广西教育厅立项科研项目(200710LX025)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：范蓉李立志赵飞兰李中华何国珍更多>>
- 相关机构：广西中医药大学广西壮族自治区民族医院天等县人民医院更多>>
- 发文基金：广西教育厅立项科研项目国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- QGY-7701肝癌细胞株中癌-睾丸抗原GAGE-1基因的表达被引量：2
- 2013年
- 目的研究癌-睾丸抗原GAGE-1基因mRNA在QGY-7701肝癌细胞株中的表达情况。方法运用反转录聚合酶链反应技术检测肝癌细胞株QGY-7701中GAGE-1基因mRNA的表达,并与正常肝组织比较。结果肝癌细胞株QGY-7701中GAGE-1基因呈阳性表达,正常肝组织中GAGE-1基因呈阴性表达。结论 GAGE-1基因具有作为诊断肝癌的分子标记和免疫治疗肝癌的特异性靶位的潜在价值。
- 农彩莲李立志范蓉何国珍李中华岑妍慧黄荣师陈青赵飞兰
- 关键词：肝癌癌-睾丸抗原反转录聚合酶链反应
- 癌-睾丸抗原GAGE-1基因的重组、表达及纯化
- 2014年
- 目的为进一步研究临床应用癌-睾丸抗原GAGE-1诱导特异性抗肿瘤免疫反应,对GAGE-1基因进行克隆、体外原核重组表达及蛋白分离纯化。方法运用RT-PCR技术从人QGY-7701肝癌细胞株中扩增GAGE-1基因片段,插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组表达质粒pGEX-6p-1-GAGE-1,并导入大肠杆菌BL21,IPTG诱导目的蛋白表达;经包涵体透析复性及GST柱亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳分析鉴定。结果扩增得到GAGE-1基因5’端251 bp片段,与GeneBank公布的序列一致,构建的PGEX-6p-1-GAGE-1原核表达质粒经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达分子量约35.7 kD的GST-GAGE-1融合蛋白,纯化后蛋白纯度为90%以上。结论成功构建PGEX-6p-1-GAGE-1重组表达质粒,并成功表达纯化了GST-GAGE-1融合蛋白,为进一步深入研究GAGE蛋白奠定了基础。
- 赵飞兰李立志封毅卓少元钟卫干范蓉
- 关键词：原核表达纯化融合蛋白
