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利用等位基因特异性扩增检测人结直肠癌BRAF基因V600E突变被引量：1: 2012年; 目的建立一种基于等位基因特异性扩增技术检测人BRAF基因V600E突变的技术,用于检测低水平肿瘤点突变。方法设计选择性扩增人BRAF基因V600E的引物,利用BRAF V600E突变型大肠癌细胞系HT29核酸混合于BRAF野生型大肠癌细胞系SW480中进行灵敏度检测,通过与Sanger测序法比较,利用其检测40例结直肠癌石蜡标本的BRAF V600E突变情况。结果模拟细胞系混合检测显示该方法可检测出6.2%混杂于野生型基因里的BRAF V600E突变,利用该方法在40例大肠癌标本中成功检测出3例BRAF V600E突变,与测序法检出结果一致。结论成功建立了利用等位基因特异性扩增技术检测人BRAF基因V600E突变的实验技术并用于检测实体肿瘤标本,与测序法相比该方法具有灵敏、简便、快速的特点,可用于人肿瘤BRAF V600E突变的筛查应用。; 司徒博曹楠楠刘丽琴李博刘芹兰林丽王前郑磊; 关键词：大肠肿瘤 BRAF 突变

基于gyrB序列Taqman实时荧光PCR检测在MTC鉴定中的应用被引量：4: 2014年; 目的:初步分析基于gyrB序列的Taqman实时荧光PCR在MTC(结核分枝杆菌复合群)鉴定中的应用。方法:根据MTC gyrB序列设计引物和探针,应用荧光定量PCR对14株标准株及90株临床分离株进行临床研究,并与测序法结果进行比较。结果:14株标准株中,非洲分枝杆菌与结核分枝杆菌结果为阳性,其余结果为阴性;30株临床分离株与ITS测序比较,有1株NTM结果为阳性,1株MTC结果为阴性,其余菌株检测结果与测序结果符合,分析特异度高;将60株临床分离株的检测结果与测序结果进行比较,得到该方法的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均为100%。结论:采用基于gyrB序列的Taqman荧光PCR可快速检测和鉴别MTC和NTM。; 张诗蒙尹小毛刘非郑磊王前; 关键词：结核分枝杆菌

基于碳纳米管修饰的无酶型新型甲胎蛋白安培免疫传感器研究被引量：1: 2011年; 目的构建新型甲胎蛋白安培免疫传感器。方法首先在玻碳电极(GCE)表面修饰一层羧基化碳纳米管(CNTs),然后利用带负电荷的DNA分子和带正电荷的硫堇之间的静电作用,层层自组装修饰硫堇以增强检测信号,然后利用硫堇的氨基固定纳米金,以便固定抗体,最后利用牛血清白蛋白封闭未结合位点。结果修饰的碳纳米管能够显著地提高电极的导电性,利用层层组装技术修饰了5层硫堇。在优化的条件下(pH7.0,温浴时间25min),制作的甲胎蛋白免疫传感器线性范围在0.5～25ng/ml内,检测限0.02ng/ml。结论成功利用层层自组装技术构建新型基于碳纳米管修饰的无酶型甲胎蛋白安培免疫传感器,该传感器灵敏度高,特异性好,有望成为原发性肝癌早期诊断的新方法。; 贾立永郑磊干宁Wen Wang王前; 关键词：碳纳米管层层组装 DNA 硫堇

基于邻位连接技术(PLA)的生物检测新策略被引量：1: 2012年; 邻位连接技术(PLA)是近年来发展起来的一种蛋白质检测方法。该技术的核心理念来源于适体技术、连接酶技术和Taqman探针技术,其主要形式包括均相、固相和原位3种。PLA具有特异、灵敏、快速、高通量和多功能等优点,不但能够检测蛋白质、亚细胞结构和细胞等生物样本,还能检测大分子间的相互作用,现已逐步被应用于医学和生物学等众多领域。; 郑磊尹小毛王前; 关键词：蛋白质适体连接酶链反应实时PCR

HIV-1电化学活性-非活性开关分子信标的构建及验证: 2012年; 目的构建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)电化学活性-非活性开关分子信标(CAs-MB)并验证其结构及功能。方法合成并纯化针对HIV-1 gag基因保守区序列的CAs-MB,用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和循环伏安法(CV)验证其结构,用差分脉冲伏安法(DPV)信号强度评价CAs-MB的识别功能。结果胭脂红酸(CA)单体与CAs-MB FT-IR图的变化证明CA已标记于MB末端,CV图证明CAs-MB电化学活性ON和OFF状态的存在。DPV结果证实其能够在电化学平台上实现对目标序列的特异性识别,且能够区分一个碱基的差异。结论 CAs-MB作为HIV-1 gag基因的特异性识别元件有望用于构建新型HIV-1电化学基因传感器。; 李博顾大勇司徒博李政良颜晓慧刘芹兰郑磊王前; 关键词：人类免疫缺陷病毒1型分子信标

结核分枝杆菌喹诺酮类耐药基因研究进展被引量：3: 2012年; 日益增多的耐喹诺酮类结核分枝杆菌给结核病疫情的控制带来了巨大挑战,深入研究结核分枝杆菌喹诺酮类耐受机制便成为应对挑战的关键。药物靶基因突变是导致结核分枝杆菌喹诺酮类耐受的主要因素,近年来该方面的研究逐步受到重视并取得了一些进展,本文特对此进行述评。; 王前郑磊; 关键词：结核分枝杆菌

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广东省科技计划工业攻关项目(2010A030300006)