国家自然科学基金(30772781)
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
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- 相关机构：南京医科大学江苏省人民医院更多>>
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- 银杏叶提取物EGB761对D-半乳糖诱导的心肌细胞老化的保护作用被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨银杏叶提取物EGB761对D-半乳糖诱导的心肌细胞老化的影响及其可能机制。方法:用5 g/L D-半乳糖处理培养心肌细胞建立衰老模型,并以不同浓度EGB761(5、10、20μg/mL)分别干预48 h。以β-半乳糖苷酶染色判断细胞衰老,ELISA法检测心肌细胞晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)的含量。显微镜下观察心肌细胞的形态和搏动情况。结果:与正常对照组相比,D-半乳糖诱导的心肌细胞内β-半乳糖苷酶染色阳性率显著提高(75.6%±4.9%vs 17.2%±2.9%,P<0.01);细胞内AGEs含量明显增高[(703±32)vs(93±26)pg/mL,P<0.01];同时出现细胞形态学和搏动的异常。与D-半乳糖组比较,不同浓度(5、10、20μg/mL)EGB761干预组β-半乳糖苷酶染色阳性率显著下降(各组分别为57.7%±7.9%、49.7%±9.2%、34.0%±6.6%,P<0.01),同时AGEs含量显著降低[分别为(404±33)、(357±25)、(249±77)pg/mL,P<0.01],心肌细胞的搏动明显增加。结论:EGB761可通过抑制心肌细胞的非酶糖基化,预防D-半乳糖诱导的心肌细胞老化。
- 郭长青郭妍陈相健王德国刘静
- 关键词：银杏叶提取物EGB761晚期糖基化终产物心肌细胞Β-半乳糖苷酶
- 银杏叶提取物对D-半乳糖诱导心肌细胞老化的肌浆网钙摄取及SERCA活性的影响被引量：5
- 2011年
- 目的探讨银杏叶提取物EGB761对D-半乳糖诱导的心肌细胞老化肌浆网钙摄取能力及肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA)活性的影响。方法实验分正常对照组(C组)、D-半乳糖组(5 g/L)(A组)、D-半乳糖+EGB761组(B组)。用荧光钙离子指示剂Fura-2/AM,激光共聚焦显微镜(LSCM)测定心肌细胞肌浆网钙摄取能力及改良的p-NPP法测定SERCA活性。结果与C组相比,A组心肌细胞舒张期钙离子浓度明显升高(0.71±0.08 vs.0.59±0.06)(P<0.05);舒张期钙离子回摄时间明显延长[(1000.95±129.34)ms vs.(775.15±121.68)ms](P<0.05);咖啡因刺激后,钙离子增幅明显减少(0.11±0.02 vs.0.53±0.19)(P<0.05),细胞内SERCA活性明显降低。与A组相比,B组舒张期钙离子浓度明显降低,舒张期钙离子回摄时间明显缩短;咖啡因刺激后,钙离子瞬变增幅明显增高,细胞内SERCA活性明显提高。结论银杏叶提取物EGB761对D-半乳糖诱导老化的心肌细胞肌浆网钙摄取功能和SERCA活性有一定程度的提高。
- 刘静郭妍陈相健
- 关键词：银杏叶提取物钙
- D-半乳糖诱导心肌细胞非酶糖基化对钙调节蛋白的影响被引量：1
- 2010年
- 目的研究D-半乳糖诱导衰老的心肌细胞中的非酶糖基化反应,及其对心肌细胞内钙调节蛋白水平的影响。方法实验用5g/LD-半乳糖干预培养心肌细胞建立衰老模型。显微镜下观察心肌细胞的形态和搏动情况。以β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老,ELISA法检测心肌细胞晚期糖基化终产物(AGEs)的含量,采用western blot检测肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA,心脏主要是SERCA2a)及受磷蛋白(PLN)的含量。结果 D-半乳糖诱导的心肌细胞内β-半乳糖苷酶染色阳性率显著高于正常对照组[(75.6±4.9)%和(17.15±2.9)%,P<0.01)];细胞内AGEs较正常对照组明显增高[(702.58±32.16)pg/ml和(93.22±26.14)pg/ml,P<0.01];SER-CA2a含量明显下降与正常对照组比值为0.39±0.05(P<0.01);PLN含量明显下降与正常对照组比值为0.27±0.03(P<0.01);同时伴有心肌细胞形态和搏动的异常。结论 D-半乳糖可通过心肌细胞的非酶糖基化诱导的心肌细胞老化,同时降低心肌细胞内的SERCA2a、PLN蛋白含量,影响心肌细胞的舒缩活动。
- 郭长青郭妍陈相健
- 关键词：晚期糖基化终产物心肌老化受磷蛋白
- OX40/OX40L逆向信号对小鼠主动脉内皮细胞MMP-9表达及机制的研究被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨OX40配体(OX40 ligand,OX40L)逆向通路激活对培养的小鼠主动脉内皮细胞基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)表达及活性的作用。方法:分离与培养8～10周龄C57BL/6J小鼠主动脉内皮细胞,传代至第2代,用可溶性OX40(sOX40)、OX40L单克隆抗体(anti-OX40L)和钙离子螯合剂bapta-AM刺激内皮细胞,RT-PCR和Western blot方法检测内皮细胞MMP-9的mRNA和蛋白表达水平,明胶酶谱法检测内皮细胞培养上清MMP-9活性,应用钙离子成像方法观察内皮细胞胞浆游离钙离子浓度([Ca2+]i)的改变。结果:与对照组相比,可溶性OX40(0.1 mg/L)刺激后内皮细胞MMP-9的mRNA及蛋白表达水平均显著增高,内皮细胞培养上清MMP-9活性明显增高,内皮细胞胞浆[Ca2+]i也明显增高。分别应用可溶性OX40L单克隆抗体(0.1 mg/L)和Bapta-AM(20μmol/L)预处理培养内皮细胞后,由可溶性OX40引起的内皮细胞基因和蛋白表达水平明显降低,内皮细胞培养上清MMP-9活性明显下降。结论:内皮细胞OX40L逆向信号的激活可以通过调节胞内的游离钙离子水平参与内皮细胞中MMP-9表达的调控,这可能是OX40/OX40L逆向信号通路参与动脉粥样硬化的发生、发展的机制之一。
- 张丹丹夏文龙刘强张大伟徐晋妉吴恒芳陈相健杨笛
- 关键词：OX40配体基质金属蛋白酶-9内皮细胞
