国家自然科学基金(30271312)
- 作品数：5 被引量：31H指数：4
- 相关作者：刘勇吴志宏邱贵兴沈建雄王以朋更多>>
- 相关机构：北京协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 青少年特发性脊柱侧凸脊柱关节突骨组织差异基因表达的研究被引量：3
- 2006年
- 目的构建青少年特发性脊柱侧凸脊柱小关节突骨组织抑制消减 cDNA 文库,以研究特发性脊柱侧凸的基因表达变化。方法取特发性脊柱侧凸患者顶椎凸凹侧下关节突骨组织提取mRNA,经反转录后,利用抑制消减杂交(SSH)方法,通过两轮杂交和两次抑制 PCR 构建了两种组织间差异表达基因的 cDNA 消减文库。筛选差异表达基因并测序,将结果与核酸数据库进行同源性比较。并进一步收集11例特发性脊柱侧凸患者的顶椎和上下端椎凸凹侧下关节突,采用免疫组织化学方法和原位杂交方法对发现的差异表达基因进行验证,将所得的免疫组化和原位杂交图像输入图像分析系统,进行半定量分析。结果对600个克隆测序结果初步分析,并从蛋白水平和基因水平进行检验,获得2个表达差异明显的基因:微球蛋白基因(β 2M)和钙结合蛋白基因(calgranulin A,S100A8)。结论应用消减杂交的方法,经适当地改进,在去除相同遗传背景的条件下,可以建立较特异的特发性脊柱侧凸脊柱小关节突骨组织 cDNA 消减文库,该文库可进一步批量筛选与特发性脊柱侧凸的发生和发展相关的基因群,并克隆特发性脊柱侧凸相关表达基因,研究其与特发性脊柱侧凸发生的分子机理与生物学特性间的关系。差异表达的基因可能与青少年脊柱侧凸呈密切相关。
- 邱贵兴
- 关键词：脊柱侧凸基因表达椎关节突关节
- 脊柱侧凸关节突中Ⅰ、Ⅱ型胶原和转化生长因子β_1表达的研究被引量：17
- 2005年
- 目的观察脊柱侧凸患者关节突中Ⅰ、Ⅱ型胶原和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的特点。方法收集9例特发性脊柱侧凸(IS)患者和10例先天性脊柱侧凸(CS)患者的顶椎、上下端椎凸凹侧下关节突,采用苏木素-伊红(HE)染色方法和免疫组化方法染色,免疫组化染色结果采用图像分析系统处理。结果IS、CS顶椎凹侧关节突中Ⅰ型胶原的表达均高于凸侧,分别为193±64对151±45和199±86对179±78(P<0.05),顶椎高于端椎,IS下端椎凹侧高于凸侧,而CS顶椎凸侧高于IS。CS下端椎凹侧的Ⅱ型胶原表达高于凸侧,IS和CS顶椎高于端椎。IS及CS顶椎凹侧TGF-β1的表达高于凸侧,分别为145±43对112±50和120±61对89±32(P<0.05),IS下端椎凹侧高于凸侧;IS顶椎、上端椎、下端椎三组凹侧中顶椎最高,IS顶椎凸侧高于上端椎,CS顶椎凹侧高于端椎;IS顶椎高于CS。结论脊柱侧凸患者顶椎关节突关节软骨呈现退变征象,Ⅰ、Ⅱ型胶原和TGF-β1在IS、CS凹侧关节突中的表达增高和顶椎的表达增高,异常压应力可能起着非常重要的作用。
- 邱贵兴郭盛杰刘勇钱文伟吴志宏
- 关键词：脊柱侧凸转化生长因子Β先天性脊柱侧凸下关节突免疫组化方法
- Ⅱ型胶原、转化生长因子β1和碱性成纤维细胞生长因子在脊柱侧凸患者关节突软骨中分布及表达的实验研究被引量：4
- 2006年
- 目的研究青少年特发性脊柱侧凸(AIS)和先天性脊柱侧凸(CS)畸形最严重部位一顶椎凸、凹侧下关节突软骨中Ⅱ型胶原、转化生长因子β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达特点。方法 22例 AIS 患者,18例 CS 患者作为研究对象。取两组患者的顶椎和端椎凸、凹侧的下关节突,采用苏木素—伊红(HE)染色、免疫组化和原位杂交方法观察关节突的病理改变和Ⅱ型胶原、TGF-β1及 bFGF 在关节突中分布的特点。将所得的免疫组化和原位杂交图像输入图像分析系统,进行半定量分析,并作统计学分析。结果Ⅱ型胶原、TGF-β1、bFGF 在 AIS 和 CS 中的有基本相似的表达特点,免疫组化和原位杂交方法均显示顶椎凹侧的表达高于凸侧,差异有统计学意义(P<0.05);上下端椎的凸凹侧之间及凸凹侧的上下端椎之间的表达差异无统计学意义,顶椎、上下端椎各对应部位在 AIS 与 CS 之间的表达差异无统计学意义;Ⅱ型胶原在凸侧与凹侧顶椎的表达高于同侧上、下端椎,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AIS 和 CS 顶椎关节突软骨呈现退变及发育不全等征象,凹侧较凸侧明显。AIS 和 CS 中Ⅱ型胶原、TGF-β1及 bFGF 在顶椎凹侧表达的增高可能为脊柱畸形后异常的生物力学引起了关节突细胞间基质重建而进行代偿的结果。压应力可引起TGF-β1及 bFGF 的表达增高;压应力和张应力均可以引起Ⅱ型胶原的表达增高,但顶椎凹侧压应力比凸侧张应力的影响更大。
- 邱贵兴李其一刘勇吴志宏仉建国王以朋翁习生沈建雄王亭
- 关键词：脊柱侧凸转化生长因子Β成纤维细胞生长因子
- 青少年特发性脊柱侧凸患者关节突软骨中转化生长因子-β_1及碱性成纤维细胞生长因子表达的研究被引量：4
- 2006年
- 目的研究青少年特发性脊柱侧凸(AIS)畸形最严重顶椎凸、凹侧下关节突软骨中转化生长因子-β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达特点。方法22例AIS患者为研究对象,18例先天性脊柱侧凸(CS)患者作为对照。取两组患者的顶椎和端椎凸、凹侧的下关节突,采用HE染色、免疫组化和原位杂交方法进行研究,观察关节突的病理改变和TGF-β1、bFGF在关节突中分布的特点。将所得的免疫组化和原位杂交图像输入图像分析系统,进行半定量分析。结果TGF-β1、bFGF在AIS和CS中有基本相似的表达特点,免疫组化和原位杂交方法均显示顶椎凹侧的表达高于凸侧(165.4±59.2vs128.1±50.6,168.3±46.8vs126.5±47.0;96.4±28.4vs76.6±29.9,101.8±39.4vs73.7±31.6;114.4±59.4vs77.1±52.2,109.8±51.0vs69.5±40.1;137·2±50·2vs93·4±72·2,138·4±75·8vs80·0±67·6;P<0.05);上、下端椎的凸凹侧之间及凸、凹侧的上下端椎之间的表达差异无统计学意义。结论AIS顶椎关节突软骨呈现退变及发育不全等征象,凹侧较凸侧明显。AIS中TGF-β1、bFGF在顶椎凹侧表达的增高可能为脊柱畸形后异常的生物力学引起了关节突细胞间基质重建而进行代偿的结果,异常压应力可能起着非常重要的作用。
- 邱贵兴李其一刘勇吴志宏仉建国王以朋翁习生沈建雄钱文伟王亭
- 关键词：脊柱侧凸关节突转化生长因子Β
- 钙调蛋白在青少年特发性脊柱侧凸患者关节突骨组织中的表达被引量：5
- 2006年
- 目的研究青少年特发性脊柱侧凸(MS)患者关节突骨质中钙调蛋白表达的差异。方法研究对象分为AIS组和先天性脊柱侧凸(CS)组,收集MS组上端椎和顶椎以及CS组融合范围内上端椎的凸凹侧下关节突。使用免疫组化及原位杂交在蛋白质和mRNA两个水平观察钙调蛋白的表达。使用Image-Pro Plus 5．1真彩色病理图像分析系统进行图像分析,对面密度结果进行统计学分析。结果钙调蛋白在关节突的骨细胞中表达,蛋白质和mRNA两个水平的表达一致:在凸凹侧关节突之间没有显著差异,顶椎同端椎之间没有显著差异(免疫组化结果分别是0．001 898和0．001 454,原位杂交结果分别是0．002 034和0．001 767),MS组明显低于CS组(免疫组化结果分别是0．001 454和0．005 346,原位杂交结果分别是0．001 767和0．007 621)(P<0．05)。结论钙调蛋白在AIS患者关节突骨质中的表达异常提示它可能通过直接调控骨质的代谢生长而影响AIS的发生发展。
- 邱贵兴李婧刘勇吴志宏赵振国
- 关键词：脊柱侧凸椎关节突关节钙调蛋白
