广西壮族自治区自然科学基金(2012GXNSFAA053126)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：赵文婧陈维平吴丽情吴卓刘玲珑更多>>
- 相关机构：广西医科大学广西卫生职业技术学院更多>>
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- SD大鼠乳鼠脱细胞心脏支架的细胞相容性评价
- 2018年
- 背景:脱细胞心脏支架材料具有低致敏性和天然的三维结构、具有良好的生物相容性和细胞亲和性等优点,成为心肌组织工程研究的热点。目的:探究SD大鼠乳鼠脱细胞心脏支架的细胞相容性。方法:选择第3代SD大鼠乳鼠骨髓间充质干细胞与SD大鼠乳鼠脱细胞心脏支架共培养7,14 d,构建细胞-支架复合物,采用苏木精-伊红染色、扫描电镜观察骨髓间充质干细胞在支架内的生长情况。采用心肌组织裂解液对细胞-支架复合物进行定向分化诱导,连续培养14 d,以平面定向分化诱导连续培养14,20 d的骨髓间充质干细胞为对照组,采用RT-PCR方法检测骨髓间充质干细胞内肌球蛋白重链α-MHC、锌指转录因子GATA-4的表达。结果与结论:(1)苏木精-伊红染色显示,细胞-支架复合物中存在大量嗜碱性细胞核,细胞-支架复合物共培养14 d的细胞数量明显多于共培养7 d;扫描电镜下观察显示,共培养14 d的细胞-支架复合物纤维表面有大量细胞黏附;(2)平面定向分化诱导连续培养14,20 d的骨髓间充质干细胞分别呈竹节样、肌管样结构。在定向分化诱导连续培养14 d的细胞-支架复合物中可检测到α-MHC、GATA-4的表达,α-MHC、GATA-4的表达量分别与竹节样细胞和肌管样结构阶段相当;(3)结果表明脱细胞心脏支架的细胞相容性良好。
- 韦雅淑徐亦辰赵文婧王慧丰刘红静谢丹尼陈维平
- 关键词：肌细胞心脏肌球蛋白重链
- 间充质干细胞分化为心肌细胞过程中细胞形态变化与Nkx2.5表达相关性的初步研究被引量：6
- 2015年
- 体外BMSCs分化为心肌细胞过程中,细胞在形态及相关基因的表达上发生明显的变化。本研究以心肌组织裂解液诱导BMSCs,观察分化过程中细胞形态变化,根据心肌细胞发生过程中细胞形态变化规律,选定5个检测点,行PCR检测细胞中Nkx2.5的表达,以探究分化过程中细胞形态变化与相关基因表达规律及其之间的相关性。实验结果表明BMSCs分化为心肌细胞的过程中,细胞形态变化呈现明显规律:由单个大核,胞浆饱满,折光性好的纺锤形;逐渐演变为短杆状;形成突起并连接成网状结构;细胞端相接呈"竹节样"改变;最后形成肌管样结构;诱导前细胞不表达Nkx2.5,诱导过程中随着细胞形态的不断变化Nkx2.5持续表达并逐渐增强。说明间充质干细胞分化为心肌细胞的过程中,Nkx2.5表达相对量的变化与细胞的形态变化可能有一定的相关。
- 刘玲珑吴卓赵文婧吴丽情徐亦辰陈维平
- 关键词：心肌细胞NKX2.5细胞形态
- 体外定向诱导小鼠胰腺干细胞分化形成胰岛样结构被引量：3
- 2015年
- 目的体外探讨胰腺干细胞形成胰岛样结构并对其进行相关检测,探寻胰腺干细胞分化为胰岛样结构可行性及初步鉴定的技术方法。方法从新生小鼠胰腺组织中通过原位传代扩增培养获得富足数量PSC,以尼克酰胺定向诱导PSC,观察细胞的形态变化、形成的细胞团双硫腙染色、免疫荧光组织化学染色及Mallory染色鉴定。结果PSC集落分布,细胞为单个大核、胞质折光透亮,巢蛋白(nestin)及碱性磷酸酶(AKP)染色阳性;诱导后聚集成团,最终形成具被膜包裹的细胞团;双硫腙染色阳性,胰岛素免疫荧光染色可见胞质被激发出绿色荧光的胰岛素阳性细胞;细胞团中央β样细胞及周围α样细胞,形成类似正常胰岛细胞组成的胰岛样结构。结论胰腺干细胞在适宜条件下可定向分化,形成胰岛样结构。
- 吴丽情寇亚丽赵文婧吴卓徐亦辰陈维平
- 关键词：胰腺干细胞体外培养
- 骨髓源性间充质干细胞三维微环境复合培养体系的构建
- 2013年
- 目的:构建三维微环境复合体培养体系,探索骨髓源性间充质干细胞在支架内生长、分化的规律。方法:通过贴壁培养法建立稳定的骨髓源性间充质干细胞系,采用流式细胞仪检测细胞表面标志;将壳聚糖,β-甘油磷酸钠及羟乙基纤维素按比例混合制备温敏性水凝胶。选取第3代骨髓源性间充质干细胞接种支架培养2周后,加入心肌组织裂解液培养5d。倒置相差显微镜下连续观察细胞形态变化的特征,收集细胞支架复合物行苏木精—伊红染色,扫描电镜观察其超微结构。结果:骨髓源性间充质干细胞经流式细胞仪检测表达CD29,不表达CD34。温敏性水凝胶含交织成网格状的纤维样结构,网孔内含胶冻样物质。骨髓源性间充质干细胞接种后呈球形,折光性好,不仅分布于纤维样结构表面,还渗入网孔内生长;HE染色支架呈嗜酸性;扫描电镜下可见支架具有适宜的孔径,细胞在支架上分裂增殖活跃;添加心肌组织裂解液后,细胞逐渐拉长呈梭形。结论:在构建的三维微环境复合培养体系中,骨髓源性间充质干细胞与支架生物相容性良好;复合培养体系能较好的模拟体内微环境,促进骨髓源性间充质干细胞的增殖、分化。
- 吴卓赵文婧刘玲珑吴丽情陈维平
- 关键词：骨髓间充质干细胞温敏性水凝胶
