国家自然科学基金(81372653)
- 作品数:1 被引量:3H指数:1
- 相关作者:施思徐永锋程合虞先濬刘辰更多>>
- 相关机构:复旦大学附属肿瘤医院复旦大学上海医学院复旦大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 胰腺癌内质网应激微环境活化核转录因子-κB通路对内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78的调控作用被引量:3
- 2014年
- 目的探讨内质网应激(ERS)肿瘤微环境对胰腺癌中核转录因子(NF)-κB信号通路的激活效应,以及NF-κB对ERS分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的调控作用。方法采用Western印迹法检测经ERS诱导剂毒胡萝卜素(Tg)处理后人胰腺癌细胞系PANC-1细胞中ERS分子伴侣GRP78和NF-κB信号通路相关分子的表达情况,以及RNA干扰NF-κB/P65表达后GRP78的表达情况。通过反复Tg处理PANC-1细胞,建立ERS诱导细胞系PANC-ERS,采用细胞计数试剂盒(CCK)-8比色法检测其增殖能力,应用Transwell迁移试验检测其迁移能力。同时,采用Western印迹法检测PANC-ERS细胞中GRP78和NF-κB信号通路相关分子的表达情况。结果 Tg 2.5、5.0μg/mL处理组GRP78条带的光密度值分别为555 855.3±28 310.3、945 831.0±20 643.2,均显著高于未处理组的352 606.7±15 843.8(P值均<0.05),较未处理组分别上调了(1.57±0.05)和(2.64±0.13)倍。Tg 2.5、5.0μg/mL处理组NF-κB/P65条带的光密度值分别为1 470 315.0±18 036.6、2 231 275.3±218 250.8,均显著高于未处理组的1 061 648.3±61 723.7(P值均<0.05),较未处理组分别上调了(1.38±0.05)和(2.07±0.16)倍。Tg 2.5、5.0μg/mL处理组的IKBα条带的光密度值分别为228 153.3±325 929.1、106 070.0±6 550.5,均显著低于未处理组的318 308.3±20 897.7(P值均<0.05),较未处理组分别下调了(72.2±13.9)%和(32.9±2.1)%。shNF-κB/P65干扰后NF-κB/P65和GRP78的光密度值分别为714 109.7±12 774.6和467 384.3±10 745.5,均显著低于shSCR干扰后的1 448 839.3±15 362.5和894 971.3±6 772.0(P值均<0.05),下调幅度分别为(47.6±0.5)%和(50.4±2.3)%。培养2、3、4d的PANC-ERS细胞的光密度值分别为0.557±0.066、0.883±0.082、1.375±0.125,分别显著高于PANC-1细胞的0.445±0.059、0.686±0.069、0.948±0.114(P值均<0.05)。Transwell迁移实验显示,光学显微镜下见穿过小室的PANC-ERS细胞数为171.2±9.4,显著多于PANC-1细胞的127.7±8.9(P<0.05)。正常培养基培养3代后的PANC
- 施思施思徐永锋刘辰鹿语徐永锋
- 关键词:胰腺癌内质网应激核转录因子-ΚB葡萄糖调节蛋白78