上海市公共卫生重点学科建设项目(12GWZX0201)
- 作品数:15 被引量:54H指数:4
- 相关作者:张博钱开诚莫琴王迅黄宇闻更多>>
- 相关机构:上海市血液中心华东师范大学上海市浦东新区公利医院更多>>
- 发文基金:上海市公共卫生重点学科建设项目上海市卫生局科研基金卫生行业科研专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 雷帕霉素联合人脐带血CD4^+ CD25^+调节性T细胞治疗胶原诱导性关节炎小鼠的初步研究被引量:3
- 2014年
- 目的:初步探讨雷帕霉素(Rapa)联合人脐带血CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)对胶原诱导性关节炎小鼠的治疗作用。方法:通过体外扩增培养获得人脐带血Tregs;建立牛Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎(CIA)小鼠模型;将CIA小鼠随机分为对照组,Tregs治疗组,Rapa治疗组,Tregs与Rapa联合治疗组;小鼠骨关节切片进行Safranin O-fast green染色、甲苯胺蓝染色以及HE染色;ELISA法检测CIA小鼠血浆抗Ⅱ型胶原抗体浓度;流式细胞术检测CIA小鼠脾脏CD4+T细胞亚型;检测Tregs在体外对CIA小鼠Ⅱ型胶原特异性CD4+T细胞增殖的抑制功能;Transwell分隔培养法比较非接触培养与直接接触培养中Tregs对CD4+T细胞增殖抑制作用的差异。结果:Tregs与Rapa联合治疗能够延缓疾病发生,显著降低关节炎评分,减少CIA小鼠关节中软骨的破坏以及炎症细胞浸润,降低CIA小鼠血浆中抗胶原总IgG抗体水平以及脾脏中Th17细胞比例;Tregs在体外能够有效抑制CIA小鼠胶原特异性CD4+T细胞的增殖,这种抑制作用主要可能是通过直接接触抑制途径起作用。结论:雷帕霉素联合人脐带血Tregs治疗能够改善CIA小鼠关节炎症状。
- 杨燕杨懿铭李振华杨洁任亚娜谢如峰范华骅
- 关键词:脐带血雷帕霉素CD4+CD25+调节性T细胞胶原诱导性关节炎
- 热力与亚甲蓝光化学法联合应用灭活辛德毕斯病毒效果的研究
- 2015年
- 目的研究热力与亚甲蓝光化学法联合应用灭活辛德毕斯病毒的效果。方法采用细胞培养法和基因检测技术,对热力与亚甲蓝光化学法联合应用灭活辛德毕斯病毒的效果进行了评价。结果经56℃水浴中热力预灭活处理1.5 h,辛德毕斯病毒滴度≤0.5 TCID50/ml,灭活对数值达到6.33 TCID50/ml;未经预灭活的辛德毕斯病毒在1μmol/L亚甲蓝+光照(MB+L)处理中随光照时间的延长,病毒残余滴度逐渐下降至检测限(TCID50/ml=0.5)。经热力灭活预处理的辛德毕斯病毒与未经预处理的病毒核酸载量之间具有相关性(R2>0.98,显著性F<0.01)。结论热力灭活预处理的辛德毕斯病毒能够反映活病毒的亚甲蓝病毒灭活效果,有望成为安全而有效的病毒灭活效果评价制品。
- 张博黄宇闻莫琴伍晓菲刘晓颖王迅郑岚
- 关键词:热力亚甲蓝光化学法辛德毕斯病毒灭活效果
- 中国壮族人群Lutheran缺失表型的EKLF/KLF1基因多态性研究被引量:1
- 2013年
- 目的针对中国壮族人群中的Lu(a-b-)表型,检测其相关的EKLF/KLF1调控基因,以揭示其分子机理和遗传背景。方法对4 527名壮族人群中筛查出的22名Lu(b-)表型的先证者进行家系调查,血清学筛查家系中Lu(a-b-)个体,扩增其EKLF/KLF1调控基因的3个外显子,测序分析其遗传背景。结果在22个家系中包括先证者共检测出Lu(a-b-)表型57名。其中19个家系共51名个体的EKLF/KLF1基因中均发现同样的519-525dupCGGCGCC杂合突变;其余3个家系Lu(a-b-)表型的EKLF/KLF1基因中均发现895C>G杂合突变。结论中国壮族Lu(a-b-)血型的分子背景可能与EKLF/KLF1基因的特异性杂合突变密切相关,且绝大多数为519-525dupCGGCGCC的杂合突变类型。
- 王晨焦伟黎海澜叶璐夷朱自严
- 关键词:稀有血型
- HBsAg阴性、HBV DNA阳性献血者病毒感染特征研究被引量:7
- 2014年
- 目的了解上海地区献血人群中血清HBsAg阴性、HBV DNA阳性感染的流行率、病毒血清学和分子生物学特点。方法选取HBsAg阴性、核酸筛查确认为HBV DNA阳性的献血者血清标本,采用酶联免疫法(ELISA)检测病毒血清标志物抗-HBc和抗-HBs;PCR扩增HBV S区基因片段,对扩增后的产物进行测序分析后,将产物序列与Genbank中HBV序列进行Blast比对,获得标本HBV毒株的基因型;采用DNAMAN软件进行蛋白表达分析,确定标本毒株的血清型,并与Genbank中野生型HBV序列进行比较,获得S区基因编码蛋白突变情况。结果上海地区HBsAg阴性献血人群HBV DNA阳性感染率约为0.045%。18例HBsAg阴性、HBV DNA阳性标本血清病毒载量均低于200IU/ml,且大部分低于20IU/ml;其中14例(77.8%)病毒血清标志物为抗-HBc和/或抗-HBs阳性。18例样本全部为B和C基因型,主要为adw和adr血清型。14例血清抗-HBc和/或抗-HBs阳性样本中,13例样本发生了S蛋白氨基酸突变,其中8例B基因型较多发生Q101K/H、M103T/I、F134L、D144A突变,5例C基因型较多发生S114T/A、T118K/R、K141T、S143T突变;4例血清阴性样本中,均未发生S区蛋白位点突变。结论上海地区献血者存在HBsAg阴性、HBV DNA阳性感染者,其血清病毒载量低,感染病毒全部为B和C基因型,主要为adw和adr血清型;其中大部分为隐匿性HBV感染,少数可能为窗口期感染;隐匿性HBV感染病毒多发生S蛋白氨基酸位点突变。
- 伍晓菲刘晓颖张博莫琴黄宇闻贾尧郑岚谢云峥王迅
- 关键词:献血者隐匿性HBV感染
- 不同氧环境下维生素C对核黄素光化学法灭活血浆中大肠杆菌的影响
- 2015年
- 目的研究313nm作为激发光时,不同氧环境下维生素C(Vc)对核黄素(Rf)光化学法灭活血浆中大肠杆菌效果的影响。方法将含有50μmol/L的RF和0、12.5、25、37.5和50mmol/L维生素C的混合血浆与大肠杆菌液混合后盛装于12孔培养板、排除空气的PVC储血袋(乏氧)和充加纯氧的PVC储血袋(充氧),用313nm波长紫外光辐照,照射剂量为5J/mL,观察不同氧环境和Vc对RF化学灭活大肠杆菌效果的影响。结果在培养板中Vc有促进RF光化学灭活大肠杆菌的效能;在排除空气的PVC储血袋(乏氧)中,Vc促进RF光化学灭活大肠杆菌的效能的作用明显减弱;与乏氧环境相比较,在充加纯氧的PVC储血袋(充氧)中,Vc有促进RF光化学灭活大肠杆菌的效能,当Vc浓度为10mmol/L时,大肠杆菌的滴度下降4.3log/mL。结论在高含氧环境下Vc联合RF经313nm波长光源照射可有效灭活血浆中的大肠杆菌;Vc作为1种病原体灭活的光化学底物的可能性和可行性值得做进一步深入探讨。
- 周伟业程珍珍张博莫琴王迅黄宇闻
- 关键词:维生素C核黄素光化学大肠杆菌
- 贮存式自体输血的临床应用进展被引量:19
- 2015年
- 随着对异体输血相关并发症的认识,自体输血越来越受到人们的关注。其中贮存式自体输血因其科学、安全、有效的优势,在各种外科手术中得到较多的应用,但在许多方面仍存在问题和争议。鉴于我国临床用血的严峻形势,有必要对贮存式自体输血进行积极的探索,解决存在的问题,提高输血水平。
- 吕娜郭建荣钱开诚
- 关键词:自体输血贮存式促红细胞生成素
- 上海地区汉族人群Lutheran缺失表型的筛选及其分子背景研究被引量:1
- 2014年
- 目的在上海地区汉族人群中筛选Lu(a—b-)表型并统计该表型的频率。通过检测其LU基因及其相关EKLF/KLF1调控基因,揭示其分子机理。方法应用血清学方法对上海地区无偿献血者的Lub抗原进行筛选。对Lu(b-)个体鉴定其Lua、P1、i抗原。针对筛选出的Lu(a—b-)标本,对其LU基因的15个外显子以及相关的EKLF/KLF1基因3个外显子进行扩增并测序。结果在上海地区44331名无偿献血者标本中筛选出10份Lu(a—b-)标本。其LU基因均未发现纯合或杂合型突变,但在相关的EKLF/KLF1基因中发现7种不同的突变。结论Lu(a—b-)血型在上海地区汉族人群的频率约为0.02%,均为In(Lu)个体,其分子机制可能与EKLF/KLF1基因的杂合突变有关。
- 王晨李勤郭忠慧叶璐夷朱自严
- 关键词:稀有血型
- 多重PCR筛选广西壮族人群稀有血型Fy(a-)、s-、k-、Di(b-)、Js(b-)被引量:6
- 2014年
- 目的通过分子生物学方法,筛选广西壮族随机献血者样本中的Fy(a-)、s-、k-、Di(b-)、Js(b-)表型,获得壮族稀有血型资料,丰富中国稀有血型库。方法基于血型抗原Fyb、S等位基因单核苷酸多态性位点,设计序列特异性引物,优化PCR条件,建立多重PCR体系I;并使用筛选稀有血型等位基因Dib、k、Jsb1910、Jsb2019多重PCR体系Ⅱ共同对4490份广西壮族随机献血者样本进行筛选。结果成功构建检测血型抗原Fyb、S的多重PCR体系I,经验证多重PCR体系I具有良好的准确度和稳定性。使用多重PCR体系I和Ⅱ在4490份广西壮族随机献血者样本中共检出5例Fy(a-),3例S(-)及2例Di(b-)。结论多重PCR能够用于稀有血型的大规模筛选,获得的广西壮族人群稀有血型样本丰富了稀有血型数据库,为临床输注配合性血液提供了宝贵资料。
- 焦伟谢莉黎海澜蓝娇莫柱宁阳子骥刘斐肖瑞平贺云蕾叶璐夷朱自严
- 关键词:稀有血型序列特异性引物基因分型
- 血液成分光化学病原体灭活技术及其机制的研究进展被引量:3
- 2013年
- 采用安全、可靠的技术对血液成分中病毒等病原体进行灭活处理,阻断血液筛查中漏检或某些未列入筛查范围的病原体的传播,这是杜绝输血传染病的重要手段,也是应对突发性的经输血传播感染性疾病的公共卫生事件最迅速有效的办法,如2002年FDA建议在血液筛查中增加检测美洲锥形虫,之前亚甲蓝(MB)光化学法已被证实可部分杀灭美洲锥形虫(〉3.5log)。2003年我国SARS爆发后,也已证明SARS可被MB光化学法灭活(约6.5log)。
- 周伟业张博钱开诚
- 关键词:去污剂亚甲蓝补骨脂素光化学
- 库存血小板血浆中sCD40L含量变化及其对PMNs呼吸爆发的作用被引量:1
- 2013年
- 目的探讨单采血小板(A-PLTs)和白膜法浓缩血小板(BC-PLTs)库存过程中,其乏血小板血浆(简称血浆)中可溶性CD40配体(sCD40L)含量变化及对中性粒细胞(PMNs)呼吸爆发的作用。方法取库存d1、d3、d5的A-PLTs和BC-PLTs,离心分离获得血浆;ELISA检测血浆中sCD40L的含量;用活性氧特异性荧光探针二氢若丹明123(DHR),流式细胞术检测PMNs呼吸爆发;以小鼠抗人CD154抗体抑制试验去除sCD40L。结果 sCD40L含量(pg/mL),在血小板库存d1、d3、d5时,A-PLTs血浆分别为1 341.62±279.92、2 589.69±856.83及3 250±1 170.44(P<0.05);BC-PLTs血浆分别为3 342.35±1 322.30、3 827.12±1 714.43及3 691.87±1 631.03(P>0.05)。血浆引发fMLP(formyl-Met-Leu-Phe)活化的PMNs呼吸爆发程度(PMNs的引发活性),库存d1、d5 A-PLTs血浆处理组相对于单独加入fMLP阴性对照组其MFI比值相应为1.25±0.1、1.76±0.41(P<0.05)。用小鼠抗人CD154抗体特异性去除血浆中的sCD40L后血浆引发fMLP活化的PMNs呼吸爆发程度相应降低41.84%。以0.1μm滤器滤除血小板微粒后血浆引发fMLP活化的PMNs呼吸爆发程度相应降低69.56%。结论常规库存的血小板随库存时间延长,其血浆中的sCD40L水平升高,并对fMLP活化的PMNs的呼吸爆发具有引发作用。
- 李玮谢如锋任亚娜杨懿铭钱开诚范华骅
- 关键词:血小板SCD40L中性粒细胞