辽宁省博士科研启动基金(001040) 作品数:9 被引量:25 H指数:6 相关作者: 林蓓 郝莹莹 张淑兰 刁斌 朱连成 更多>> 相关机构: 中国医科大学 沈阳市第四人民医院 辽宁省肿瘤医院 更多>> 发文基金: 辽宁省博士科研启动基金 国家自然科学基金 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
Le^y抗原与肿瘤诊治过程中作用的研究进展 2008年 Ley抗原是某些糖蛋白和糖脂的末端寡糖,为双岩藻糖寡糖。Ley存在于上皮组织中,包括卵巢、胸腺、肺、胃及结肠等,当这些组织发生癌变时,60%~90%出现Ley表达明显增高,且增高的患者预后不佳。目前研究认为Ley是刺激细胞凋亡的促进因素,并且Ley单克隆抗体在体内、体外及临床试验中均显示出抗肿瘤作用,由于其对肿瘤细胞具有高选择性,良好的免疫耐受性及较长的半衰期,使其成为备受关注的肿瘤靶向治疗药物。近年来,美国纽约的Memorial Sloan-Kettering癌症中心用Ley抗原与软体动物提取的血蓝素KLH及免疫佐剂QS-21合成肿瘤免疫疫苗,在患者体内主动诱发产生了Ley抗原抗体,Ley在肿瘤主动免疫的成功应用,为肿瘤的防止带来光辉的前景。 刁斌 林蓓关键词:肿瘤 Le^y抗原与其在肿瘤诊治中的作用 2009年 刁斌 林蓓关键词:肿瘤诊治 Lewis y抗体对α1,2岩藻糖转移酶基因转染后卵巢癌细胞的体外抑制作用 被引量:9 2008年 目的:探讨Lewis y单克隆抗体(mAb)对α1,2岩藻糖转移酶基因转染后高表达Lewis y抗原的卵巢癌细胞系RMG-I-H的体外增殖能力、黏附力以及侵袭力的抑制作用。方法:通过体外细胞增殖实验、细胞黏附实验、细胞体外侵袭实验,以羊抗人IgG抗体处理组或无抗体处理组为对照,检测Lewis y mAb处理前后RMG-I-H细胞增殖能力、黏附力及侵袭力的变化。结果:细胞增殖力与黏附力测定结果表明,实验组与对照组之间有统计学意义(P<0.05),且与对照组相比,第2~7天的生长抑制率分别为5.62%、19.75%、34.96%、46.51%、49.78%和33.33%。不同培养时间(15、30、60min)的黏附抑制率分别为47.59%、58.64%和13.85%。体外细胞侵袭实验显示不同浓度Lewisy抗体处理组与对照组比较均无统计学意义(P>0.05)。结论:抗Lewis y mAb能明显抑制体外RMG-I-H细胞的生长及增殖能力、降低体外培养的RMG-I-H细胞的黏附性,Lewis y抗原与卵巢癌细胞增殖、黏附的生物学行为有关,Lewis y抗体在肿瘤的治疗中显示出潜在的应用价值。 李飞飞 林蓓 郝莹莹 刘娟娟 张帆 张淑兰关键词:LEWIS 卵巢癌 卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewis(y)抗原含量变化对其卡铂耐药性的影响 被引量:15 2008年 利用Lewis(y)抗原稳定高表达细胞株RMG-Ⅰ-H,研究细胞表面Lewis(y)抗原含量变化与细胞对卡铂耐药性的关系.利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度卡铂作用后细胞系RMG-Ⅰ-H及其对照组RMG-Ⅰ、RMG-Ⅰ-C的细胞生长抑制率(IR);利用流式细胞仪(FCM)分析细胞凋亡,同时检测药物作用后细胞的凋亡比率;利用荧光染色法和透射电镜进一步观察细胞凋亡状态.结果表明,RMG-Ⅰ-H的半数抑制浓度(IC50)为(58.07±2.42),明显高于对照组RMG-Ⅰ(28.83±3.57)和RMG-Ⅰ-C(25.71±8.24)的IC50(P<0.01),后两者间无统计学差异(P>0.05),流式细胞仪分析证实3组细胞均存在凋亡,经30mg/L、60mg/L卡铂处理后细胞再进行流式细胞仪检测,RMG-Ⅰ-H的相对凋亡率分别为(20.43±0.71)%和(38.11±0.33)%,为对照组的49%~63%,明显低于对照组(P<0.05),2个对照组间比较无统计学差异(P>0.05),荧光染色和透射电镜直接观察了细胞形态变化,每个浓度组RMG-Ⅰ-H的凋亡程度均低于RMG-Ⅰ和RMG-Ⅰ-C.说明细胞表面Lewis(y)抗原含量增加的同时,卵巢癌细胞对卡铂的耐药性增强. 赵越 林蓓 郝莹莹 严丽梅 刘娟娟 朱连成 张淑兰关键词:卵巢癌 卡铂 耐药性 转染α1,2-岩藻糖转移酶基因对人卵巢癌细胞系RMG-1癌相关基因表达的影响 被引量:10 2008年 背景与目的:前期研究证明转染外来α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosyl transferase,α1,2-FT)基因后人卵巢癌细胞系RMG-1的恶性生物学行为加强。本研究的目的是探讨转染α1,2-FT基因对卵巢癌细胞系RMG-1癌相关基因表达的影响。方法:将基因表达载体pcDNA3.1-HFT-H和空载体pcDNA3.1转染至RMG-1细胞中分别生成RMG-1-H细胞和RMG-1-C细胞,利用基因芯片对这两种细胞的基因表达序列进行分析,使用GoMiner在线数据库进行信息查询。结果:与RMG-1细胞比较,RMG-1-H细胞中有88种差异性表达基因,其中60种基因表达增强,28种基因表达降低。检索其基因功能,发现在分子功能、生物学行为和细胞成分定位三个分支上,差异表达的基因参与到了诸如蛋白质结合、核苷酸结合,细胞增殖、DNA依赖性转录的调节、信号转导、蛋白氨基酸磷酸化、转录、细胞粘附等多方面。结论:转染α1,2-FT基因使卵巢癌RMG-1细胞的基因表达发生了改变。 朱连成 林蓓 郝莹莹 李飞飞 刁斌 张淑兰关键词:基因表达谱 寡核苷酸芯片 Le^y抗原在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义 被引量:9 2008年 目的:探讨卵巢癌组织Ley抗原的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测恶性、交界性、良性卵巢上皮肿瘤及正常卵巢组织中Ley抗原的表达,并分析其与卵巢癌生物学特性之间的关系。结果:Ley抗原在恶性卵巢上皮性癌中的阳性表达率为75.47%(40/53),明显高于交界性卵巢上皮性肿瘤(47.06%)及良性卵巢上皮性肿瘤(42.86%)(P均<0.05)。正常卵巢组织中未检出Ley抗原的表达。晚期卵巢上皮性癌的Ley抗原的阳性表达率为84.21%,明显高于早期卵巢上皮性癌(53.33%),(P<0.05)。结论:Ley抗原与卵巢上皮性癌的发生、发展相关。Ley抗原的表达可作为反映卵巢癌恶性潜能的一项新的指标。 刁斌 黄金双 林蓓 周丹 郝莹莹 张淑兰关键词:卵巢上皮性肿瘤 免疫组化 α1,2-岩藻糖转移酶基因转染增加卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewis y抗原的表达 被引量:12 2008年 目的将人α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-FT)基因转染卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ并探讨细胞表面Lewisy及其他相关糖脂抗原的变化。方法采用PCR方法克隆人α1,2-FT基因编码区HFUT-H,构建表达载体pcDNA3.1(-)-HFUT-H,利用磷酸钙法将其转染入卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ,建立α1,2-FT基因稳定高表达细胞株RMG-Ⅰ-H。通过酶活性测定证明转染前后细胞系α1,2-FT活性的改变,采用薄层层析、薄层层析免疫染色方法测定转染前后细胞脂质及糖脂,特别是Ⅱ型寡糖的变化。结果基因转染后细胞RMG-Ⅰ-H中H-1抗原及Lewisy抗原显著增加,特别是Lewisy抗原为转染前的20倍;而Ⅰ型糖链Lewisb显著减少。转染前后细胞膜上的主要脂质成分胆固醇和磷脂质的含量没有变化,且中性糖脂质也没有明显变化。结论α1,2-FT基因转染增加α1,2-FT活性的同时,增加卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewisy抗原的表达;RMG-Ⅰ Lewisy高表达细胞系的建立为研究Lewisy抗原与卵巢癌生物学行为提供了细胞模型。 林蓓 郝莹莹 王冬冬 朱连成 张淑兰 齐藤真木子 岩森正男关键词:基因 转染 卵巢上皮性肿瘤组织中核转录因子E2F3蛋白的表达及其临床意义 2009年 目的:通过检测核转录因子E2F3蛋白在卵巢上皮性癌(卵巢癌)、卵巢交界性肿瘤、良性肿瘤和正常卵巢组织中的表达,探讨E2F3在卵巢上皮恶性肿瘤的发病机制中可能起到的作用,并为卵巢癌的早期筛查及基因治疗提供新思路。方法:采用免疫组化SP法检测33例卵巢上皮性癌,11例卵巢交界性肿瘤,13例卵巢良性肿瘤和12例正常卵巢组织中E2F3蛋白的表达,并分析其临床意义。结果:在卵巢癌、卵巢交界性肿瘤、良性肿瘤和正常卵巢组织中,E2F3蛋白的平均光密度值(MOD)分别为0.454±0.053、0.143±0.047、0.124±0.028、0.134±0.040。E2F3蛋白在卵巢癌组中的表达水平明显高于卵巢交界性肿瘤组,其差异具有统计学意义(P<0.01);而交界性肿瘤、良性肿瘤与正常卵巢三组间相比,差异不具有统计学意义(P>0.05)。在卵巢癌组中,E2F3蛋白的表达水平与手术病理分期、病理分级相关(P<0.01;P<0.01)。而与淋巴结转移的发生无关(P>0.05)。结论:核转录因子E2F3蛋白表达上调多见于卵巢癌组织,其表达水平与手术分期、病理分级相关。E2F3可能通过参与细胞周期调控,在卵巢癌的发生发展中起到促进作用。 王欢 林蓓关键词:卵巢肿瘤 E2F3 细胞周期 α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞生物学行为的影响 被引量:16 2008年 为探讨α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosvltransfemse,α1,2-FT)基因转染对卵巢癌细胞RMG-(?)生物学特性的影响,利用PCR方法克隆人α1,2-FT基因的编码区HFUT-H,构建表达载体pcDNA3.1-HFUT-H,利用磷酸钙法将其转染入卵巢癌细胞系RMG-(?),建立α1,2-FT基因稳定高表达细胞株RMG-I-H。采用RT-PCR及α1,2-FT活性测定检测转染前后细胞系α1.2-FT基因表达及α1,2-FT活性的变化,利用免疫细胞化学方法测定细胞表面Lewis y抗原表达变化.利用MTT法、流式细胞仪细胞增殖周期检测方法测定转染前后细胞系生物学特性的变化。分别以转染前细胞RMG-I和转染空载体细胞RMG-I-C为对照组。结果显示转染后细胞α1,2-FT mRNA表达增高,α1,2-FT活性增加20-30倍。转染后的细胞易复层生长,生长速度加快。细胞克隆边缘呈树突状延伸生长。转染后细胞RMG-I-H软琼脂克隆形成率(35%)明显高于对照组RMG-I (13%)及RMG-I-C(12%),为对照组的2.6倍。RMG-I-H细胞G_1期比例从对照组的74.14%下降到59.46%,G_2-M期和S期比例分别从对照组的2.05%和23.95%上升到7.32%和33.27%(P< 0.05)。这些结果充分说明,α1,2-FT及Lewis y抗原具有促进RMG-I细胞增殖,提高RMG-I细胞生存能力,促进肿瘤发生、发展的作用。 郝莹莹 林蓓 赵越 张宇华 李飞飞 刁斌 欧阳玲 张淑兰关键词:卵巢癌