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雌二醇和孕酮诱导猪子宫内膜上皮细胞OPN的表达状况被引量：1: 2008年; 目的探讨雌二醇和孕酮对猪子宫内膜上皮细胞内的骨桥蛋白基因作用效果。方法采用RT-PCR和Western-blot的方法,检测了猪子宫内膜上皮细胞中OPN基因的表达情况;采用半定量RT-PCR法检测添加终浓度为1μmol/L、0.1μmol/L、0.01μmol/L雌二醇和0.1μmol/L、0.01μmol/L、0.001μmol/L孕酮作用24 h和48 h后,OPNmRNA的表达变化情况。结果猪子宫内膜上皮细胞在非孕期转录OPN mRNA,表达70×10^3和45×10^3的OPN蛋白;添加雌二醇24 h后,OPN mRNA的表达水平降低了50%-53%（P〈0.05）,48 h后降低了12%-25%（P〈0.01）,均显著低于对照组;添加孕酮后,OPN mRNA的表达无显著变化（P〉0.05）。结论雌二醇抑制了OPN的表达,推测孕酮本身对OPN的表达不起作用。; 张冬杰刘娣杨国伟孙丽华; 关键词：子宫内膜上皮细胞骨桥蛋白雌二醇孕酮逆转录聚合酶链反应

维生素A诱导猪成纤维细胞内视黄酸受体α基因的表达变化研究: 2009年; 采用半定量RT-PCR技术检测分析了在体外培养的猪成纤维细胞内分别添加终浓度为0.5、5、10、30μg/μL的维生素A后,分别作用12h、24h和48h后,视黄酸受体α基因(RARα)的表达变化情况。结果表明,RARα基因的表达在12h时最高(P<0.05),而后开始下降,到48h时与阴性对照组的表达水平一致。; 张冬杰; 关键词：成纤维细胞

维生素C对视黄醇结合蛋白基因作用的初探: 2009年; 采用半定量RT-PCR方法研究了在体外培养的猪成纤维细胞内,添加0.5,5,10,30μg/μL浓度的维生素C后,分别作用12、24、48和72h后,视黄醇结合蛋白基因(RBP4)的表达变化情况。结果表明:维生素C可显著抑制RBP4基因的表达。; 张冬杰; 关键词：成纤维细胞维生素C

维生素A诱导成纤维细胞内视黄酸受体γ基因的表达变化研究: 2009年; 采用半定量RT-PCR技术检测分析了在体外培养的猪成纤维细胞内分别添加终浓度为0.5,5,10,30μg/μL的维生素A后,分别作用12,24,48和72 h后,视黄酸受体γ基因(RARγ)的表达变化情况。结果表明,不同浓度组间差异不显著,但是分别作用24和72 h后,会出现抑制RARγ基因表达的现象。; 张冬杰刘娣; 关键词：成纤维细胞 RT-PCR

猪GPX5,FUT1和PRLR基因的遗传多态性及遗传效应分析被引量：2: 2010年; 为了分析谷胱甘肽过氧化物酶5基因(Glutathion Peroxidase 5,GPX5),岩藻糖转移酶1基因(α1-Fucosytransferase,FUT1)和催乳素受体基因(Prolactin receptor,PRLR)在野猪与大白猪杂交的F1代群体中的遗传多态性及遗传效应。采用PCR-RFLP方法检测了GPX5,FUT1和PRLR基因的多态性,分析其对初生重(LiB)和30日龄体重(Li30)的遗传效应。结果表明,除了PRLR基因外,其余2个基因的基因频率与大白猪已有研究结果基本一致;PRLR基因的AA型个体在Li30上比AB和BB型个体可显著增重1.42～1.47 kg(P<0.05);GPX5和FUT1基因对这2个性状的效应均不显著。结果提示,野猪血统的引入没有显著改变现有猪群的遗传基础,PRLR基因可在生产中考虑应用。; 张冬杰刘娣杨国伟杨国伟何鑫淼富相奎; 关键词：PRLR

大白猪骨桥蛋白基因的克隆、表达及功能分析被引量：2: 2009年; 应用RT-PCR方法克隆了全长909 bp的大白猪Osteopontin(OPN)基因。运用生物信息学工具进行的分析显示:OPN蛋白一级结构中天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸所占比例最高,含有特异的Arg-Gly-Asp序列(RGD),二级结构中α螺旋占很大比例,并且亲水性较强,OPN信号标签位于第一个同源区,共有的保守性序列为[KQ]-x-[TA]-x(2)-[GA]-S-S-E-E-K。基于蛋白序列所构建的2个分子进化树均表明猪与牛的亲缘关系最近,而与鸡最远。在mRNA水平上,OPN基因在猪体各组织中广泛表达,胃、肾、肺、小肠和卵巢相对较高,而心、脾和大肠则相对较低;在蛋白水平上,不同组织内该蛋白的大小不同,出现了70 ku,70和45 ku,70、45和24 ku 3种蛋白。; 张冬杰刘娣汪晓鸿杨国伟; 关键词：大白猪生物信息学反转录PCR

血清视黄醇结合蛋白和维生素A浓度与1月龄仔猪体重关系的研究被引量：1: 2009年; 采用ELISA法和HPLC法检测了56头1月龄仔猪血清中视黄醇结合蛋白(RBP)和维生素的含量,并用SASV6.12软件对所获得数据进行了统计分析。结果表明:RBP和维生素的含量在不同体重组间无差异(P>0.05),而在不同窝间存在差异(P<0.05);血清中RBP和维生素的含量存在显著正相关(P<0.01);维生素的含量与1月龄仔猪体重存在显著正相关(P<0.01)。可以考虑将RBP的检测结果作为一个评价仔猪营养状况的指标。; 张冬杰王文涛杨国伟刘娣; 关键词：视黄醇结合蛋白维生素A

猪视黄醇结合蛋白在毕赤酵母中的表达及检测被引量：2: 2009年; 采用RT-PCR技术从猪的肝脏中扩增到RBP基因,将其与巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαC重组构建了重组表达载体pPICZαC-RBP,测序正确后将其用SacⅠ内切酶线性化后采用电穿孔法转化巴斯德毕赤酵母菌GS115,经ZeocinTM抗性筛选高拷贝重组菌株后用甲醇诱导表达,Western Blot分析结果表明,诱导表达的培养上清液中表达出具有生物活性的RBP重组蛋白。; 张冬杰谷溪杨国伟刘娣; 关键词：毕赤酵母真核表达

维生素C对视黄酸受体γ基因作用的初探被引量：1: 2009年; 采用半定量RT-PCR方法研究在体外培养的猪成纤维细胞内添加不同浓度维生素C后视黄酸受体γ基因(RARγ)的表达变化情况。结果表明:维生素C可显著抑制RARγ基因的表达,但是不同浓度组间差异不显著。; 张冬杰; 关键词：成纤维细胞维生素C RT-PCR

大白猪SLA-DR基因的表达规律研究: 2008年; 研究采用半定量RT-PCR方法,对大白猪的SLA-DRA和SLA-DRB基因在1,90,180,270,360天的表达情况做了研究。结果表明:SLA-DRA、SLA-DRB基因在大白猪1,90,180,270,360天的心脏、肝脏、胃、脾脏、肾脏、肺脏、大肠、小肠、肌肉、子宫、卵巢共11个组织中均有表达,但SLA-DRB的表达量基本恒定而SLA-DRA表达量变化较大,两者都是在1天时表达量最低,90天时表达量最高,并且均是在免疫系统和消化系统持续高表达,比如脾脏、大肠和小肠等。; 张冬杰杨国伟刘娣; 关键词：大白猪 SLA-DRB 表达量

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