国家自然科学基金(30571338) 作品数:20 被引量:36 H指数:3 相关作者: 田文儒 姜同泉 任登良 姜忠玲 屈平平 更多>> 相关机构: 青岛农业大学 莱阳农学院 东北农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 交通运输工程 建筑科学 更多>>
谷氨酰胺诱导热休克蛋白70表达的研究 被引量:2 2009年 选取24只8周龄健康的雌性昆明小白鼠并随机分成4组,Ⅰ组为对照组,尾静脉注射生理盐水,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别注射不同剂量的Gln,注射后4h处死,取肝脏、子宫和卵巢,采用RT-PCR和WesternBlot法检测HSP70mRNA和HSP70的表达。试验结果表明,Gln注射组鼠组织中HSP70表达量均高于对照组,且HSP70表达量随着Gln注射量的增加而增加。Ⅱ组鼠肝脏、子宫和卵巢组织中HSP70蛋白表达量比对照组分别增加了9.49%、5.49%和4.84%(P>0.05);Ⅲ组鼠各组织中HSP70比对照组分别显著(P<0.05)增加了23.56%、21.10%和14.30%;Ⅳ组肝脏组织中HSP70比对照组显著增加了35.33%(P<0.05),子宫和卵巢比对照组分别极显著(P<0.01)增加了33.74%和33.77%。因此,Gln能诱导小鼠肝脏、子宫、卵巢组织细胞HSP70的表达,并且HSP70表达量随着Gln剂量的加大而增加。 张志宏 姜忠玲 曹荣峰 李辉辉 田文儒关键词:谷氨酰胺 HSP70表达 热应激对小鼠囊胚HSP72表达的影响 被引量:1 2008年 将体外培养的小鼠囊胚分别施以40℃和38℃热休克处理1 h,2 h和3 h,然后在37℃条件下分别恢复3 h,2 h和1 h后,利用Western blot技术检测小鼠囊胚HSP72的表达,以明确热应激对小鼠囊胚HSP72表达的影响。结果显示,38℃和40℃热应激组均有HSP72的表达,38℃组2 h达到最高水平,与对照组相比差异显著(P<0.05),然后表达量随热应激时间延长而降低;40℃组3 h达到最高水平,与对照组相比差异不显著(P>0.05)。结果表明,轻度、短时间热应激既可使小鼠囊胚HSP72表达。 任登良 田文儒 姜同泉 王明志 田中杰 屈平平关键词:小鼠 囊胚 热应激 HSP72 WESTERNBLOT 热应激对小鼠卵母细胞和附植前胚胎及其生长内环境氧化损伤的影响 被引量:2 2009年 【目的】研究热应激对机体(肝脏)以及生殖系统氧化、卵母细胞和附植前胚胎氧化及发育能力的影响,探讨热应激影响卵母细胞及附植前胚胎发育能力的机制。【方法】分别用总谷胱甘肽和微量丙二醛测定试剂盒检测热应激后小鼠卵母细胞、附植前胚胎和组织器官内总谷胱甘肽(totalGlutathione,TGSH)、丙二醛(MDA)的含量,并且观察后续胚胎的发育情况。【结果】母体经35℃处理6和12h后,其体内的卵母细胞(6h)和发育至1~3d的胚胎(桑椹胚前期,12h)的后续胚胎发育率显著降低,胚胎中TGSH含量下降(P<0.01)、MDA含量升高(P<0.01),卵母细胞中二者的含量未有变化;发育至第4天、第5天的胚胎(桑椹胚和囊胚)中TGSH和MDA的含量及胚胎发育率均未有变化(P>0.05);发育至第1~5天的体外培养的胚胎分别经39℃处理12h后,胚胎中TGSH和MDA及其发育率均未有变化(P>0.05);随着热应激温度升高和时间的延长,肝脏和输卵管中TGSH显著降低、MDA显著升高;当温度达到41℃时,卵巢和子宫中TGSH显著降低、MDA显著升高。【结论】桑椹胚以前的胚胎遭受母体热应激后,发育能力降低,这与热应激所诱导的氧化损伤密切相关,但是母体热应激后卵母细胞后续胚胎的发育能力降低与氧化损伤无关。体外培养的胚胎经39℃处理12h后,对附植前胚胎氧化损伤和孵出率均无影响。 李辉辉 田文儒 张志宏 张启耀 高善颂关键词:热应激 卵母细胞 附植前胚胎 发育能力 热应激小鼠附睾组织HSP70表达的研究 被引量:2 2009年 利用化学恒温培养箱对小鼠实施42℃ 1h/天的热应激处理,建立持续的全身热应激动物模型。在热应激持续到8、13、21和35天时,颈椎脱臼处死对照组和热应激组小鼠,应用改良巴氏染色法检测附睾精子畸形率,免疫荧光组织化学和蛋白质印迹分析的方法检测附睾组织HSP70的表达。结果显示:热应激组小鼠附睾精子畸形率随着热应激持续时间的延长而升高,且显著(P<0.05)高于对照组;对照组小鼠附睾组织HSP70呈极强表达(+++),而热应激组小鼠附睾组织HSP70的表达随着热应激持续时间的延长而减弱,当热应激持续到35天时呈极弱的表达(±)。结果表明:热应激损伤了附睾的功能,使附睾精子畸形率增加;附睾内HSP70为非热诱导型,HSP70可能在附睾精子的成熟过程发挥特殊的作用。 姜忠玲关键词:热应激 热休克蛋白70 免疫荧光组织化学 附睾 间接免疫荧光方法检测小鼠睾丸和附睾组织Hsp70的表达 2009年 采用间接免疫荧光方法对小鼠睾丸和附睾组织Hsp70的表达进行检测。结果表明,小鼠睾丸组织Hsp70呈极强的表达(+++),并且在各级生精细胞及支持细胞都呈极强表达;小鼠附睾头、附睾体、附睾尾的Hsp70呈现极强表达(+++),主要在附睾上皮细胞,而管腔内精子偶见阳性染色。说明间接免疫荧光方法能够特异性、原位地检测小鼠睾丸和附睾组织Hsp70的表达,而且操作简单,适用于研究Hsp70在精子发生和成熟过程的作用。 姜忠玲关键词:小鼠 睾丸 附睾 HSP70 间接免疫荧光 热应激对小鼠囊胚中HSP72表达及对孵出率影响的研究 被引量:2 2007年 将体外培养的小鼠囊胚分别施以40℃和38℃热休克处理1h、2h和3h,然后在37℃条件下分别恢复3h、2h和1h后,利用Westernblot技术检测小鼠囊胚HSP72的表达,同时观察囊胚的热敏性,以明确热应激对小鼠囊胚中HSP72表达及对孵出率影响。结果显示,38℃及40℃热应激组均有HSP72的表达,38℃组2h达到最高水平,与对照组相比差异显著(P<0.05),然后表达量随热应激时间延长而降低;40℃组3h达到最高水平,与对照组相比差异不显著(P>0.05)。38℃及40℃热应激组囊胚孵出率均随着热应激时间的延长而降低。结果表明,轻度、短时间热应激既可使小鼠囊胚HSP72表达;热应激能够降低小鼠囊胚的孵出率。 任登良 田文儒 姜同泉 王明志 田中杰 屈平平关键词:囊胚 热应激 HSP72 WESTERN BLOT 热休克蛋白70在配子发生和胚胎发育中的表达 被引量:5 2006年 热休克蛋白(hsp)是机体在应激状态下迅速合成的一组蛋白质。热休克蛋白70(hsp70)是hsp中成员最多、最重要的一族,具有普遍性、高度保守性以及应激性。hsp70作为蛋白成熟过程中的分子伴侣,参与细胞周期调节、DNA损伤修复及细胞凋亡,在配子发生及胚胎发育、机体衰老过程中具有重要的生理作用。本文主要就hsp70在配子形成和胚胎发育中的作用进行了简述。 姜同泉 田文儒 任登良 朱绍辉关键词:热休克蛋白70 配子发生 胚胎发育 热应激对鼠精液质量影响的研究 被引量:6 2010年 为了探讨热应激对雄鼠生殖功能的影响,研究以小鼠为试验动物,研究不同的温度梯度处理对小鼠精子数量、精子活力、死亡精子百分数、精子畸形率等生理指标和对睾丸组织形态结构的影响,同时监测了热应激处理对小鼠繁殖力的影响。结果表明:高温不仅破坏了精液的质量,还降低了雄鼠的生精能力。 李德军 田文儒 刘运枫 吕占军关键词:热应激 精子 精液质量 Effect of RNA Interference Hsp72 Gene Expression on Development of Mouse Preimplantation Embryos 被引量:1 2009年 The method of RNAi was used to inhibit the expression of induced heat shock protein 70 (Hsp72) in the 4-cell stage mouse embryos and the embryo development competence was analyzed to identify the functions of Hsp72 on embryonic heat resistance. The results indicated that the inhibition rates of siRNA1 for Hsp72 mRNA and Hsp72 protein were 87.1 and 78.5%, respectively. The blastocysts development rates were 41, 86, and 84% for the siRNA1 group, the LipofectamineTM 2 000 exposed group, and the 37℃ group, respectively, and the hatched blastocysts development rates for the above three groups were 35, 72, and 68%, respectively. The data suggest that the siRNAI has a significant inhibiting effect on Hsp72 gene, and Hsp72 gene silence reduces the blastocysts development rate and hatched blastocysts rate after heat shock during the development of mouse preimplantation embryos. WANG Ming-zhi TIAN Wen-ru TIAN Zhong-jie QU Ping-ping GAO Shan-song ZHANG Zhi-hong ZHANG Qi-yao HOU Chun-xia LI Hui-hui关键词:MOUSE BLASTOCYST 热应激对小鼠睾丸组织Hsp70表达的影响 被引量:2 2009年 利用化学恒温培养箱对小鼠实施42℃1 h/d的热应激处理,建立持续的全身热应激动物模型。在热应激持续到8、13、21和35 d时,颈椎脱臼处死小鼠,应用免疫荧光组织化学和蛋白质印迹分析的方法检测睾丸组织Hsp70的表达。结果显示,对照组的小鼠睾丸组织Hsp70呈极强表达;热应激组小鼠睾丸组织Hsp70表达减弱,但随着热应激持续时间的延长,Hsp70表达逐渐恢复。热应激处理8 d后的小鼠睾丸组织Hsp70呈弱表达、13和21 d后呈极弱表达、35 d后呈弱表达。结果表明,Hsp70在小鼠睾丸正常的精子发生过程中发挥重要的作用;持续性的热应激可以使机体建立热适应,Hsp70可作为睾丸组织对热应激产生热适应的生物学标志之一。 姜忠玲关键词:热应激 热休克蛋白70 免疫荧光组织化学 睾丸