吉林省自然科学基金(201015240)
- 作品数：7 被引量：20H指数：3
- 相关作者：徐冶李质馨于洋王晓军刘师兵更多>>
- 相关机构：吉林医药学院吉林医药学院附属医院吉林省吉林中西医结合医院更多>>
- 发文基金：吉林省自然科学基金吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 衣霉素对顺铂诱导人宫颈癌细胞凋亡的影响被引量：6
- 2013年
- 目的探讨内质网应激在顺铂诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用。方法取人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象,实验分为衣霉素(5mg/L)组、顺铂(6mg/L)组、衣霉素(5mg/L)与顺铂(6mg/L)联合给药组、阴性对照组,处理12h后采用MTT法观察细胞生长情况,Hoechst荧光染色检测细胞核形态的变化,免疫印迹法检测凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-4活化情况,间接免疫荧光法检测蛋白质二硫键异构酶(PDI)、磷酸化H2AX组蛋白(γ-H2AX)的表达变化。结果 MTT法检测显示衣霉素组、顺铂组、联合给药组和阴性对照组的细胞增殖抑制率分别为2.65%±2.71%、19.60%±4.34%、44.69%±7.07%、0,除衣霉素组与对照组外其余各组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。Hoechst染色显示,阴性对照组荧光较弱且均匀,顺铂组和联合给药组部分HeLa细胞核明显变小并呈现致密强荧光,部分细胞核呈碎块状,联合给药组核碎裂细胞比例(44.5%±5.1%)显著高于顺铂组(22.7%±3.9%,P<0.05)。免疫印迹法检测显示,顺铂组裂解Caspase-3、Caspase-4蛋白表达明显高于对照组和衣霉素组,但显著低于联合给药组(P<0.05)。间接免疫荧光法检测显示:顺铂组胞质内无PDI表达,荧光较弱;衣霉素组、顺铂组PDI蛋白均呈颗粒状,分布于核周,荧光较强;联合给药组大部分细胞内PDI呈现明显强荧光,荧光强度明显高于衣霉素组和顺铂组。阴性对照组和衣霉素组细胞核内未见γ-H2AX表达,而顺铂组与联合给药组均可见部分细胞核内出现明显绿色荧光,但两组无明显差异。结论衣霉素可增加内质网应激水平,促进顺铂诱导HeLa细胞发生凋亡。
- 徐冶李质馨曹慧玲于洋刘师兵王晓军
- 关键词：宫颈肿瘤衣霉素顺铂内质网应激细胞凋亡
- 3-甲基腺嘌呤对顺铂诱导HeLa细胞凋亡的影响被引量：3
- 2012年
- 目的采用自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制自噬,观察其对顺铂(DDP)诱导HeLa细胞凋亡的影响,探讨自噬在DDP诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用。方法用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)观察3-MA对DDP抑制HeLa细胞生长情况的影响;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;间接免疫荧光法检测自噬标志蛋白LC3和p62的变化;Hoechst荧光染色检测细胞凋亡。结果 MTT法显示,3-MA与DDP联合应用导致HeLa细胞生长抑制率增加;光镜结果显示,3-MA与DDP联合应用加剧了HeLa细胞收缩变圆,促进死亡;间接免疫荧光法检测到3-MA与DDP联合应用减弱了DDP诱导的HeLa细胞LC3聚集及其与p62的共定位;Hoechst荧光染色检测到3-MA与DDP联合应用增加HeLa细胞凋亡率。结论 3-MA抑制自噬能够促进DDP诱导HeLa细胞发生凋亡。
- 徐冶李质馨曹慧玲刘洪梅于洋刘师兵方青王晓军
- 关键词：顺铂自噬HELA细胞间接免疫荧光法
- 自噬抑制剂3-MA对乳胞素抑制胃癌BGC-823细胞增殖的影响及其机制被引量：3
- 2012年
- 目的探讨联合应用自噬抑制剂3-Methyladenine(3-MA)和蛋白酶体抑制剂乳胞素(Lactacystin,LAC)对胃癌细胞系BGC-823增殖的影响及其机制。方法体外培养BGC-823细胞,MTT法检测BGC-823细胞增殖率,Western印迹检测线粒体凋亡相关蛋白Cytochrome C以及内质网凋亡相关蛋白caspase-4表达水平。结果与对照组相比,蛋白酶体抑制剂LAC可以引起明显的BGC细胞增殖率的下降,联合应用3-MA可以增加其引起的细胞增殖率的下降,Western印迹结果显示LAC可以上调线粒体凋亡相关蛋白Cytochrome C以及内质网凋亡相关蛋白caspase-4表达水平,联合应用3-MA和LAC可以进一步引起表达水平的升高。结论自噬抑制剂3-MA可以增加LAC引起的细胞凋亡,通过线粒体和内质网凋亡信号通路。
- 金镇勋兰汝春王菲董长松徐冶
- 关键词：胃癌
- EGFR及TGF-α在前列腺腺癌及前列腺上皮内瘤组织中的表达及其临床意义被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)和转化生长因子α(TGF-α)蛋白在前列腺腺癌(PAC)和高级别前列腺上皮内瘤(HGPIN)以及癌旁前列腺良性增生(BPH)组织中的表达,阐明其表达在PAC发生过程中的作用。方法:收集41例PAC和癌旁BPH组织以及32例HGPIN病变组织,采用免疫组化SABC方法检测EGFR和TGF-α在不同病变中的表达。结果:①EGFR在PAC、HGPIN及BPH组织中的阳性表达率分别为56.6%、53.7%及85.4%,在BPH中的表达率高于PAC和HGPIN,差异有统计学意义(P<0.01)。PAC和HGPIN组织中EGFR的表达差异无统计学意义(P>0.05)。EGFR的表达与肿瘤细胞的分化程度无关,在高、中和低分化PAC组织中阳性表达率分别为53.9%、55.6%及52.6%,差异无统计学意义(P>0.05)。②TGF-α在PAC中的阳性表达率为56.1%,在癌旁BPH组织中阳性表达率为85.4%,差异有统计学意义(P<0.01),但与肿瘤细胞的分化程度无关,在高、中和低分化PAC阳性表达率分别为53.8%、66.7%及52.6%,差异无统计学意义(P>0.05)。③TGF-α在HGPIN病变中的阳性表达率为56.3%,与PAC比较差异无统计学意义(P>0.05),但与BPH比较差异有统计学意义(P<0.01)。EGFR和TGF-α在PAC中共同阳性率为81.8%,分别阳性率EGFR为18.2%,TGF-α为26.3%,两者呈正相关(r=0.558,P<0.001),但在HGPIN病变(r=0.111,P=5.450)和BPH(r=0.024,P=0.883)中两者无相关性。结论:EFFR和TGF-α蛋白在PAC、HGPIN和BPH组织中的表达水平不同,可以作为良恶性前列腺疾病的诊断及鉴别诊断指标。
- 王利群徐冶金仁顺
- 关键词：前列腺肿瘤前列腺上皮内瘤转化生长因子Α
- 顺铂诱导Hela细胞内质网应激途径凋亡的研究被引量：1
- 2013年
- 目的观察顺铂对Hela细胞内质网应激和凋亡的影响及其机制。方法体外培养宫颈癌Hela细胞,通过MTT法测得顺铂最适应激剂量为4.5μmol/L,实验分为对照组、顺铂4 h组、顺铂8 h组、顺铂12 h组,以观察顺铂作用Hela细胞后,其内质网应激及相关凋亡的动态变化。Western Blot法检测各组细胞内质网应激、凋亡相关蛋白表达。流式细胞术检测凋亡。结果与对照组相比,内质网应激相关蛋白GRP78,内质网应激信号凋亡调节蛋白IRE1α、p-JNK表达水平明显升高,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ表达增加;内质网应激诱导的凋亡蛋白Caspase-4和凋亡执行分子Caspase-3的裂解形式蛋白表达水平明显升高。流式细胞术检测结果显示,顺铂作用后与对照组相比,细胞凋亡率明显增加。结论顺铂可能诱导Hela细胞发生内质网应激,从而促进细胞凋亡的发生。
- 徐冶李质馨曹慧玲于洋刘师兵王晓军
- 关键词：顺铂内质网应激凋亡
- LBH589对胃癌细胞增殖的影响及其机制的研究
- 2011年
- 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589对胃癌细胞系BGC-823增殖的影响。方法体外培养胃癌BGC-823细胞,MTT检测LBH589对BGC-823细胞增殖率的影响;Western Blotting检测内质网应激相关蛋白GRP78,内质网凋亡相关蛋白CHOP、caspase-4表达水平的改变。结果与对照组相比,给予不同浓度LBH589细胞增殖率明显下降;同时LBH589可以引起内质网应激相关蛋白GRP78表达水平的上调,内质网凋亡相关蛋白CHOP、caspase-4表达水平也明显升高。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589可能通过内质网应激-凋亡通路诱导BGC-823细胞发生凋亡。
- 金镇勋兰汝春王菲董长松徐冶
- 关键词：胃癌内质网应激组蛋白去乙酰化酶
- 过氧化氢通过内质网应激信号通路对Hela细胞自噬和凋亡的诱导作用被引量：5
- 2015年
- 目的:利用过氧化氢(H2O2)构建人宫颈癌Hela细胞体外氧化应激模型,观察其对Hela细胞自噬和凋亡的影响,并探讨H2O2与内质网应激(ERS)信号通路之间的关系。方法:以1mmol·L-1 H2O2构建体外氧化应激模型;实验分为对照组、H2O24h组、H2O28h组和H2O212h组,各组细胞分别以H2O2作用0、4、8及12h后,利用Western blotting法检测各组Hela细胞中ERS及凋亡、自噬相关蛋白表达。结果:与对照组比较,各H2O2组Hela细胞中Cleaved Caspase-3表达水平升高(P<0.05),Cleaved Caspase-4表达水平亦明显升高(P<0.05);各H2O2组Hela细胞中LC3-Ⅱ表达水平高于对照组(P<0.05),GRP78表达水平亦高于对照组(P<0.05);随着H2O2作用时间的延长,各H2O2组Hela细胞中IRE1a表达水平明显升高(P<0.01),p-JNK表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论:在H2O2所构建的体外氧化应激模型中H2O2能够诱导Hela细胞发生自噬和凋亡,且该诱导作用由ERS信号通路介导。
- 于洋徐冶刘师兵衣丹李松岩王晓军
- 关键词：过氧化氢内质网应激自噬HELA细胞
