福建省科技计划项目(2007F5018) 作品数:6 被引量:9 H指数:2 相关作者: 王平 唐琦 王发明 吕柳新 陈伟 更多>> 相关机构: 福建农林大学 三明市农业科学研究所 更多>> 发文基金: 福建省科技计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
柚(Citrus grandis Osbeck)单染色体LA-PCR-AFLP技术体系中外源污染的防控 被引量:2 2010年 对柚单染色体LA-PCR-AFLP技术体系中外源DNA污染问题中不同试验用水、加接头连接前后步骤对水污染的敏感度以及LA-PCR形成的非特异性亮带现象进行对比研究。结果表明:8种试验用水中BT水(Bioteke,RNase-free and DNase-free Water)的防控效果最佳;水的质量对LA-PCR过程中接头连接之前的步骤影响最大,对加接头之后的步骤也有一定的影响;非特异性亮带为引物自连形成的多聚体,与外源污染无关。本试验通过对外源污染的来源和关键步骤实施严格防控,经过dot blot验证,使外源污染能够得到有效控制。这为建立高质量的柚单染色体文库奠定了基础。 王发明 王平 唐琦 柳燕贞 陈伟关键词:单染色体 外源污染 DOT BLOT 柚单染色体微分离制片技术研究 被引量:2 2010年 以“琯溪蜜柚”幼胚为材料,对单染色体微分离制片过程中3个关键因子对制片的影响效果进行了研究;分别设计了6个不同酶解时间、4个冰水固缩时间和两种不同染液染色处理,通过显微镜观察和拍照;结果表明:用2%纤维素酶与0.5%果胶酶的混合液处理40~60min,后低渗处理之后进行20~30min冰水固缩处理和卡宝品红染色组合可以得到理想的制片效果,背景干净,各单染色体充分分散,容易辨认和挑取;该方法制片适合小型单染色体开展下一步的微分离和微克隆研究。 王平 乔锋 王发明 柳燕挣 唐琦关键词:染色体制片 柚雌蕊不同部位抽提液对自交不亲和阻抑效果的研究 2010年 以‘土柚’(Citrus grandis ‘Tuyou’)作对照,采用荧光显微技术对‘琯溪蜜柚’(Citrus grandis‘Guanxi-miyou’)、‘度尾蜜柚’(Citrus grandis ‘Duweimiyou’)两个品种花粉在本品种和异品种雌蕊不同部位抽提液中花粉萌发和花粉管伸长状态进行了观察。结果表明:‘琯溪蜜柚’和‘度尾蜜柚’子房抽提液对自身花粉管伸长阻抑最明显,并产生严重的弯曲;柱头抽提液对自身花粉管伸长稍有影响,出现中度弯曲;花柱抽提液中自身花粉管伸长正常,仅有轻微弯曲。然而,对于异品种的花粉以及自交亲和的‘土柚’,其子房、花柱和柱头抽提液对花粉管伸长没有这种阻抑效应。 王平 吕柳新关键词:自交不亲和性 花粉 雌蕊 琯溪蜜柚和度尾蜜柚自交不亲和阻抑部位的研究——雌蕊不同部位组织离体授粉观察 2009年 将琯溪蜜柚和度尾蜜柚2个品种的雌蕊,分别短截成柱头、花柱和子房3个部位的组织块,移植到培养基上培养,播上本品种或异品种的花粉,通过荧光显微技术,观察雌蕊的不同部位对交配亲和性的影响。结果表明:本品种或异品种的花粉虽然在3个部位组织块上均能正常萌发,但在本品种子房组织块上出现了强烈不亲和反应;琯溪蜜柚在胚囊中观察到因胼胝质积累而出现的强烈荧光。推测子房是2个品种自交不亲和的主要抑制部位,胚囊也是琯溪蜜柚不亲和的关键抑制部位。 王平 吕柳新关键词:琯溪蜜柚 度尾蜜柚 自交不亲和性 柚(Citrus grandis Osbeck)单染色体LA-PCR-AFLP分子标记体系的建立 被引量:1 2010年 通过微分离和微克隆技术,对柚单染色体LA-PCR-AFLP技术体系中反应程序、模板浓度等关键参数进行了优化和引物筛选。结果表明:退火温度较高的程序TD3[退火梯度:72℃→65℃30 s(-0.5℃/cyc)]扩增效果较好;稀释100倍(10 ng/μL)为最适模板量;10个引物对组合扩增多态性较好。对22条单染色体的AFLP多态性分析和dot-blot杂交验证,表明较好地构建了柚单染色体LA-PCR-AFLP体系。这为柚单染色体的识别和文库构建提供了试验基础。 王发明 王平 唐琦 柳燕贞 陈伟关键词:单染色体 不同授粉方式下‘度尾蜜柚’亲和性及其生物学效应 被引量:4 2009年 通过3种授粉处理,对‘度尾蜜柚’自交不亲和性及产生的若干生物学效应进行了观察。结果表明:在正常自交的情况下,‘度尾蜜柚’存在不亲和性,大部分果实无籽,随着果实的成熟,果形指数逐步降低,中心柱空心,果顶皮层厚度逐渐变薄,裂瓣大量产生,同时一部分果实顶部裂开,霉菌侵染果肉,失去食用价值;蕾期自交能在一定程度上克服不亲和性,产生少量的种子,能有效防止果实横向和纵向不均衡生长,促进果实中心柱较好地保持实心状态,果顶皮层增厚,从而显著降低了裂果和裂瓣;用‘?溪蜜柚’花粉异交授粉,果实种子数显著增多,果形指数变化较小,中心柱实心,少有裂果和裂瓣发生,但食用品质受到影响。 王平 吕柳新关键词:度尾蜜柚 授粉方式 不亲和性