国家自然科学基金(30971938)
- 作品数：10 被引量：39H指数：5
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- 高雅红李明福王进忠张永江李桂芬刘梅
- 关键词：李痘病毒
- 文献传递
- 斑蝥素对草地贪夜蛾卵巢细胞凋亡基因PP2A表达的影响
- 2014年
- 用实时荧光定量PCR技术对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda卵巢组织细胞蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)基因表达进行分析以研究斑蝥素对其表达的影响。结果表明,PP2A相对表达量与斑蝥素浓度存在不显著的负相关性,斑蝥素各浓度下PP2A相对表达量差异都不显著(P<0.05),处理24h后对照的极显著高于用斑蝥素处理的(P<0.01)。在相同斑蝥素浓度下,除25μg/mL外其他浓度处理24 h后PP2A相对定量显著高于6 h的(P<0.05)。研究结果说明,斑蝥素处理对卵巢细胞内的PP2A基因相对表达量有一定的影响,且与斑蝥素的浓度和处理时间有一定关系。
- 张民照杜艳丽郝少东覃晓春王进忠张志勇
- 关键词：斑蝥素蛋白磷酸酶2A荧光定量PCR
- 苦参碱对小菜蛾幼虫毒力测定及其对害虫体内2种酶活性的影响被引量：13
- 2010年
- 采用生物测定和酶活力测定方法,研究苦参碱对小菜蛾Plutella xylostella L.的胃毒活性及其对幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响。试验结果表明:苦参碱对小菜蛾幼虫具有一定的胃毒作用。2 mg/mL苦参碱处理叶片饲喂小菜蛾幼虫12 h校正死亡率为37.93%,72 h后小菜蛾幼虫的校正死亡率为95.83%。不同质量浓度苦参碱处理小菜蛾幼虫后,幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活力与对照相比均产生波动。经125×10-3mg/mL苦参碱处理4 h,小菜蛾体内GSTs活力最高,为1 610.72 U/(mg.min)。经125×10-3mg/mL苦参碱处理16 h,小菜蛾体内的AChE酶活力最高,为10.63 U/(mg.min)。各处理24 h,小菜蛾体内GSTs活力和AChE酶活力均有明显降低。说明苦参碱对小菜蛾幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶活力和乙酰胆碱酯酶活力有一定的影响。
- 孟琳琳王进忠孙淑玲张志勇张民照张鹏飞丁佳蒲媛媛
- 关键词：苦参碱小菜蛾谷胱甘肽-S-转移酶乙酰胆碱酯酶
- 斑蝥素诱导草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)卵巢细胞系Sf9凋亡的临界条件被引量：9
- 2011年
- 为进一步利用昆虫细胞研究斑蝥素对鳞翅目昆虫的毒杀机理,采用细胞形态学观察法和DNA凝胶电泳法研究斑蝥素诱导草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)卵巢细胞系Sf9细胞凋亡的临界条件。结果表明:供试细胞凋亡率与斑蝥素处理剂量、时间呈现密切相关性;在较低剂量处理下,可观察到细胞凋亡。当斑蝥素质量浓度达到6.25μg/mL,处理细胞3 h或3.125μg/mL处理细胞12 h时,斑蝥素处理Sf9导致细胞出现明显畸形、形成凋亡小体等凋亡症状。DNA Ladder条件要求严格,在冰浴条件下,当斑蝥素处理质量浓度达到6.25μg/mL处理细胞24 h时,或者12.5μg/mL处理细胞12 h时,可观察到明显的DNA梯度条带。
- 张来喜杨宝东张民照王进忠张爱环张志勇
- 关键词：斑蝥素凋亡
- 斑蝥素对草地贪夜蛾Sf9细胞膜完整性和膜电位的影响被引量：7
- 2013年
- 为明确斑蝥素对昆虫细胞膜的作用及其机理,本研究利用草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda的卵巢细胞系Sf9细胞作为实验材料,采用透射电子显微技术(transmission electron microscope,TEM)、激光共聚焦显微镜(laserscanning confocal microscope,LSCM)结合荧光探针FDA/PI及DiBAC4(3)技术研究斑蝥素(cantharidin,CTD)对Sf9细胞膜完整性及膜电位(membrane potential,MP)的影响。结果表明:32μmol/L CTD处理6h和12h后,电镜观察均未发现细胞膜结构破损;FDA/PI染色后,32μmol/L CTD处理0.5h后细胞FDA荧光强度比对照显著降低(P<0.05),碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色的细胞比例与对照无显著性差异(P≥0.05)。32μmol/L CTD处理140s后即引起MP发生显著性去极化(P<0.05);64μmol/L CTD处理瞬时MP发生显著性去极化(P<0.05);32μmol/L CTD处理3h内及64μmol/L CTD处理2h内MP仍保持显著性去极化(P<0.05),之后去极化程度降低;32μmol/L CTD处理6h及64μmol/L CTD处理3h时MP去极化与对照组相比已无显著性差异(P≥0.05)。结果说明,CTD处理短时间内可引起Sf9细胞膜电位去极化并维持一段时间,同时导致细胞活性发生不可逆下降,但未对细胞膜结构完整性产生破坏。
- 汪丽张来喜张志勇杨宝东王进忠张爱环张民照
- 关键词：斑蝥素SF9细胞膜电位去极化
- 蛇床子素对小菜蛾幼虫的胃毒作用及对虫体内两种酶活性的影响被引量：4
- 2010年
- 采用生物测定和酶活力测定方法,研究了蛇床子素对敏感品系小菜蛾Plutella xylostellaL.的胃毒作用及其对小菜蛾幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响。结果表明:蛇床子素对小菜蛾幼虫具有一定的胃毒作用。2 mg/mL的蛇床子素处理萝卜苗叶片后饲喂小菜蛾幼虫12 h校正死亡率为37%,72 h时后小菜蛾幼虫的校正死亡率为93%。处理24 h时,LC50为1 521.25 mg/mL,处理48 h时,LC50为865.93 mg/mL。处理72 h时,LC50为515.5 mg/mL。不同浓度蛇床子素和不同时间处理小菜蛾幼虫后,幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活力均产生了消长变化。经125×10-3mg/mL蛇床子素处理16 h时,小菜蛾体内的GSTs活力最高为209.15 U.mg-1prot.min-1。经125×10-3mg/mL蛇床子素处理4 h时,小菜蛾体内的AchE酶活力最高,为0.648 1 U.mg-1prot.min-1。各处理在24 h时,小菜蛾体内的GSTs活力和AchE酶活力均有明显的降低。说明蛇床子素对小菜蛾幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活力重要的影响。
- 孟琳琳王进忠张志勇孙淑玲张民照张鹏飞丁宝力蒲媛媛
- 关键词：蛇床子素小菜蛾毒力测定谷胱甘肽-S-转移酶乙酰胆碱酯酶
- 苦参碱对小菜蛾幼虫γ-氨基丁酸受体基因表达的影响被引量：1
- 2011年
- 采用实时荧光定量RT-PCR法,分别于4、8、12、16、20和24 h时,检测了不同浓度苦参碱对小菜蛾幼虫体内γ-GABA受体基因的相对表达量。结果表明,在处理4 h时,以为15.625×10-3mg/mL的苦参碱处理小菜蛾,其γ-GABA受体基因的表达量达到最大值,为23.62,在20 h时,γ-GABA受体基因的表达量达到最小值,为11.456。在4、8、12、16和20 h时,125×10-3mg/mL的苦参碱处理小菜蛾幼虫的γ-GABA受体基因的表达量均低于其他的处理,在24 h时,同样浓度处理小菜蛾,其γ-GABA受体基因的表达量高于其他处理,差异显著,在16 h时,同样的浓度处理小菜蛾幼虫γ-GABA受体基因的表达量低于其他处理,达到最小值,为4.345。由此说明苦参碱抑制了小菜蛾体内γ-GABA受体基因的表达。
- 丁宝力孟琳琳王进忠张志勇张民照张鹏飞丁佳蒲媛媛
- 关键词：苦参碱小菜蛾基因表达
- 苦参碱对小菜蛾γ-氨基丁酸受体基因表达的影响作用
- 苦参碱（matrine）是从豆科植物苦参（Sophora flavescens Ait）、苦豆子（Sophoraalopecuroides L）及广豆根（Sophora subprostrata Chun et Chen...
- 郝少东丁宝力孟琳琳王进忠张志勇张民照张鹏飞
- 关键词：苦参碱小菜蛾Γ-氨基丁酸受体荧光定量PCR基因表达
- 文献传递
- 线粒体DNA标记在昆虫学研究中的应用进展被引量：3
- 2011年
- 综述了昆虫线粒体DNA(mtDNA)的特点、mtDNA标记优缺点及该标记在昆虫学研究中的应用。目前应用mtDNA作分子遗传标记主要用来进行昆虫分类单元的鉴定、物种或种群的系统发育、遗传多样性、基因流、起源及杂交带的研究,但由于mtDNA标记的缺点,因此常需与其他标记技术结合使用才能获得更可靠的结果。
- 张民照杜艳丽张爱环王进忠覃晓春孙淑玲张志勇
- 关键词：MTDNA分子遗传标记昆虫学
- 斑蝥素与去甲斑蝥素对昆虫细胞Sf9抑制作用比较被引量：6
- 2012年
- 为探索斑蝥素的类似物去甲斑蝥素对昆虫的毒杀机理,本研究利用草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda卵巢细胞系Sf9细胞作为实验材料,采用CCK-8法和AO/EB荧光染色法比较了斑蝥素(CTD)和去甲斑蝥素(NCTD)对细胞的增殖抑制和抑制方式。结果显示,3.125μg/mL的CTD处理细胞抑制率6h为20.00±1.10%,24h为66.33±0.81%;50μg/mL的CTD处理细胞抑制率6h为42.69±6.34%,24h为74.60±1.51%。3.125μg/mL的NCTD处理细胞抑制率6h为10.03±1.72%,24h为21.75±6.22%;50μg/mL的NCTD处理细胞抑制率6h为40.79±1.32%,24h为66.08±3.32%。结果表明,CTD与NCTD均能有效抑制Sf9细胞增殖和诱导细胞凋亡,且抑制率呈现出时间、剂量依赖性,较高剂量NCTD可以替代CTD达到相同效果。
- 周晗颖杨宝东张民照王进忠张爱环张志勇
- 关键词：斑蝥素去甲斑蝥素增殖抑制细胞凋亡
