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十字花科植物C2H2型锌指蛋白新基因BcMF20同源序列克隆与进化分析被引量：6: 2011年; 为获取C2H2型锌指蛋白基因在物种间的分类和进化关系,分析其在基因结构上的保守性,更好地研究该基因在植物花粉发育中的功能,根据白菜花粉发育相关基因BcMF20 DNA序列设计引物,运用PCR技术分别从十字花科芸薹属和萝卜属18种材料中克隆了C2H2型锌指蛋白基因BcMF20的同源序列。经序列比对分析,BcMF20同源基因在DNA序列上的相似性为86.9%～100%,所推导的氨基酸序列相似性为77.6%～100%,在锌指的保守区域,氨基酸序列完全相同。这些结果表明该基因具有较好的保守性,可能在十字花科植物的花粉发育中行使重要的功能。; 韩莹琰张爱红范双喜曹家树; 关键词：十字花科系统发育

叶用莴苣热激蛋白LsHsp70-1707基因的克隆及表达分析被引量：1: 2015年; 为了解叶用莴苣热激蛋白LsHsp70-1707基因在高温下的作用机制,通过同源克隆及RACE技术克隆并获得叶用莴苣热激蛋白LsHsp70-1707基因全长cDNA序列,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析基因在不同叶用莴苣品种中的表达量差异。该基因全长2 400bp(KP258179),开放阅读框为2 106bp,编码701个氨基酸,与西瓜(AAC03416.1)、牵牛花(ABZ04081.1)、黄瓜(CAA52149.1)、菠菜(AAB91471.1)等HSP70蛋白高度同源。实时荧光定量PCR结果表明:高温处理时,该基因在热敏品种中表达没有明显增加,随着处理时间的增加甚至表现为下调,而在耐热品种中,其表达上调。成功克隆得到叶用莴苣热激蛋白LsHsp70-1707基因,热胁迫下该基因在不同品种中的表达有一定的差异性,推测该基因可能与叶用莴苣耐热性相关。; 赵真真韩莹琰李雅博范双喜郝敬虹刘超杰李婷; 关键词：叶用莴苣 HSP70 基因克隆

叶用莴苣TRAP反应体系的建立被引量：1: 2014年; 以叶用莴苣为试材,采用正交设计和单因素试验2种方法研究叶用莴苣TRAP反应体系中Mg^2＋、Taq DNA聚合酶、dNTPs、引物等4个因素的浓度变化对扩增结果的影响,建立最佳反应体系。结果表明：TRAP-PCR反应最优体系是在20μL反应体系中含DNA模板60～100 ng、10×PCR buffer（Mg^2＋free）2μL、Mg^2＋终浓度2.0 mmol/L、Taq DNA聚合酶含量1.0 U、dNTPs终浓度0.2 mmol/L、引物终浓度0.75μmol/L。该体系对叶用莴苣种质的扩增结果稳定,条带清晰度高且多态性丰富,可用于对叶用莴苣种质资源的遗传多样性分析和亲缘关系鉴定。; 王亚楠韩莹琰范双喜; 关键词：叶用莴苣 PCR

紫色叶用莴苣遗传多样性及亲缘关系的TRAP分析被引量：8: 2015年; 利用TRAP标记对47份紫色叶用莴苣种质进行亲缘关系及遗传多样性分析。20对引物组合共扩增出多态性条带430条,多态性比率(PPB)为67.08%。47份紫色叶用莴苣材料的遗传相似系数在0.7063~0.9828之间,Nei’s基因多样性指数(He)和Shannon’s信息指数(I)分别为0.2553和0.3976,遗传多样性水平较低。聚类分析结果表明,47份紫色叶用莴苣材料分为2大类群,第Ⅱ类群又分为5个亚类,叶片形态相似的种质基本上聚在一起,亲缘关系较近。; 王亚楠韩莹琰范双喜卜斌

叶用莴苣组织培养再生体系的建立被引量：2: 2015年; 为了满足市场需求,通过组织培养技术可以使叶用莴苣不受季节气候所牵制。随时可以工厂化大量生产,以达到百姓日食之需。本研究以PS11叶用莴苣为试材,从种子开始培育无菌苗,MS培养基为基础培养基,附加不同浓度的6-BA和NAA激素配比,再经愈伤组织诱导、芽分化、生根3个步骤的离体培养,建立叶用莴苣快速高效的再生体系。研究表明:该品种最佳诱导愈伤组织分化的培养基为MS+0.2mg/L6-BA+0.4mg/LNAA,出愈率达到100%,出芽率达到71.6%。; 黄冠华韩莹琰李雅博范双喜; 关键词：叶用莴苣

叶用莴苣叶片总蛋白质双向电泳影响因素的研究被引量：2: 2012年; 以叶用莴苣叶片为试材,研究17cm固相pH梯度胶条(pH 4～7)体系下双向电泳不同的提取方法、上样体积、定量方法等影响因素,力求确定其理想的双向电泳条件。结果表明,酚-甲醇/醋酸铵沉淀法对蛋白质提取更彻底,效果更好。对于蛋白质定量的试验,相比于常规的Bradford方法,利用无干扰蛋白质定量试剂盒具有更好的准确性。考虑叶片总蛋白质中大量Rubisco的存在,应相对增加上样量,采用考马斯亮蓝染色时取800μg到1 100μg蛋白质进行双向电泳比较合理。; 陈曙红韩莹琰范双喜李洋; 关键词：叶用莴苣叶片双向电泳技术

叶用莴苣优异种质资源的鉴定和筛选: [目的与意义]我国叶用莴苣栽培品种主要靠引进国外已有品种,具有自主知识产权的品种和类型很有限,且在品种资源搜集、鉴定上几乎是空白。需要多角度、多方法开展种质资源的创新工作,开发出品质优良的叶用莴苣新品种,来满足当前生产的...; 范双喜韩莹琰刘超杰郝敬虹董洁李君平赵真真; 关键词：叶用莴苣优异种质资源

社区支持农业(CAS)模式对提高植物生产类学生实践技能的启发被引量：4: 2013年; 通过介绍美国罗格斯.新泽西州立大学社区支持农业(CAS)模式,结合当前植物生产类专业学生实践能力的培养现状,以期为植物生产类学生实践教学提供一些新的思路和启发。; 韩莹琰

高温胁迫下不同耐热性叶用莴苣幼苗Hsp70和Hsp90表达量差异与耐热性指标研究: 热休克蛋白Hsp70和Hsp90在植物体中的表达量随温度变化呈现一定的规律性。叶用莴苣喜冷凉湿润的气候条件,夏季生长易受高温影响,提早抽薹,产量和品质下降。探究高温胁迫下Hsp70和Hsp90在不同耐热性叶用莴苣幼苗中的...; 范双喜韩莹琰刘超杰郝敬虹李洋李君平赵真真; 关键词：叶用莴苣高温胁迫 HSP70 HSP90 表达量

叶用莴苣荧光定量PCR体系的优化被引量：4: 2013年; 为建立一套最适合叶用莴苣(Lactuca sativa L.)基因表达量研究的荧光定量PCR技术体系,以叶用莴苣S24为试材,采用SYBR Green Ⅰ法,利用叶用莴苣内参基因的2对引物组合18SR1和18SR2,分别在10μL和20μL反应体系条件下进行扩增反应。结果表明,分别在10μL和20μL反应体系条件下内参基因引物组合18SR1的扩增曲线、标准曲线以及溶解曲线等指标都优于内参基因引物组合18SR2;2对内参基因引物组合18SR1和18SR2在10μL反应体系中的扩增曲线、标准曲线以及溶解曲线等指标也均优于20μL反应体系。因此叶用莴苣荧光定量PCR内参基因利用18SR1引物组合,反应体系采用10μL比较合理。; 李婷韩莹琰范双喜任月; 关键词：荧光定量PCR SYBR

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北京市科技新星计划(2010B020)