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“十一五”国家科技攻关计划(08G006)
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金帮明
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金帮明
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2013
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11β-HSD2重组真核表达载体构建及对A549细胞IL-6的影响
2013年
目的本文旨在构建11β-羟基类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)基因的重组真核表达载体,并检测其转染人哺乳动物细胞后对白介素6(interleukin-6,IL-6)表达水平的影响。方法用PCR方法扩增11β-HSD2基因的全长cDNA,先亚克隆至pGMT载体,测序正确后再亚克隆至pcDNA3.1myc-hisC以构建其重组真核表达载体。将重组的真核表达载体瞬时转染人肺腺癌细胞系A549,用Western blot方法鉴定表达情况,并用ELISA方法检测IL-6表达水平。结果测序表明11β-HSD2的重组真核表达载体构建成功,Western blot显示真核表达载体能够在A549细胞中成功表达,并可使IL-6表达水平升高。结论成功构建了11β-HSD2基因的重组真核表达载体,初步验证了该基因的促炎效应。
陈晓琳
江红
王兴友
王丽娜
宋何煜
金帮明
关键词:
基因表达
A549细胞
白介素6
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