安徽省长三角科技联合攻关项目(10140702001)
- 作品数:6 被引量:28H指数:4
- 相关作者:张洪斌胡雪芹赵艳艳毛慧芳王旭更多>>
- 相关机构:合肥工业大学商洛学院更多>>
- 发文基金:安徽省长三角科技联合攻关项目更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程医药卫生生物学更多>>
- 甘油磷酸胆碱的鉴别与含量测定被引量:9
- 2012年
- 目的建立三类新药甘油磷酸胆碱的鉴别和含量测定方法。方法采用化学鉴别法、薄层色谱法以及红外吸收光谱图建立三类新药甘油磷酸胆碱的鉴别方法;采用HPLC-ELSD测定其含量,色谱柱为C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(60∶40),流速0.7 ml.min-1,载气为空气,流速3.5 ml.min-1,漂移管温度110℃。结果化学法鉴别中供试品与对照品发生相同显色反应,薄层色谱法中供试品Rf值与对照品相同,红外吸收光谱测得甘油磷酸胆碱的基团与理论值相符。甘油磷酸胆碱在100~2 000 mg.L-1范围内线性关系良好,平均回收率为99.81%,RSD=0.85%(n=9)。结论该方法准确、简便可行、重现性好,可作为甘油磷酸胆碱的质量控制方法。
- 赵艳艳张洪斌毛慧芳崔云龙
- 关键词:高效液相色谱法
- 酶解法替代酸解生产右旋糖酐的新工艺研究被引量:4
- 2013年
- 目的:右旋糖酐酶催化水解工艺替代右旋糖酐发酵工艺中的盐酸水解.方法:以药用右旋糖酐70(1)、右旋糖酐40(2)和右旋糖酐20(3)的含量为指标,采用HPLC测定指标成分含量,酶催化温度、pH、底物浓度、酶浓度、反应时间为考查因素,确定药用级右旋糖酐水解的酶催化工艺.条件与结果:制备右旋糖酐70(1)、右旋糖酐40(2)和右旋糖酐20(3)的酶催化工艺:底物浓度为7%,酶浓度为2U/mL,于pH 5.0、200r/min、35℃条件下分别反应60~70min、70~80min、90~110min.结论:右旋糖酐酶法催化工艺简单可控,操作性强,适合大规模生产.
- 宋丹丹张洪斌胡雪芹郭继彬
- 关键词:右旋糖酐酶催化
- N^+注入诱变选育β-环状糊精葡萄糖基转移酶高产菌株及其发酵条件优化被引量:1
- 2012年
- 以一株产β-环状糊精葡萄糖基转移酶的蜡状芽孢杆菌BC-0801为出发菌株,利用10keV,剂量为40×2.5×1013ions/cm2氮离子进行诱变选育,获得一株高产β-环状糊精葡萄糖基转移酶的突变体BC-0802。对该突变体BC-0802发酵培养基的碳源、氮源及无机离子进行单因素试验分析,采用3个因素正交试验确定其最佳发酵培养基成分质量浓度及发酵条件为:玉米粉30g/L、酵母浸膏15g/L、K2HPO41g/L,发酵温度30℃、pH 9.0、接种量2%、发酵周期36h。结果表明;突变体的平均酶活力可达3415.8U/mL,相较于出发菌株酶活力提高了3.67倍,且该突变体的遗传稳定性较好。
- 张洪斌凌国庆胡雪芹凡宁
- 关键词:诱变
- 一株产右旋糖酐酶青霉的分离及酶的纯化和性质被引量:12
- 2011年
- 【目的】从土壤中筛选到一株新的产右旋糖酐酶的真菌F1001,为酶法制备药用级右旋糖酐提供新的右旋糖酐酶产生菌株。【方法】通过形态特征和ITS rDNA序列分析方法鉴定菌株。利用硫酸铵盐析、Sepharose 6B凝胶柱纯化,得到纯度较高的酶蛋白。以右旋糖酐70 kDa为底物,对右旋糖酐酶酶学性质及催化机理进行研究。【结果】经过鉴定确定菌株F1001为棘孢青霉(Penicillium aculeatum)。通过SDS-PAGE测得棘孢青霉右旋糖酐酶的分子量为66 kDa左右。酶促反应的最适温度为35℃,最适pH为5.0,酶在pH 4.0-7.0和50℃以下稳定。酶的最适底物浓度为3%,酶催化水解右旋糖酐的主产物为异麦芽糖,确定该酶为内切右旋糖酐酶,并且只对连续的α-1,6葡萄糖苷键起作用。酶的Km值为3.55×10-5 mol/L,Vmax=4.29×10-2 mol(葡萄糖)/min.L。Cu2+和Zn2+对酶活有较强的促进作用,低浓度的Cu2+使酶活力提高到134.7%,Mn2+对酶催化活力抑制作用较强。【结论】筛选得到一株新的右旋糖酐酶的产生菌F1001,产生的右旋糖酐酶活性高、稳定性较好。为该酶进行催化反应和工业应用提供了重要参数。
- 张洪斌吴定涛黄丽君胡雪芹王旭
- 关键词:分离纯化酶学性质
- 非水相生物催化制备甘油磷酸胆碱被引量:9
- 2012年
- 通过在非水相中对生物催化剂脂肪酶水解大豆卵磷脂生成甘油磷酸胆碱的研究,确定最佳的工艺条件。结果表明:最佳条件为反应时间6h、反应温度40℃、pH5.0、加酶量12.5mg/mL、水含量4%,为了增加酶的利用率和减少有机溶剂的使用,反应1.5h后补加底物,补加质量为初始质量的50%,补加的底物质量浓度为0.437g/mL。在此工艺条件下,经高效液相色谱检测分析,3次平行实验测得反应液经水萃取后甘油磷酸胆碱产率为97%。该工艺为甘油磷酸胆碱的制备提供了一种可行的方法。
- 毛慧芳张洪斌赵艳艳胡雪芹
- 关键词:脂肪酶卵磷脂非水相
- 甘油磷酸胆碱制备的研究进展被引量:2
- 2013年
- 目前抗痴呆药物的研究与开发已引起世界各国医药界的高度重视,随着对老年人神经疾病相关机理研究的不断深入,相关药物的开发研究不断取得进展。就近年来国内外有关甘油磷酸胆碱的制备及纯化、化学结构、含量测定等方面的研究现状进行了概述,并指出甘油磷酸胆碱是一类治疗脑缺血型中风、老年痴呆以及多发性脑梗死型痴呆的药物,在防治老年痴呆症方面有着广阔的应用前景。
- 赵艳艳张洪斌