国家自然科学基金(30600495)
- 作品数：3 被引量：24H指数：2
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- 孕期边缘型维生素A缺乏对NMDA诱导的新生大鼠神经元Ca^(2+)内流的抑制作用被引量：1
- 2010年
- 目的了解孕期边缘型维生素A(vitamin A,VitA)缺乏对氮-甲基-D-天冬氨酸(N-Methyl-D-Aspartate,NMDA)诱导的新生大鼠海马神经元Ca2+内流的影响。方法将16只健康雌性Wistar大鼠采用随机数字表法分为边缘型VitA缺乏(MVAD)和VitA正常(VAN)组,每组8只。从交配前3周开始分别饲以VitA缺乏饲料(含VitA400 IU/kg)和VitA充足饲料(含VitA6 500 IU/kg)。高效液相技术检测血清VitA浓度。取MVAD组及VAN组新生大鼠海马神经元进行原代培养,并运用钙影像测定仪检测原代培养的海马神经元在NMDA刺激后细胞内钙离子变化。Western blot半定量分析海马组织NMDA受体-1(NR1)的表达。结果 MVAD组母鼠血清VitA水平[(0.768±0.069)μmol/L]低于VAN组[(1.284±0.217)μmol/L],MVAD组仔鼠血清VitA水平[(0.806±0.092)μmol/L]低于VAN组[(1.270±0.098)μmol/L](P<0.01);神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolage,NSE)免疫荧光鉴定神经元纯度显示两组无显著差异(P>0.05);MVAD组与VAN组海马神经元在NMDA刺激后,MVAD组Ratio340/380增加值(0.136±0.012)低于VAN组(0.168±0.022)(P<0.01);Western blot半定量分析结果显示NR1在MVAD组海马组织中的表达显著低于VAN组。结论孕期开始的MVAD会抑制NMDA诱导的新生大鼠海马神经元钙离子内流,而降低NR1在神经元的表达可能是其损伤的机制之一。
- 张小娟毕杨何剑刘友学陈洁瞿平李廷玉
- 关键词：BLOT边缘型维生素A缺乏
- 不同维生素A营养状态下血清视黄醇水平与机体抗氧化能力的相关分析被引量：16
- 2008年
- 目的:通过检测不同维生素A(VA)状态对大鼠血清视黄醇水平与抗氧化能力的影响,分析两者之间的相关性,探讨体内重要的VA代谢中间产物视黄醇与机体脂质过氧化及抗氧化系统之间的关系.方法:9只健康雌性W istar大鼠随机分为正常对照组、VA缺乏组(VAD)和VA补充组(VAS),从交配前3 wk开始分别饲予VA缺乏饲料(含视黄醇400 U/kg)和正常饲料(含视黄醇6500 U/kg).正常对照组和VAD组仔鼠断乳后,继续饲予与其母鼠相同的饲料至生后8wk;VAS组仔鼠在出生0 d开始补充.高效液相技术检测血清视黄醇浓度,试剂盒检测血清抗氧化酶及产物超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及脂质过氧化物和丙二醛(MDA)水平.结果:VAD组仔鼠血清视黄醇浓度低于正常对照组和VAS组(P<0.05),VAS组血清视黄醇浓度与正常对照组无差异(P<0.05).与正常对照组相比,VAD组仔鼠血清抗氧化酶SOD和GSH-Px水平降低,而MDA水平升高,VAS组可观察到抗氧化酶SOD,GSH-Px和脂质过氧化物MDA水平恢复到正常对照组水平.血清中视黄醇水平与抗氧化酶SOD活性呈正相关(r=0.4574);血清中视黄醇水平与脂质过氧化产物MDA呈负相关(r=-0.4870);血清抗氧化酶GSH-Px活性与视黄醇水平无相关.结论:血清中视黄醇水平与抗氧化酶SOD活性、脂质过氧化物MDA水平密切相关,提示VA营养状态能够通过调节抗氧化酶活性和脂质过氧化反应而影响机体的抗氧化系统.
- 黄鸿眉魏华江伟张萱陈科谭旭瞿平刘友学杨莉李廷玉
- 关键词：抗氧化剂维生素A
- 简易大鼠海马神经元原代培养方法及神经元兴奋性检测被引量：7
- 2010年
- 目的对原有大鼠海马神经元原代培养方法进行改进,在获得数量多、纯度高、体外生长时间长的神经细胞的同时,简化操作流程、节省时间、减少污染。方法分离24h内出生的Wistar大鼠双侧海马,采用机械吹打法,以沉降法代替过滤制备单细胞悬液,细胞接种24h后培养液更换为添加B27的DMEM/F12无血清培养基,以后每周半量换液2～3次。用倒置相差显微镜观察细胞形态,利用神经元特异性标志物神经元特异烯醇化酶(NSE)鉴定神经细胞的纯度,并以钙影像仪测定KCl作用神经元后细胞的钙离子浓度变化,了解神经元的兴奋性。结果此简易方法节约操作时间及科研成本,减少了污染的机会。所培养的神经元杂质少、纯度高、细胞活性好,体外存活时间长。结论该方法简便可行,结果稳定,用该方法培养的大鼠海马神经元可作为神经元体外培养的良好实验模型。
- 张小娟李廷玉刘友学陈洁瞿平魏小平何剑
- 关键词：大脑皮质神经元原代培养
