测Nkx-6．1、Nkx-6．2 mRNA的表达。结果①低碘组大鼠血清TT3、TT4、FT3、FT4水平[（0．89±0．20）、（0．32±0．16）nmol／L，（3．33±0．61）、（3．28±0．80）pmol／L]均明显低于对照组[（1．04±0．06）、（39．42±14．68）nmol/L，（4．83±0．33）、（26．99±4．48）pmol，t=2．71、6．52、5．70、12．89，P〈0．05或〈0．01]。②对照组孕16d、新生期及20日龄仔鼠脑组织Nkx-6．1 mRNA表达水平分别为（1．90±0．23）×10^-3、（1．86±0．40）×10^-4、（1．11±0．27）×10^-4，各日龄间比较差异有统计学意义（F=827．58．P〈0．01），随着日龄增加Nkx-6．1mRNA表达水平明显下降．两两比较差异均有统计学意义（P均〈0．01）；低碘组各日龄仔鼠脑组织Nkx-6．1mRNA表达水平分别为（1．16±0．16）×10^-3、（3．44±0．49）×10^-4、（3．58±0．64）×10^-4，差异有统计学意义（F=297．25，P〈0．01），但变化趋势与对照组不同，孕16d表达水平最高，与新生期及20日龄比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；低碘组与对照组比较，孕16d明显降低（t=10．14，P〈0．01），而新生期及20日龄则明显增高（t值分别为9．69、13．81，P均〈0．01）。③对照组和低碘组各日龄仔鼠脑组织Nkx-6．2 mRNA表达水平分别为（1．03±0．19）×10^-2、（1．33±0.10）×10^-3、（8�
- 张瑞戈海泽赵秀娟李媛郭刚
- 关键词：聚合酶链反应
- 低碘膳食对大鼠脑组织中同源盒基因NKX-2.2表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨低碘膳食对大鼠脑组织同源盒基因Nkx-2.2表达的影响,揭示低碘导致脑发育迟滞的可能分子作用机制。方法:雌性Wistar大鼠随机分为2组:低碘组和正常对照组,均饲以低碘饲料,分别饮用去离子水和碘酸钾溶液,3个月后分别取材于孕16天、新生及20日鼠龄低碘及正常仔鼠,实时荧光定量PCR检测其脑组织中Nkx-2.2 mRNA含量。结果:低碘组血清甲状腺激素水平明显低于对照组(P<0.05或P<0.01),建立缺碘Wistar大鼠动物模型。低碘及正常各年龄组的表达水平随着年龄增加表达趋势不一致,但均有明显差别(F=573.68、120.82,P<0.01)。各年龄组低碘及正常大鼠比较,孕16天正常鼠Nkx-2.2表达水平明显高于低碘鼠(t=6.86,P<0.01),而新生及20日龄低碘鼠Nkx-2.2表达水平明显高于正常鼠(t=15.85、10.61,P<0.01)。结论:同源盒基因Nkx-2.2表达差异与低碘导致脑发育迟滞密切相关。
- 张瑞戈海泽赵秀娟李媛郭刚
- 关键词：低碘同源盒基因实时荧光定量PCR脑发育
- 白细胞介素-6对肝细胞载脂蛋白M表达的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:研究白细胞介素(IL)-6对人肝母细胞瘤细胞(HepG2)载脂蛋白(apo)M表达的影响及两者在糖尿病病程中的作用。方法:体外培养HepG2细胞,分别以不同浓度的IL-6干预细胞24h,提取细胞总RNA,应用逆转录聚合酶链反应(PCR),琼脂糖凝胶电泳和实时荧光定量PCR检测apoM的表达,并同时检测另一种载脂蛋白apoA-I的表达。用同样的干预方式,检测IL-1α对apoM表达的影响。结果:IL-6(1.25、2.5、5、10、20、40、80μg/L)对HepG2细胞apoM的表达具有抑制作用,与对照组(0μg/L)比较差异有统计学意义(F=10.778,P<0.01),但是IL-6的干预对apoA-I表达水平的影响差异无统计学意义(F=2.004,P>0.05),IL-1α(1.25、2.5、5、10、20、40、80μg/L)对apoM表达的影响差异亦无统计学意义(F=2.038,P>0.05)。结论:IL-6能够抑制HepG2细胞apoM的表达,这可能是2型糖尿病患者脂代谢异常以及大血管并发症的发病机制之一。
- 历丽郭刚汤云昭孙富军李代清
- 关键词：载脂蛋白类白细胞介素6肝细胞聚合酶链反应
- 甲状腺功能减低孕鼠补充甲状腺素对子代脑组织同源盒基因Nkx2．1mRNA表达的影响被引量：4
- 2010年
- 目的通过对妊娠期甲状腺功能减低（甲低）大鼠补充左旋甲状腺素（L-thyroxine，L-T4），探讨甲状腺素对子代鼠脑组织同源盒基因Nkx2．1 mRNA表达影响，探讨该基因的表达与甲状腺素水平之间的关系。方法Wistar雌性大鼠120只，按体重分层随机分为对照组、甲低非治疗组，甲低孕鼠妊娠早期（妊娠第1—17天）补充L—T4高、中、低剂量组，甲低孕鼠妊娠晚期（妊娠第18天至分娩后第20天）补充L．T4高、中、低剂量组，共8组，每组15只；补充L—T4高、中、低剂量分别为：3．5、2．0,0．5μg/100g体重。各组均给予低碘饮食，对照组饮用碘浓度为200μg／L碘酸钾溶液，其余7组饮用去离子水。3个月后各组均与正常雄性大鼠交配，确定受孕后各甲低给药组于不同时期给予补充L-T4。各组分别取孕第17天胎鼠、新生及出生后第20天龄仔鼠前脑组织，实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测Nkx2．1mRNA水平。结果甲低孕鼠妊娠早期补充L-T4高、中、低剂量组，甲低孕鼠妊娠晚期补充L—T4高、中、低剂量组，甲低非治疗组、对照组大鼠血清TT3，分别为（0．85±0．17）、（0．81±0．18）、（0．86±0．21）、（0．85±0．20）、（0．89±0．18）、（0．85±0．20）、（0．86±0．20）、（1．08±0．07）nmol／L（F：4．08，P〈0．01）；TT4分别为（0．43±0．16）、（0．39±0．11）、（0．39±0．13）、（0．43±0．17）、（0．51±0．19）、（0．43±0．16）、（0．41±0．15）、（39．43±14．16）nmol／L（F=31．99，P〈0．01）；FT3分别为（3．29±0．61）、（3．29±0．61）、（3．24±0．61）、（3．28±0．63）、（3．31±0．59）、（3．28±0．50）、（3．24±0．49）、（4．93±0．46）pmol／L（F：5．79，P〈0．01）；FT4分另0为（3．38±0．80）、（3．31±0．67）、（3．29±0．73）、（3．27±0．71）、（3．48±0．81）、（3．56±0�
- 李敬华张瑞汪蓓蕾娜仁李媛赵秀娟梁东春郭刚
- 关键词：甲状腺功能减退症基因同源盒甲状腺素
