国家自然科学基金(30600444)
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
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- 实时荧光定量RT-PCR检测禽白血病病毒J亚群被引量：4
- 2010年
- 将禽白血病病毒J亚群（ALV-J）NX0101毒株接种1日龄和7日龄SPF雏鸡并设阴性对照组,采用实时荧光定量RT-PCR方法,定期检测病毒在体内的复制情况。根据GenBank发表的ALV-Jenv基因保守序列（AY897227）设计1对特异性引物扩增目的基因;根据鸡的3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）基因序列（K01458）,在保守区内设计1对引物扩增内参照基因,分别克隆入质粒作为标准品制作标准曲线,采用SYBR GreenⅠ染料建立荧光定量PCR法,并对方法的特异性、敏感性和重复性进行评价。结果显示,标准曲线的Ct值与标准品浓度的对数值之间存在线性关系;最低每个反应可检测到60个拷贝的病毒数,比常规PCR灵敏度高1 000倍。检测结果分别采用绝对定量法和相对定量法进行分析,都达到了良好的效果。通过对病毒含量变化的检测发现,在雏鸡4周龄时,2个接毒组ALV-J病毒突然呈对数式增长。据此分析ALV-J病毒在体内经过3~4周潜伏后,突然呈暴发式增长,这种情况可能和临床表现的免疫抑制直接相关。结果表明,本试验建立了一种特异性强、敏感性高、可定量分析ALV-J病毒增殖的方法,为进一步相关研究奠定了基础。
- 王峰刘青王晓伟陈洪博于琳琳王玥姜艳萍成子强
- 关键词：实时荧光定量RT-PCRALV-J
- 感染J亚群禽白血病病毒的蛋鸡群中检测出B亚群禽白血病病毒
- 通过血清学、病理学以及病毒学检测,首次在国内从感染ALV-J的海蓝白商品蛋鸡群中分离到B亚群禽白血病病毒(ALV-B).ELISA检测该鸡场血清样品(92份)显示,ALV-A/B型抗体阳性率为16.3%,ALV-J抗体阳...
- 刘功振张洪海刘青邱波王峰王晓伟陈洪博成子强
- 关键词：J亚群禽白血病病毒病理学
- 文献传递
- 实时荧光定量逆转录PCR检测禽白血病病毒J亚群(ALV-J)
- 将ALV-J NX0101毒株接种1日龄和7日龄SPF雏鸡并设阴性对照组,采用实时荧光定量逆转录PCR方法,定期检测病毒在体内的复制情况.根据Genebank发表的ALV-J env基因保守序列(AY897227)设计一...
- 王峰刘青王晓伟陈洪博于琳琳王玥姜艳萍成子强
- 关键词：ALV-J
- 感染J亚群禽白血病病毒的蛋鸡群中检测出B亚群禽白血病病毒被引量：14
- 2009年
- 通过血清学、病理学以及病毒学检测,首次在国内从感染ALV-J的海蓝白商品蛋鸡群中分离到B亚群禽白血病病毒（ALV-B）。ELISA检测该鸡场血清样品（92份）显示,ALV-A/B型抗体阳性率为16.3%,ALV-J抗体阳性率为13%,其中有1只鸡呈现抗体双阳性。取3只表现临床症状病鸡做病理组织学观察,在肝脏同一位置发现淋巴细胞样瘤细胞和髓细胞样瘤细胞增生灶,其它组织器官（除脑、神经和法氏囊）也有不同程度的两种瘤细胞增生。根据文献设计合成ALV-A、ALV-B、ALV-J、MDV和REV的特异性引物。取该3只病鸡肝脏病料研磨接种DF-1细胞,培养7-10天后提取培养细胞DNA,PCR扩增获得1 100bp的ALV-B特异性片段和924bp的ALV-J特异性片段,其中有1只鸡为ALV-B和ALV-J双阳性,而ALV-A、MDV、REV的PCR结果为阴性,因此获得ALV-B和ALV-J各两株分离株。对ALV-B、ALV-J扩增序列进行遗传进化树分析表明,两ALV-B分离株与其代表株的同源性分别为92.8%和94.7%;两ALV-J分离株与英国原型株同源性分别为96.9%和91.5%,与美国原型株同源性为85.9%和81．5％，与国内分离毒株同源性在87．0％～98．7％之间。本研究在国内分离到ALV—B毒株，并证实了ALV-B、J在同一只鸡体内的混合感染，应引起养禽业及相关研究部门的高度重视。
- 刘功振张洪海刘青邱波王峰王晓伟陈洪博成子强
- 关键词：J亚群禽白血病病毒病理学
- 禽白血病病毒跨膜蛋白在膜融合及免疫抑制中的作用
- 2008年
- 禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)入侵宿主细胞的关键是病毒囊膜与宿主细胞膜的融合,ALV在此过程中采用病毒-宿主细胞膜融合机制,这一机制的关键是病毒与细胞受体结合后跨膜蛋白一系列构象的变化。此外,ALV入侵宿主细胞后会引起严重的免疫抑制,继而引发肿瘤的产生。在对一些与ALV有相同感染机制的病毒的研究中发现,引起免疫抑制的关键区也是跨膜蛋白。因此进一步在分子水平上深入研究跨膜蛋白有助于正确认识病毒侵染的本质,做到更为有效的预防与治疗ALV感染。
- 刘青成子强
- 关键词：禽白血病病毒免疫抑制跨膜蛋白
- 禽白血病病毒跨膜蛋白在膜融合及免疫抑制中的作用
- 禽白血病病毒（Avian leukosis virus,ALV）入侵宿主细胞的关键是病毒囊膜与宿主细胞膜的融合,ALV在此过程中采用病毒-宿主细胞膜融合机制,这一机制的关键是病毒与细胞受体结合后跨膜蛋白一系列构象的变化。...
- 刘青成子强
- 关键词：禽白血病病毒免疫抑制跨膜蛋白
