湖北省教育厅自然科学基金(D20131308)
- 作品数：4 被引量：30H指数：3
- 相关作者：罗春华王鹏陈童王娟李国静更多>>
- 相关机构：三峡大学第一临床医学院武汉大学更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 登革2型病毒NS1基因真核表达载体的构建及意义
- 2015年
- 目的构建登革2型病毒(DENV2)NS1基因的真核表达载体,为筛选与NS1相互作用的蛋白以及研究机体抵抗登革病毒感染的作用机制奠定基础。方法以DENV2感染THP1细胞的c DNA为模板,采用RT-PCR法扩增具有Flag标签的NS1全长基因,并将其克隆至p SG5质粒中,构建p SG5-NS1-Flag真核表达载体。筛选阳性克隆,分别进行酶切及测序鉴定。采用脂质体转染法将真核表达载体分别转染293T细胞和A549细胞,Western blotting法检测细胞NS1蛋白表达。结果扩增后具有Flag标签的NS1全长基因片段大小为1 089 bp,与预期目的片段大小相符。载体和目的基因NS1都含1个ECORⅠ位点,单酶切片段大小分别为463、4 722 bp,NS1扩增片段和p SG5质粒的双酶切片段大小分别为1 089、4 100 bp;6个阳性克隆中,5、6号克隆酶切片段符合预期大小,并经序列鉴定证实。293T细胞和A549细胞转染空载体后,NS1融合蛋白表达极低,转染真核表达载体后均有NS1融合蛋白表达。结论本研究成功构建了p SG5-NS1-Flag真核表达载体,为与NS1相互作用的免疫调控蛋白、NS1蛋白翻译后修饰以及机体免疫系统抵御登革病毒感染机制的相关研究奠定了基础。
- 何莉易小芳罗春华
- 关键词：NS1真核表达
- 金黄色葡萄球菌耐药性变迁探讨被引量：7
- 2014年
- 目的统计分析医院2010-2012年各临床科室分离的金黄色葡萄球菌耐药性变迁,为临床合理用药提供实验室参考依据。方法 2010-2012年医院细菌室共检出病原菌4 805株,按GB15189规定的SOP文件标准程序对细菌进行鉴定,按CLSI规定采用K-B法进行药敏试验,对药敏结果用WHONET5.5软件进行统计分析。结果 4 805株病原菌中金黄色葡萄球菌472株,检出率为9.8%;2010年分离出病原菌1 125株,金黄色葡萄球菌125株,检出率11.1%;2011年分离出病原菌1 510株,金黄色葡萄球菌148株,检出率9.8%;2012年分离出病原菌2 170株,金黄色葡萄球菌199株,检出率9.2%;金黄色葡萄球菌对青霉素G的耐药率3年依次为92.8%、93.2%、94.0%;均未发现耐糖肽类、利奈唑胺金黄色葡萄球菌。结论金黄色葡萄球菌感染日益增多,且MRSA的检出率也逐年上升,青霉素的敏感率不足10.0%,已不宜用来治疗葡萄球菌属引起的感染。
- 袁本清宋发谷张爱群龚萍王廷波吴慧玲李强张登玉
- 关键词：金黄色葡萄球菌抗菌药物耐药性变迁
- 多种尿液检测方法对尿路感染诊断价值的meta分析被引量：15
- 2016年
- 目的采用Meta方法对比多种尿液分析检测方法在尿路感染诊断中的价值,检查方法包括细菌培养、尿沉渣镜检、尿液分析仪、尿液常规干化学法对细菌、白细胞、红细胞等。方法检索论文数据库PubMed、EMbase、Cochrane library、Springerlink、CNKI、万方数据库,检索时限为数据库建库至2014年12月,由两名系统评价员按照纳入排除标准对文献质量进行独立筛选,采用RevMan5.3、Meta-DiSc对纳入研究的文献进行分析,计算合并敏感度(Sen)、特异度(Spe)、阳性似然比(LR+)、阴性似然比(LR-)、诊断比值比(DOR)、绘制SROC曲线。结果 1按照纳入、排除标准最终纳入14篇文献,共9 518例患者(12 560例次);2尿液白细胞检测以尿沉渣镜检为金标准,尿常规干化学法检测AUC为0.9656、综合Sen为0.845(0.805,0.879)、综合Spe为0.944(0.929,0.957);尿液分析仪检测AUC为0.8983,综合Sen为0.631(0.591,0.669),综合Spe为0.929(0.911,0.944);3尿液红细胞检测以尿沉渣镜检为金标准,尿液常规干化学法检测AUC为0.9306、综合Sen为0.590(0.572,0.608),综合Spe为0.948(0.938,0.956);尿液分析仪检测AUC为0.7319,综合Sen为0.473(0.433,0.513),综合Spe为0.971(0.958,0.980);4尿液细菌检测以细菌培养为金标准,尿液分析仪AUC为0.9048,综合Sen为0.842(0.811,0.870),综合Spe为0.881(0.865,0.896)。结论在尿路感染白细胞、红细胞的检查中,尿液常规干化学法在AUC、Sen、Spe方面均优于尿液分析仪,在尿液白细胞、红细胞的检测中具有优势;尿液分析仪在尿液细菌检查诊断价值较高,同时较细菌培养周期短,可推荐用于尿液细菌的筛选,但Sen、Spe均在0.9以下,如需确诊还需要结合细菌培养。
- 王鹏罗春华陈童王娟
- 关键词：泌尿道感染META分析尿沉渣镜检尿液分析仪
- UF-1000i尿液分析流水线对尿路感染诊断效率评价被引量：8
- 2013年
- 目的评价UF-1000i尿液分析流水线对尿路细菌性感染的诊断效率。方法留取疑为尿路感染的414例患者清洁中段尿各两份,一份做细菌定量培养,结果作为标准;另一份在UF-1000i仪上检测干化学白细胞、尿沉渣白细胞计数、细菌计数,结果与前者进行对照评价。结果仪器白细胞计数、细菌计数、干化学白细胞3项联合判断与尿定量细菌培养结果对尿路感染诊断差异无统计学意义;3项联合判断尿路感染其阳性预测值为88.5%,阴性预测值为98.8%,敏感性为95.1%,特异性为97.0%,诊断准确性为96.6%。结论综合应用SYSMEX UF-1000i尿液分析仪流水线检测与中段尿细菌培养对尿路感染诊断有较好的一致性,对尿路感染的早期筛查具有重要价值。
- 罗春华李国静刘敏田卫群
- 关键词：尿路感染
