上海市科委科研计划项目(06JC14014)
- 作品数:3 被引量:5H指数:2
- 相关作者:徐江红陈兵章德广郭建顾凌澜更多>>
- 相关机构:复旦大学南昌大学更多>>
- 发文基金:上海市科委科研计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 新型肺炎链球菌疫苗研究进展被引量:1
- 2009年
- 肺炎链球菌是肺炎、脑膜炎、败血症、中耳炎和鼻窦炎的主要致病菌。目前针对肺炎链球菌疾病的预防主要是以多糖为基础的23价多糖疫苗和7价多糖蛋白结合疫苗,但因其有血清型的限制,应用有很大的局限性。因此以肺炎链球菌表面毒力因子或蛋白为基础的、无血清型限制的肺炎链球菌蛋白疫苗将成为新型肺炎链球菌疫苗发展的方向,此文综述了肺炎链球菌蛋白疫苗的研究进展。
- 徐江红陈兵
- 关键词:疫苗细菌蛋白质类
- 肺炎链球菌自溶素基因的克隆、表达及蛋白纯化被引量:3
- 2009年
- 目的克隆肺炎链球菌自溶素(LytA)基因并在大肠埃希菌中表达及蛋白纯化。方法用PCR方法从肺炎链球菌基因组中克隆肺炎链球菌自溶素基因,然后将其插入原核表达载体pET32a(+),构建pET32a(+)-LytA重组质粒,经IPTG诱导使该基因在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,亲和层析法纯化目的蛋白,将获得的蛋白用Western blot鉴定。结果扩增出的DNA序列与GenBank中的LytA基因序列一致,成功构建了pET32a(+)-LytA重组质粒并在大肠埃希菌中高效表达,所表达的蛋白经Western blot证实为肺炎链球菌自溶素融合蛋白。结论成功克隆了肺炎链球菌自溶素基因,并将其在大肠埃希菌中表达、纯化,为新型肺炎链球菌疫苗的研制奠定了基础。
- 徐江红陈兵章德广郭建顾凌澜
- 关键词:肺炎链球菌
- 肺炎链球菌自溶素核酸疫苗的制备及其免疫原性研究被引量:2
- 2009年
- 目的构建肺炎链球菌自溶素(pneumococcal autolysin,LytA)核酸疫苗,并研究其免疫原性。方法采用聚合酶链反应方法从肺炎链球菌基因组中克隆肺炎链球菌自溶素基因,然后将该基因插入到pVAX1真核表达载体中,构建表达LytA的重组质粒,制备成超螺旋比例大于90%的核酸疫苗。实验组:BALB/c小鼠5只,对其分3次肌内注射核酸疫苗(100μg);对照组:BALB/c小鼠5只,肌内注射pVAX1空载体(100μg)3次。分别采集小鼠血清,采用间接酶联免疫吸附方法测定血清LytA特异性抗体水平。结果扩增出的LytA基因(957 bp)与基因库中LytA的编码序列(957 bp)一致。成功构建了LytA核酸疫苗。实验组小鼠的血清Ly-tA抗体水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功克隆了LytA基因,制备了LytA核酸疫苗,后者可在小鼠体内诱导较强的特异性体液免疫反应。
- 徐江红王正敏陈兵章德广戴文佳朱美美徐晨媚
- 关键词:中耳炎链球菌肺炎疫苗