国家自然科学基金(30600454)
- 作品数：5 被引量：26H指数：4
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- 相关机构：福建农林大学广东省昆虫研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家现代蜂产业技术体系建设专项福建省自然科学基金更多>>
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- 蜜蜂球囊菌在蜜蜂体内的生长涉及多种胞外酶对蜜蜂幼虫组织的降解作用
- 蜜蜂球囊菌是蜜蜂白垩病的病原真菌。一般病原真菌对宿主昆虫的侵染都涉及到胞外酶的作用,胞外酶是重要的致病因子。体外实验表明蜜蜂的球囊菌也可以分泌胞外酶,但在蜜蜂体内是否涉及到胞外酶的作用则没有工作涉及。这里我们采取正常健康...
- 李江红郑志阳
- 关键词：蜜蜂球囊菌胞外酶血淋巴活性染色
- 文献传递
- 蜜蜂球囊菌分泌多种胞外酶侵染蜜蜂幼虫被引量：13
- 2011年
- 对健康和患病蜜蜂幼虫血淋巴进行SDS-PAGE电泳和蛋白酶、酯酶的活性染色,以研究蜜蜂球囊菌分泌的胞外酶种类及对蜜蜂侵染的作用.结果表明:健康蜜蜂幼虫血淋巴中的蛋白含量丰富,主要由4种高分子质量的蛋白组成,而患病幼虫血淋巴中的蛋白含量很少,主要蛋白组分被降解;在患病幼虫血淋巴中可以检测到健康幼虫所没有的多种蛋白酶和酯酶的活性.可见,蜜蜂球囊菌在侵染蜜蜂幼虫的过程中涉及到胞外酶的作用,这些胞外酶参与降解蜜蜂的组织,为蜜蜂球囊菌的生长提供营养.
- 郑志阳李江红梁勤陈大福
- 关键词：蜜蜂球囊菌侵染胞外酶血淋巴活性染色
- 蜜蜂对接种球囊菌孢子幼虫清除行为的研究被引量：4
- 2010年
- 为研究不同白垩病抗性蜜蜂蜂群对接种蜜蜂球囊菌孢子幼虫的清除行为。利用微量移液器对未患白垩病的意大利蜜蜂、患白垩病的意大利蜜蜂以及从未报道患病的中华蜜蜂的二日龄幼虫接种蜜蜂球囊菌孢子的水溶液,观察计算患病与否蜂群对接种幼虫的清除能力的差异。结果显示,未患病的意大利蜜蜂和中华蜜蜂对接种蜜蜂幼虫分别有65%和60%的清除率,而患病意大利蜜蜂则只有约22%的清除率。抗性蜂群对接种幼虫的清除主要发生在接种后的2～3天内和化蛹后,而患病蜂群在幼虫期则基本没有清除,只在蛹期有少量的清除。该结果说明,对染病幼虫的及时清除行为是蜜蜂抗白垩病的重要机制。
- 李江红王海庄建斌郑志阳梁勤
- 关键词：蜜蜂孢子接种卫生行为
- 蜜蜂患白垩病虫体内一株球囊菌拮抗细菌的分离与鉴定被引量：5
- 2012年
- 【目的】寻找抑制蜜蜂球囊菌的拮抗菌,用于白垩病的生物防治。【方法】利用细菌纯化技术从患白垩病的蜜蜂幼虫体内分离纯化了一株对蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)有抑制作用的细菌,并结合形态学、革兰氏染色以及16S rDNA序列分析技术进行鉴定,同时通过蜜蜂体内、体外接种试验研究其对蜜蜂球囊菌的抑制作用。【结果】该细菌被初步鉴定为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus),它在培养基中能够完全抑制蜜蜂球囊菌的生长,但其发酵液对蜜蜂球囊菌的生长没有影响。将含菌饲料喂蜜蜂幼虫,蜜蜂幼虫的死亡率和生长发育没有受到影响,说明该细菌对蜜蜂幼虫没有致病性。蜜蜂幼虫体内同时接种细菌和球囊菌孢子,发现细菌对球囊菌在蜜蜂体内的萌发和初期菌丝的生长没有影响,蜜蜂依然能够患病,但生长后期该细菌能够降解球囊菌菌丝,对球囊菌子代孢子的产生表现出一定的抑制作用。【结论】该研究结果为蜜蜂白垩病的生物防治提供了理论依据。
- 李江红郑志阳洪双燕齐香凤梁勤
- 关键词：白垩病蜜蜂球囊菌蜡样芽孢杆菌拮抗
- 蜜蜂球囊菌全长cDNA文库的构建与分析
- 2010年
- 本试验利用TRIzol试剂盒提取蜜蜂球囊菌总RNA,通过Oligotex纯化试剂盒将mRNA反转录成cDNA,再以第一链cDNA为模板合成第二链cDNA,该cDNA产物经分级分离和体外包装,即获得蜜蜂球囊菌cDNA原始文库,其滴度测定为1.6×106PFU/mL,扩增后的滴度是1.5×109PFU/mL;取适量扩增文库稀释并铺平板,蓝白斑筛选独立噬菌斑,用M13±通用引物进行PCR扩增后,文库的重组率达到90%,插入cDNA片段的长度在0.5-2 kb。该文库的构建,有利于筛选目的基因,便于深入研究蜜蜂白垩病的侵染机制,最终有效防制白垩病。
- 赵红霞李江红梁勤罗岳雄张学锋
- 关键词：蜜蜂球囊菌全长CDNA文库噬菌体
- 蜜蜂球囊菌几种胞外蛋白酶的特性被引量：8
- 2011年
- 【目的】研究由蜜蜂球囊菌引起的真菌性疾病白垩病的侵染机制,以及蜜蜂球囊菌胞外蛋白酶的种类及其特性。【方法】利用人工合成的培养基,在体外诱导蜜蜂球囊菌分泌胞外蛋白酶,用硫酸铵沉淀和透析,获得初酶液,利用相应的底物对酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶、弹性蛋白酶和胰蛋白酶的活力进行测定。【结果】蜜蜂球囊菌分泌的胞外酶主要有酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶3种,无弹性蛋白酶和胰蛋白酶。对这3种酶的最适温度、pH值以及热稳定性和酸碱稳定性进行了测定。这3种胞外酶的最适反应温度都在40℃左右,最适pH为7左右,均不耐高温,热稳定性差,在中性的pH环境下比较稳定。【结论】蜜蜂球囊菌可以分泌多种胞外蛋白酶,它们的最适pH和温度与蜜蜂消化道内的环境一致。
- 李飞雄李江红梁勤陈大福
- 关键词：蜜蜂胞外蛋白酶酶活力
