黑龙江省自然科学基金(D00-33)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
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- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第三医院哈尔滨医科大学附属肿瘤医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脑肿瘤二级康复预防:阳离子脂质体介导HSV-TK/ACV系统对人脑胶质瘤细胞增殖活性的影响(英文)
- 2005年
- 背景:基因治疗是国内外对于脑胶质瘤生物学治疗的研究热点。目的:应用已克隆并构建的真核表达载体pCR3-TK,探讨HSV-TK/ACV系统对人脑胶质瘤细胞抑制生长和杀伤作用研究。设计:以细胞为研究对象的实验研究。单位:一所大学医院神经外科、肿瘤内科。对象:实验于2004-01/04在哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室完成。所用的真核表达载体pCR3-TK由作者构建,TJ905细胞株由天津神经病学研究所浦佩玉教授惠赠。选择未转染和转染空载体的细胞作为对照组。方法:用阳离子脂质体Lipofectamine将pCR3-Uni及含HSV-TK基因的真核表达载体pCR3-TK转染至人脑胶质瘤细胞株TJ905中,筛选出阳性克隆,阳性细胞克隆给予ACV(50mg/L),72h后,收集玻片,进行AgNOR染色。主要观察指标:对未转染和转染不同载体的TJ905细胞ACV作用后银染颗粒进行记数。结果:转染HSV-TK基因的细胞,在给予ACV后,细胞增殖活性明显降低,转染pCR3-Uni和pCR3-TK细胞克隆的AgNOR颗粒数分别为14.33和6.67(P<0.01)。结论:AgNOR计数是一种操作简便、检测细胞增殖活性的方法,为研究HSV-TK/ACV系统的抗肿瘤机制提供帮助。
- 苏君于雁张学新肖宏杨海城
- 关键词：脑肿瘤脂质体
- 阳离子脂质体介导HSV-TK基因治疗人脑胶质瘤的实验研究被引量：3
- 2004年
- 颅内恶性肿瘤以胶质瘤最为多见,胶质瘤的预后较差,一直困扰着神经外科医师。本文旨在观察阳离子脂质体介导的HSV-TK/ACV系统对人脑胶质瘤细胞的杀伤作用。方法:本文将新近克隆并构建的含HSV-TK基因真核表达载体用阳离子脂质体介导转染至人脑胶质瘤细胞中,筛选出阳性克隆,通过MTT、FCM及AgNOR检测转染了HSV-TK基因的FJ905胶质瘤细胞对不同浓度的ACV的反应情况。结果:转染了TK基因的胶质瘤细胞在给予ACV后,细胞发生明显的肿胀、变性,以致形成碎片,而未转染TK基因的胶质瘤细胞变化不明显。转染TK基因和未转染TK的肿瘤细胞经ACV作用后,DNA的含量分别为65.81和109.43,两者之间差异显著(P<0.05)。AgNOR嗜银染色测定结果,转染了TK基因和未转染TK基因的肿瘤细胞经ACV作用后,两者测定结果分别为6.67±1.03和14.83±1.47,两者之间差异极显著(P<0.01)。结论:转染了TK基因的胶质瘤细胞对ACV的敏感性明显提高,ACV能明显抑制转染TK基因细胞的DNA合成;HSV-TK/ACV治疗后,人脑胶质瘤细胞的增殖活性降低了。提示HSV-TK/ACV系统可为胶质瘤的基因治疗提供一种可探索的方法。
- 苏君张学新于雁肖宏
- 关键词：脂质体HSV-TK基因脑胶质瘤介导作用
- 自杀基因HSV-TK/ACV系统对人脑胶质瘤细胞DNA含量的影响被引量：1
- 2002年
- 目的 探讨HSV-TK/ACV系统的抗肿瘤机制。方法 将新近克隆并构建的含HSV-TK基因的真核表达载体pCR3-TK,用Lipofectamine转染至人脑胶质瘤TJ905细胞中,给予ACV,用FCM检测了对细胞DNA含量的影响。结果 转染了TK基因的细胞在ACV的作用下,DNA含量下降(分别为109.43和65.81;而对照组分别为109.28和83.24,细胞DNA的合成被抑制。结论 证实了我们克隆的TK基因对人脑胶质瘤的杀伤作用,同时也将HSV-TK/ACV系统的抗肿瘤机制研究推进了一步。
- 苏君杨海城肖宏张学新
- 关键词：胶质瘤脑胶质瘤自杀基因抗肿瘤作用细胞DNA含量
- 阳离子脂质体介导HSV-TK基因对人脑胶质瘤细胞的杀伤作用被引量：1
- 2002年
- 目的 观察阳离子脂质体介导的HSV TK/ACV系统对人脑胶质瘤细胞的杀伤作用。方法 将新近克隆的含HSV TK基因的真核表达载体pCR3 TK ,用阳离子脂质体Lipofectamine转染至人脑胶质瘤细胞株TJ90 5中 ,筛选出阳性克隆 ,给予不同浓度的ACV ,观察不同时间对细胞的杀伤情况 ,并用MTT方法检测不同细胞对ACV的反应情况。结果 转染TK基因的胶质瘤细胞对ACV的杀伤敏感性明显提高 (P <0 .0 1 ) ,ACV对转染TK基因的胶质瘤细胞有特异性抑制和杀伤作用。结论 阳离子脂质体Lipofectamine是一种简便、安全、有效的基因转移方法。可用阳离子脂质体介导pCR3 TK转移 ,进行胶质瘤HSV TK/GCV基因治疗的研究 。
- 苏君程淑平刘艳荣张霞
- 关键词：阳离子脂质体脑胶质瘤
